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植物组织DNA的提取及纯化方法的研究 总被引：7，自引：0，他引：7
以小麦的幼芽和子房为材料,采用高等植物ＤＮＡ简易快速提取法,对小麦组织ＤＮＡ提取及纯化中的若干问题做了探讨。研究表明,小麦幼芽是提取ＤＮＡ的较为理想的材料,粗提ＤＮＡ用ＲＮＡ酶法进行纯化,纯化效果较好;纯化的幼芽ＤＮＡ稀释８倍即符合导入要求。 相似文献
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质粒常被用做基因的载体．纯化质粒DNA的方法可以分为3种：碱裂解法、煮沸裂解法和SDS碱裂解法．这些方法可以纯化共价闭合环结构质粒DNA,而大量获得高纯度的闭环结构质粒DNA最经典方法是氯化铯．溴化乙锭密度梯度离心法．该方法经过我们的实践与优化,减少了质粒中蛋白质和基因组DNA的污染,提高了质粒的纯度和得率,所得到的质粒用于拟南芥原生质体转化,效率高达60％～70％,明显高于普通的质粒小量抽提试剂盒所提取的质粒DNA． 相似文献
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目的研究杜仲叶中杜仲胶的提取及纯化方法。方法采用碱浸法和溶剂法结合法,从预处理后的杜仲叶中提取杜仲胶并利用溶解度差异对其进行纯化。采用正交实验对提取中的影响因素碱浓度、提取温度和提取时间进行考察,采用单因素实验对纯化溶剂进行考察。结果碱浓度15％．提取温度100℃．提取时间2．5h为提取杜仲胶的最佳工艺条件;在最佳条件下,石油醚对杜仲胶的纯化效果最好,汽油次之,但两者相差不大,乙醇最低。结论实验优选的提取条件简单、可行,可用于预处理后杜仲叶中杜仲胶的提取;汽油可作为作为杜仲胶纯化产业化生产中的溶剂。 相似文献
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Ji Xiaodong 《丹东师专学报》1997,(3)
国内农杆菌微型质粒ＤＮＡ提取较成功的方法尚未见报导。本法试提供一种快速、高效的提取方法。采用此法，可以避免小量提取繁琐的步骤，操作条件温和，方法简单，易于重复，生产率高，值得推广。 相似文献
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紫杉醇是一种从红豆杉植物中提取出来的天然抗癌药物．介绍了紫杉醇的化学结构和天然提取、纯化方法，对目前国内、外利用生物技术方法生产紫杉醇所作的尝试性研究和新的报道进行了综述． 相似文献
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本文研究了DEAE-Cellulose阴离子交换树脂纯化pCR-HBc-X6-βhCG CTP37质粒DNA的方法。经研究发现纯化的质粒不含RNA和蛋白质污染;其OD260/OD280高于1.8;每2500ml发酵液可得到4.95mg的质粒DNA。 相似文献
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质粒DNA提取方法的比较 总被引：1，自引：0，他引：1
以含有原核表达载体pet21a和真核表达载体EGFP的DH5α系列菌株为材料,分别采用碱裂解法和试剂盒提取法提取质粒DNA,通过凝胶电泳分析,对两种质粒提取方法的各自特点进行了比较与分析。认为碱裂解法和试剂盒提取法提取质粒DNA均可进行后续试验,但试剂盒提取法具有省时、简洁、高效的优势。同时根据在实验过程中所遇到的问题,说明了在进行质粒DNA提取过程中应当注意的问题。 相似文献
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本文介绍以种子植物幼嫩胚乳为材料，用改良的氯仿－异戊醇快速提取方法提取共总ＤＮＡ这种材料和方法，细胞磨碎容易，ＤＮＡ收取量大，操作简便，适用于遗传操作和教学实验等方面的ＤＮＡ快速制备。 相似文献
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该实验通过SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法提取土壤微生物基因组DNA,用DNA Nanophotometer仪测定样本DNA的纯度和浓度,以确定最佳提取方法.结果表明,用SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法和土壤微生物基因组DNA的浓度分别为41.45 ng/μl、96.48 ng/μl和58.40 ng/μl,纯度（OD260/OD280）分别1.45、1.57和1.82.由结果可知,改良法提取DNA的浓度最高,而Soil gDNA Kit法的纯度最高,但其成本较高,因此,SDS高盐法（改良法）是节省成本且适合提取大批量土壤微生物基因组DNA的方法,今后在提取DNA过程中进一步优化,以提高其纯度. 相似文献
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碱裂解法是目前最为广泛应用的质粒DNA的提取方法,本人利用0.9%NaC l溶液代替常规方法中的溶液Ⅰ,并缩短了一些步骤的反应时间,既达到了快速、简便提取质粒DNA的目的,又可以满足分子生物学后续实验的要求. 相似文献
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建设精品实验项目深化创新人才教育 总被引：1，自引：0，他引：1
精品实验项目“细菌纯种分离和培养”以校园河水、上海某污水处理厂的生活污水和生化反应池中的活性污泥等实际环境样品为研究对象,利用浇注平板法对校园河水、生活污水和活性污泥中的特有微生物进行分离、纯化,旨在得到能够降解污染物的细菌纯种.该项目将微生物学基本理论知识与实际环境问题相联系,将环境微生物学实验中原先相对独立的多个基本实验通过有机组合形成了一个完整的探索性综合实验,激发学生的学习兴趣,增强学生的主观能动性,培养学生的实践能力和创新能力. 相似文献
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将萤火虫萤光素酶基因重组到质粒pBR325中,通过“三亲交配”和同源重组,将萤光素酶基因整合到Ti质粒pGV3850:1103。通过改良的叶盘转化法,用萤光素酶基因转化单子叶植物花叶芋,获得转基因植株。对再生植株的胭脂碱测定、新霉素磷酸转移酶分析、DNA点杂交、萤光素酶基因活性测定,证明萤光素酶基因已转化到花叶芋中并进行了表达。 相似文献
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本研究对大肠杆菌进行紫外照射诱变后,获得了通过其内部的SOS修复系统产生的突变菌株,采用异丙醇沉淀法对各组菌种进行质粒DNA提取.通过测定各组OD值,经过比较与分析得出了经紫外处理10min后的大肠杆菌质粒DNA浓度最高,为215ug/ml,其次为正常组的190ug/ml.经紫外照射30min后的大肠杆菌质粒DNA浓度最低,仅为65ug/ml.紫外处理时间与质粒DNA浓度整体呈现下降趋势.初步推测是由于大肠杆菌SOS修复系统的RecA蛋白促进了不完全同源的DNA序列之间的重组,产生大量的错配碱基,从而引起突变,进而影响到其质粒DNA的浓度. 相似文献
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Qi WANG Xiaoxia SHEN Tian QIU Wei WU Lin LI Zhi'an WANG Huixia SHOU 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2021,22(2):99
Nucleic acids in plant tissue lysates can be captured quickly by a cellulose filter paper and prepared for amplification after a quick purification.In this study,a published filter paper strip method was modified by sticking the filter paper on a polyvinyl chloride resin(PVC)sheet.This modified method is named EZ-D,for EASY DNA extraction.Compared with the original cetyl trimethylammonium bromide(CTAB)method,DNA extracted by EZ-D is more efficient in polymerase chain reaction(PCR)amplification due to the more stable performance of the EZ-D stick.The EZ-D method is also faster,easier,and cheaper.PCR analyses showed that DNA extracted from several types of plant tissues by EZ-D was appropriate for specific identification of biological samples.A regular PCR reaction can detect the EZ-D-extracted DNA template at concentration as low as 0.1 ng/μL.Evaluation of the EZ-D showed that DNA extracts could be successfully amplified by PCR reaction for DNA fragments up to 3000 bp in length and up to 80%in GC content.EZ-D was successfully used for DNA extraction from a variety of plant species and plant tissues.Moreover,when EZ-D was combined with the loop-mediated isothermal amplification(LAMP)method,DNA identification of biological samples could be achieved without the need for specialized equipment.As an optimized DNA purification method,EZ-D shows great advantages in application and can be used widely in laboratories where equipment is limited and rapid results are required. 相似文献
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土壤放线菌分离纯化实验的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
通过精品实验项目"细菌纯种分离和培养"的实施,在环境专业本科生中开展了土壤放线菌的分离、纯化实验。在老师的带领下,学生从崇明岛采集了土壤样品,利用浇注平板法、划线分离法对土壤中的放线菌进行分离、纯化并得到其纯菌。由16S rDNA序列分析结果初步判断:该放线菌为灰黄链霉菌。通过实验中的学习,学生亲身体会了野外采样的过程,锻炼了学生的实践动手能力,激发了学生的学习热情,加深了学生对微生物基础理论知识的理解,促进了学生创新思维和创新能力培养和提高。 相似文献