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基因繁殖是现代生物技术的主要内容,它依赖于一系列生物催化剂——限制性内切酶的作用,这些酶能够识别特殊的核苷酸片段(通常是4个或6个核苷酸),并在特定的位置切割开核苷酸链,从而重组DNA。迄今为止,已经发现100多种限制性内切酶。但是,核苷酸序列千变万化,要在所需切 相似文献
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新城疫病毒(NDV)ND-xx08毒株经10 d龄SPF鸡胚增殖后,提取其基因组RNA并反转录成cDNA,用NDV F基因特异性引物,经PCR扩增后获得与F基因预期大小一致的DNA片段。将NDV F基因片段克隆到pMD18-T载体上,并进行EcoR I和Hind III双酶切鉴定和测序鉴定。结果显示,ND-xx08毒株F基因片段的长度为1 662 bp,共编码554个氨基酸,F蛋白的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,是典型强毒株氨基酸序列结构。将NDV ND-xx08株F基因的47 bp到420 bp序列与新城疫病毒基因型I至基因型Ⅸ毒株的相同序列绘制病毒基因进化树,显示ND-xx08分离株属于基因Ⅶe型。将NDV ND-xx08株F全基因与国内外发表的23株NDV F基因核苷酸序列和氨基酸序列的同源性比较分析,结果表明,其核苷酸序列的同源性在82.7%~97.8%之间,氨基酸同源性在87.5%~97.7%之间。 相似文献
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保健品市场上 ,各种补充核酸的保健品的“基因食品”推出 ,号称能补充和及时修复人体受损基因。这种说法是不科学的。核酸的基本构成单位是核苷酸。人体内的核苷酸主要由机体细胞自身合成。因此 ,核酸不属于营养必需物质。在生物体内 ,一切具有自主复制能力的遗传功能单位 ,都可称为基因 (gene)。基因的物质基础是一个具有特定核苷酸顺序的核酸片段 ,基因具有一定的稳定性 ,从而保证了物种的稳定。DNA的损伤及修复 ,是细胞内DNA复制中同时并存的两个过程。DNA聚合酶I对复制中的错配可以即时加以校读。DNA的修复 (DNAr… 相似文献
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采用高保真PCR从我国钩体黄疸出血群赖株基因组中扩增全长mviN基因片段,对钩体黄疸出血群赖株mviN基因进行克隆.结果显示,所克隆的mviN基因的核苷酸和氨基酸序列与已发表的mviN基因序列(Accesion No.in GenBank: NC004343)同源性分别为99.68%和99.42%.因此可以认为,我们成功克隆了mviN基因,并为该基因的后续研究奠定了基础. 相似文献
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根据Imbereehts等报道的EHEC F18菌毛主要亚单位(fedA)基因序列设计一对引物,以重庆地区仔猪水肿病流行强毒株W96基因组DNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增到约500bp的核酸片段。用常规DNA重组技术将该片段克隆到表达载体pET28b( )的SalI-Hindm位点之间构建重组表达质粒pET28fedA,序列测定结果显示该克隆片段长447bp,同源性分析表明该基因片段与GenBank报道的fedA核苷酸序列有99.4%的同源性,W96株fedA基因三处核苷酸发生变异,其中两个为无义突变,另一个导致Q100R突变。将pET28fedA转入BL21(DE3)中进行诱导表达,经SDS—PAGE电泳检测上清存在约20KD的蛋白,6xHis affinity tag IMAC亲和层析显示该蛋白能被亲和纯化,说明是含有组氨酸标签的融合目的蛋白。 相似文献
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用RT?PCR方法从云南省寻甸、嵩明、通海、芒市、沾益和陆良6个地区的水稻样品中扩增到水稻矮缩病毒S10片段部分序列,核苷酸测定及序列分析表明,6个地区水稻矮缩病毒分离物S10片段部分序列长度均为1 071个核苷酸,含1个1 059个核苷酸的ORF,编码352个氨基酸.云南分离物S10片段之间的核苷酸同源性约为97.9%~99.9%,其编码的氨基酸同源性为97.7%~100%;云南分离物与日本分离物的S10片段核苷酸同源性和氨基酸相似性分别为94.1%~95.4%和96.3%~99.2%,与中国分离物的S10片段核苷酸同源性和氨基酸相似性分别为94.8%~96.6%和95.2%~96.6%.云南分离物在亲缘关系上与日本分离物较中国分离物近. 相似文献
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茶树β-1,3-葡聚糖酶基因cDNA片段的克隆与序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
文章首次从茶树中克隆出-β1,3-葡聚糖酶基因cDNA1369bp连续序列。根据已发表的植物中β-1,3-葡聚糖酶基因的保守序列,设计一对简并引物,采用RT-PCR技术,从茶树中扩增出366bp的cDNA片段。根据此片段序列设计特异引物,利用3'RACE获得-β1,3-葡聚糖酶cDNA 3'端1252bp的cDNA片段。序列分析表明:该基因cDNA 3'端核苷酸序列及其推测的氨基酸序列与其他植物的-β1,3-葡聚糖酶基因家族的cDNA相应序列同源性为50%-90%,经序列拼接,本研究从茶树中克隆出-β1,3-葡聚糖酶基因cDNA3'端1369bp的连续序列,GenBank登录号为AF399920。 相似文献
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重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板,通过多次PCR扩增,从而获得目的DNA基因片段的方法.该技术高效、快捷、经济,在基因功能研究方面显示良好的应用前景. 相似文献
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科学家的梦想人体中共有23对染色体 ,每一个染色体含有一个DNA (脱氧核糖核酸 )分子 ,而每个DNA分子中含有4种核苷酸 ,它们按不同的顺序排列组合 ,各种不同的排序被称为“化学字母” ,具有传递不同遗传信息的功能。基因就是特定核苷酸序列的总称 ,是DNA分子的片段。它是遗传物质在上下代之间传递遗传信息的基本单位。每个DNA分子都含有很多个基因。人体有10万个 (最新的说法是14万个 )基因 ,每个基因都是一种或几种蛋白和化合物的“蓝图” ,特定的蛋白和化合物决定了人体的特定细胞和器官的形成和运作。破译全部人类遗传… 相似文献
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西布 《重庆第二师范学院学报》2011,(4):111-112
基因命名,乱麻待理
酵母菌和老鼠拥有功能相近而名称各异的基因片段
随着基因组研究在全世界的广泛展开,生物学家们对基因片段命名中的混乱状况越来越感到头疼。有些基因片段明明在结构或者功能上相差甚远,但却有着完全相同的名称,而一些结构或者功能相似的基因片段, 相似文献
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1碱基对改变发生在没有遗传效应的DNA片段(基因间隙区)中
基因是有遗传效应的DNA片段.除了基因外,DNA分子中还有许多没有遗传效应的片段,存在于基因与基因之间.这些片段不能称为基因,可以将之称为"基因间隙区".因此,这些"基因间隙区"的碱基对发生改变.生物的性状一般不会改变.这些"基因间隙区"虽然不能控制生物基因的表达,但却有个体差异,可用于侦探罪犯或身份鉴定.所以科学家仍然把"基因间隙区"纳入"人类基因组草图". 相似文献
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《中学物理教学参考》2001,(4):17-17
基因 基因是 DN A分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称 ,是具有遗传效应的 DNA (脱氧核糖核酸 )分子片段 .基因位于细胞核内的染色体上 ,在染色体上呈线性排列。基因不仅可以通过复制把遗传信息传递给下一代 ,还可以使遗传信息得到表达 ,反映在蛋白质的分子结构上 ,从而使后代表现出与亲代相似的性状 .基因组 人类只有一个基因组 ,大约有 10万个基因 .人类基因组计划是美国科学家于 1985年率先提出的 ,旨在阐明人类基因组 30亿个碱基对的序列 ,破译人类全部遗传信息 ,了解疾病的发病机制 .此计划于19 90年正式启动 ,现已接近尾声… 相似文献
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核盘菌多聚半乳糖醛酸酶基因的克隆及hpRNAi载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
多聚半乳糖醛酸酶是核盘菌致病力发挥作用的关键酶。本研究用PCR的方法从核盘菌基因组DNA中扩增出多聚半乳糖醛酸酶(PG5)基因片段,再以扩增出的PG5基因片段作为模板设计引物扩增出一个相应较小的片段。将两个PG5基因片段反向插入到植物表达载体2300 sn的35S启动子和nos终止子之间,构建出可转录表达出发夹RNA结构的组成型油菜RNA干扰载体,为今后油菜利用RNA干扰抗菌核病的基因工程研究奠定了基础。 相似文献
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为了能在常温下提高多不饱和脂肪酸产量,以及用单交换的方式在集胞藻PCC6803的染色体上整合入基因片段,本研究首先构建出链霉素抗性基因、常温启动子、desB基因片段依次相连的质粒,然后以单交换的方式将这些片段整合在集胞藻Pcc6803的染色体上,最后成功筛选出了转基因藻.该研究为常温下大量表达多不饱和脂肪酸奠定了基础. 相似文献
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为什么玉米籽粒会出现斑驳色彩 ?本世纪 4 0年代 ,美国女遗传学家麦克林脱克在研究玉米遗传时 ,发现玉米籽粒胚乳会产生颜色深浅不同的色斑 ,与第九对染色体上一种称为Ds 的能转移的片段有关。后来发现 ,Ds 的作用还受另一段称为Ac 的片段控制。C是玉米第九对染色体上的一个基因 ,它能使胚乳呈现深色色素 ;当Ds 片段插入到C基因旁时 ,玉米籽粒则无色 ,这说明Ds 片段能抑制C基因的表达 ;当Ac 片段插入到Ds 片段附近时 ,Ds 片段就能跳出第九号染色体 ,从而使C基因解除抑制 ,恢复活性 ,能正常表达产生色素。这说明Ac 片… 相似文献
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以新牧1号苜蓿为研究材料,采用RT-PCR方法,设计特异引物,从新牧1号苜蓿中克隆获得MvDREB基因cDNA,测序结果该片段全长为651 bp,Genbank登录号为GU073286.生物信息学分析结果表明,该基因序列与紫花苜蓿核苷酸序列相似度达99%,编码216个氨基酸,MvDREB蛋白氨基酸序列分析比对显示该蛋白属于AP2/ERF家族的亲水性核蛋白,蛋白质分子量为24873.1,理论等电点pI为5.90,不稳定参数为45.07. 相似文献