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1.
《河南职业技术师范学院学报(职业教育版)》2018,(5)
以菊花品种神马"Sma"为材料,利用CRISPR/Cas9技术编辑其赤霉素合成关键酶GA20氧化酶基因DgGA20ox.采用农杆菌介导的遗传转化方法,成功获得了沉默DgGA20ox菊花转基因植株.与对照相比,转基因植株变得矮小,茎节间显著缩短.测序结果显示,DgGA20ox基因发生了移码突变,说明利用CRISPR/Cas9技术能有效沉默菊花基因,这为开展菊花的基因工程研究奠定了基础. 相似文献
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近年来在拟南芥、水稻等物种中对赤霉素生物合成途径的研究日益完善,但苹果中的赤霉素生物合成途径尚未明确.文章通过构建苹果GA-3氧化酶基因MdGA3ox1的植物表达载体,并将该基因通过农杆菌介导法转化到烟草中来快速验证其在植物中的功能.结果发现:MdGA3ox1对烟草的表型产生了很大的影响,既有赤霉素过量的典型表型,也有非典型的表型.造成这种表型的原因可能有两个:一是在烟草赤霉素生物合成途径中,GA3ox不是最关键的基因;二是基因的表达需要特定的的转录因子,在烟草中的启动子和苹果中不同,结合的转录因子也不同,从而造成了表型的多样化. 相似文献
3.
目的:肌内脂肪(IMF)是衡量鸡肉品质的一个重要指标,其遗传机理是复杂的。探讨卵泡刺激素(FSH)对IMF的调控作用,有利于更好地理解鸡肉中IMF沉积的分子机制。创新点:在鸡上证明FSH可促进胸肌中IMF的沉积,且此作用与脂质合成基因表达上调有关。方法:将7日龄北京油鸡母鸡分为对照组(皮下注射生理盐水)和处理组(皮下注射4 mIU鸡FSH)。连续注射7天后采集血清和组织,采用氯仿-甲醇法抽提脂肪,测定胸肌甘油三酯含量;采用鸡特异性酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测血清FSH含量;使用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胸肌和腹脂组织中FAS、LPL、DGAT2、A-FABP和PPARγ基因的表达水平,并对基因表达数据做主成份分析(PCA)以检测样本的重复性。结论:本实验结果显示外源FSH注射能显著提高鸡的胸肌甘油三酯含量和腹脂含量(图1);同时能显著上调胸肌和腹脂组织中FAS、LPL、DGAT2、A-FABP和PPARγ基因的表达(图2)。本研究结果表明FSH可能通过调控脂类合成基因的表达来促进母鸡IMF沉积。 相似文献
4.
目的:研究青蒿异分支酸合酶的表达模式,评价其对青蒿素含量的影响。创新点:该研究首次克隆了青蒿异分支酸合酶基因(AaICS1),并发现AaICS1影响青蒿素的合成,为更有效地开发利用青蒿提供了新思路。方法:根据青蒿转录组数据,利用聚合酶链式反应(PCR)克隆AaICS1基因和启动子,并进行多重序列分析和启动子作用元件预测。通过实时定量PCR(q RT-PCR)对AaICS1进行表达分析,用Southern杂交分析AaICS1的拷贝数。构建AaICS1过表达载体和干扰表达载体,转化青蒿获得转基因植株,用高效液相色谱法(HPLC)分析青蒿素含量。结论:AaICS1含一个总长为1710 bp的完整阅读框,编码570个氨基酸,与其它植物的ICS基因具有较高的相似性。Southern杂交结果表明AaICS1为单拷贝(图4),q RT-PCR结果显示该基因能够响应伤害、干旱、盐胁迫和水杨酸的处理,处理后基因表达量提高(图6),和启动子作用元件预测相符。q RT-PCR结果显示过表达转基因青蒿中AaICS1表达量提高,干扰转基因青蒿中该基因表达量降低(图7)。HPLC显示过表达AaICS1转基因植株中青蒿素含量提升,最高可达对照的1.9倍(图8)。 相似文献
5.
张明菊 《黄冈职业技术学院学报》2000,(1)
基因的表达调控有着严格的时空顺序。随着基因文库技术的发展和转基因作物的释放,对基因表达的调控机制的研究越来越受到科学界的重视。本文对转录和翻译水平的基因表达调控机制进行了较系统的综述。 相似文献
6.
利用农杆菌介导法转化中花11号成熟胚来源的愈伤组织,并将有 Basta 抗性的愈伤组织分化再生植株。对所得的转基因植株进行PCR反应和叶片喷涂Basta鉴定,表明GO基因已经整合到受体基因组中。利用淀粉-KI染色和超氧钛法测定转基因水稻叶片中过氧化氢（Hydrogen peroxide,H2O2）,证明GO基因表达产生的葡萄糖氧化酶已经在水稻中发挥功能。抗氧化酶(SOD、POD和APX )活性测定表明, GO基因的表达增强了抗氧化酶的活性。由于H2O2诱导的植物防卫反应没有种属专一性,因此,获得的转基因植株将会对多种病原菌具有广谱抗性,这为水稻抗病基因工程提供了新的种质资源。 相似文献
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从拟南芥中克隆到一个受到干旱、高盐诱导表达的NAC类转录因子基因At RD26,常规方法构建植物表达载体p BI121-35S::At RD26,并以农杆菌介导法将其转入烟草.对转基因烟草植株进行了PCR及RT-PCR验证,以及经人工干旱、高盐胁迫后,测定植物抗逆相关生理指标.结果显示:At RD26基因可成功整合到烟草基因组中,并能够正常转录.与野生型植株比较,转基因植株游离脯氨酸和可溶性糖含量更高,增加幅度更大;而叶绿素含量降低幅度更小.结果表明,At RD26基因能有效提高转基因烟草对干旱、高盐胁迫的耐受性. 相似文献
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以观音竹（Bambusamultiplexvar．riviereorum）基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得蛋白激酶基因BmPtil的启动子片段,长度为1466bp,通过HamCARE启动子预测工具分析表明：该序列中除含有TATA-box、CAAT-box等基本顺武作用元件外,还发现1个参与生理周期调控的元件、1个厌氧诱导的顺式元件,1个干旱诱导的MYB结合位点、1个光诱导MYB位点、1个水杨酸响应元件、1个赤霉素响应元件、1个低温响应元件、2个ABA与VPl响应元件和2个激素响应元件．表明BmPtil基因的表达可能受干旱、光照、氧气、低温等环境因子以及脱落酸、水杨酸、赤霉素等激素的调控．此外,推测BmPtil基因的表达可能与植株的生理周期相关． 相似文献
10.
以红富士苹果为材料,从苹果枝条形成层组织中提取总RNA,以随机引物及oligodT反转录成cD-NA。根据已知序列设计PCR引物并对其进行修饰,运用PCR技术扩增出苹果ABP基因片段和全长,经测序分析得知从红富士苹果中克隆到的基因ABP2(GenBank:HQ610832)为ABP(生长素结合蛋白)的突变体,同时完成了ABP2基因表达载体的构建。文章在苹果RNA提取、全长基因克隆、ABP2基因表达载体的构建方面积累了经验,并为进一步的转基因研究奠定了基础。 相似文献
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采用芬粉管通法，将带GUS基因的PB1121质粒DNA导入栽培稻农垦58。用荧光法检测GUS基因在水稻植株中的表达以及根据Dot blotting和Southern blotting的结果分析，揭示了经花粉管通途径导入的外源DNA整合到了转基因植株的基因组中，并在某些转基因植株中得到表达。本还对转基因植株后代出现的各种变异型进行了探讨。 相似文献
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以过量表达 AtHsfAla 及 AtHsfAla 基因沉默的转基因植株为材料,通过控制土壤水分进行干旱处理,结果显示,过量表达型干旱处理后的存活率最大,而基因沉默型最小,表明 AtHsfA1a 能增强植物的抗旱性。为了从生理水平研究 AtHsfA1a 提高抗旱性的机制,研究发现过量表达型的叶片相对含水量和叶绿素含量最高,而沉默型最低。不同基因型植株的 H2 O2和 MDA 的含量正好相反,说明 AtHsfA1a 通过保护细胞膜而减小细胞所受氧化伤害来提高抗旱能力。 相似文献
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目的:探究植物激素对铝胁迫下番茄根生长的影响,为增强番茄耐铝能力及培育抗铝番茄品种提供理论依据。方法:以栽培品种番茄为试验材料,外源施加细胞分裂素(6-BA)、水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、油菜素内酯(BL)、生长素类似物(NAA),探究不同植物激素在番茄响应铝胁迫过程中的调控机制。结果:细胞分裂素、水杨酸、茉莉酸甲酯增加了番茄对铝胁迫的敏感性,加重了铝对根生长的抑制作用;油菜素内酯对铝胁迫下番茄根的生长无明显作用。外源施加NAA时,促进了番茄侧根发育,但明显加重了铝诱导的主根和侧根生长抑制,增加了番茄对铝胁迫的敏感性。外源施加生长素运输抑制剂(NPA和TIBA)也加重了铝诱导根的生长抑制。而外源生长素合成抑制剂yucasin明显缓解了铝诱导的根生长抑制,降低了番茄对铝胁迫的敏感性。利用生长素响应报告基因DR5:GUS番茄转基因植株,发现铝胁迫促进生长素在根尖分生区和转换区(分生区与伸长区之间)细胞的积累,过量的生长素抑制根的伸长生长,而yucasin通过减少生长素在根尖的积累缓解铝胁迫导致的根生长抑制。结论:通过生长素合成途径解析番茄响应铝胁迫的调控机制,应用生长素合成抑制... 相似文献
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叶盘共培养法介导的基因转移与两种转基因植物的鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
本文以共整合型Ti质粒载体pGV3850:1103neo中pNOS-NPTⅡ(Km~R)嵌合基因为遗传标志,应用改良的叶盘共培养法对烟草和番茄进行了遗传转化。通过施加选择压力,筛选出具有Km~R表型的愈伤组织,并由此获得转基因烟草和番茄植株。通过胭脂碱的高压电泳检测和生物素探针的尼龙膜印迹杂交,分别从侧面(间接)和正面(直接)证实了Km~R基因在上述两种转化细胞中的整合和表达。还探讨了转化、培养和筛选过程中的一些细节,并对改进技术的原理及其效果进行了讨论。 相似文献
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GAL4蛋白是酵母中的一类转录因子,它能够与特定的上游激活序列结合,并驱动UAS下游基因的表达。将酵母中的GAL4和UAS元件分别引入到果蝇中,含有UAS-目的基因的转基因果蝇品系,无法在亲本中表达,只有与驱动者GAL4品系杂交后的子一代中,目的基因才会表达。在本科遗传学实验中,引入eyelessGAL4和UAS-Ras转基因果蝇品系杂交实验,通过观察F1代复眼中原癌基因ras表达后的表型,使学生了解如何通过GAL4-UAS系统在模式动物黑腹果蝇中实现靶基因的时空表达,认识GAL4-UAS系统在研究果蝇遗传发育中的重要性和优越性,理解分子调控、靶基因表达与个体的遗传和发育每个环节都是可以操作和控制的现代遗传学实验理念。 相似文献
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《山西教育(综合版)》2001,(6)
转基因食品是指含有转基因生物体外源性基因表达产物的食品。转基因生物体是指利用生物工程技术而获得的生物体 ,包括转基因动物、转基因植物和转基因微生物。转基因生物体与普通生物体的主要区别之处在于它的遗传物质中含有其他生物体的基因 ,而这些外源性基因能够在转基因生物体中发挥作用或表达出特定产物。1996年全球种植了 2 50万公顷转基因作物 ,1998年发展到了 30 0 0万公顷以上 ,约占全球作物栽培面积的 2 %— 3%。目前推广的转基因作物主要有玉米、大豆、油菜、西红柿等。在美国 ,目前人们熟悉的许多食品都利用转基因玉米制作。另… 相似文献
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<正>1问题华师网友人教版七年级生物学教材(2001年12月第1版)前言中提到"转基因番茄"和"正常番茄"。这样的表达准确吗?是否存在歧视转基因农作物的现象?2讨论李德红[华南师范大学生命科学学院(510631)]将"转基因番茄"和"正常番茄"相对应,存在用词不当的问题。因为"正常番茄"对应的是"非正常番茄",暗示转基因番茄是不正常的。恰当的说法应该是"转基因番茄"对应"非转基因番茄"或"传统番茄"或"原有番茄"等。因为学生第一次从教材接触到"转基因"这个名词,这样的措辞会让读者不自觉地形成"转基因生物不正常"的错误认识。使用"正常"之类的字眼,可能会混淆事实判断和价值判断,科学事实与价值判断无关。教材前言的这 相似文献
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Xiao-yan LI Fu GUO Sheng-yun MA Mu-yuan ZHU Wei-huai PAN Hong-wu BIAN 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2019,(4):322-331
目的:本文通过研究microRNA172a(miR172a)对成花途径中关键靶基因APETALA2类(AP2-like)的调控作用及其机理分析,探索通过操纵miRNA表达改变观赏植物花期的基因工程分子育种新策略。创新点:本研究基于植物miR172序列和功能的高度保守性,通过转基因的方法操纵大岩桐miR172的表达,进而影响AP2-like基因的表达,并起到调控花期的作用。方法:本研究借用拟南芥miR172a的已知序列构建组成型过表达载体35S:miR172a和抑制miR172表达的35S:MIM172载体。利用农杆菌介导法成功获得了35S:miR172a过表达株系以及抑制miR172作用的35S:MIM172株系,并利用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆得到了大岩桐AP2-likecDNA全序列,并通过实时荧光定量聚合酶链式反应技术(qPCR)检测转基因株系中AP2-like的表达变化。结论:短日照条件下,35S:miR172a过表达株系花期比野生型提前(47.00±2.16)天;35S:MIM172株系花期延迟(7.00±4.28)天。在35S:miR172a过表达株系中miR172的表达水平明显上升,其靶基因SsAP2-like的表达量明显下降;35S:MIM172株系中miR172的积累水平受到抑制,而SsAP2-like的表达量明显上升,表明miR172介导调控SsAP2的表达对大岩桐成花转变具有促进作用。通过改变miR172的表达调控关键靶基因进而改变花期的方法可以作为调节观赏植物开花时间的有效策略。 相似文献
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《临沂师范学院学报》2019,(6):46-54
为了证明Oct4和SCF/c-kit、IL-6/IL-6st信号传导途径为干细胞增殖分裂重要调控因子,与肿瘤细胞的无限增殖有关。本研究通过沉默Oct4基因的方法拟探讨肿瘤细胞中Oct4基因和SCF/c-kit、IL-6/IL-6st信号传导以及细胞凋亡之间的关系,用Oct4 miRNA质粒载体沉默人宫颈癌HeLa细胞中的Oct4基因,用RT-PCR及免疫荧光标记法检测沉默Oct4基因对人宫颈癌HeLa细胞SCF/c-kit、IL-6/IL-6st和Bcl-2/Bax基因表达的影响。研究结果表明:人宫颈癌HeLa细胞高表达Oct4、SCF、c-kit、IL-6st基因和细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax。沉默Oct4基因使人宫颈癌HeLa细胞Oct4、SCF、c-kit、IL-6st和Bcl-2、Bax基因表达明显受到抑制,并促进了细胞凋亡,但对IL-6基因表达影响不大。证实了肿瘤细胞的无限增殖和Oct4对SCF/c-kit、IL-6/IL-6st信号传导以及Bcl-2基因表达调控有关。而且,肿瘤细胞在Oct4调控下高表达IL-6st以增加对IL-6的敏感性,导致肿瘤细胞在高水平IL-6环境中进一步恶化。 相似文献