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相似文献
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1.
p16^INK4a是细胞周期负调控因子,在多种细胞的衰老过程中起着关键作用.为了研究p16^INK4a的表达对小鼠成纤维细胞即NIH3T3细胞生长增殖的影响,将真核表达载体PRetro-onpl6通过逆转录病毒介导的方法将其转染至NIH3T3细胞中,经嘌呤霉素筛选,获得整合有p16基因的稳定细胞株NIH3T3/pRetro-on-p16,并通过脱氧四环素的诱导,观察到NIH3T3/pRetro-on-p16衰老的显著特征:细胞宽大铺展、形状不规则、折射率低等,并且细胞生长速度明显减慢.  相似文献   

2.
目的:探讨索拉菲尼与ELK-3以及上皮-间质转化的关系及其作用机制.方法:将Hu H7细胞分为对照组和索拉菲尼处理组.显微镜观察细胞的形态变化,Western blot检测ELK-3、ELK-3靶基因EGR-1、EMT相关分子钙黏附素E(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达和MAPK信号通路蛋白p38的表达.结果:与对照组比较,索拉菲尼处理肝癌细胞后其ELK-3和ELK-3的靶基因EGR-1的蛋白表达均显著降低(P0.01),E-cadherin表达水平升高(P0.01),vimentin的表达及p38磷酸化水平均降低(P0.01).结论:索拉菲尼通过调控ELK-3/p38抑制人肝癌细胞的上皮-间质转化.  相似文献   

3.
研究了没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人肝癌细胞BEL-7402增殖凋亡及对信号转导蛋白和转录激活因子3(Stat3)蛋白及磷酸化Stat3蛋白表达的影响.应用MTT法检测不同浓度EGCG对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,用流式细胞仪分析细胞的凋亡率,用ELISA方法检测EGCG对Stat3蛋白及磷酸化的Stat3蛋白表达的影响.结果表明:EGCG有抑制肝癌细胞增殖促进凋亡的作用,并呈剂量依赖性.ELISA结果显示EGCG能降低磷酸化Stat3蛋白的表达水平.EGCG能抑制肝癌细胞的增殖促进凋亡,其机制可能有与下调磷酸化的Stat3蛋白的表达有关.  相似文献   

4.
目的:研究gga-miR-29b-3p对马立克氏病(MD)肿瘤转化细胞侵袭和原癌基因Meq表达的影响.方法:选取SPF白来航鸡在感染马立克氏病病毒(MDV)后引发的内脏淋巴瘤为样本,通过实时荧光定量PCR检测gga-miR-29b-3p的表达情况;利用在线生物软件对gga-miR-29b-3p潜在的靶基因进行功能分析.以该miRNA为研究对象,MDV转化细胞系MDCC-MSB1为试验材料,分别转染miRNA激动剂或阴性对照,检测细胞侵袭相关基因MM P2和MM P9以及MDV原癌基因Meq的表达情况.结果:Gga-miR-29b-3p在感染MDV白来航鸡的肿瘤化脾脏和肝脏淋巴瘤中均显著低表达.信号通路方面miRNA的预测靶基因分别参与FoxO信号通路、mTOR信号通路、Jak-STAT信号通路、Toll样受体信号通路、ErbB信号通路、VEGF信号通路和细胞凋亡等,这些信号通路可参与肿瘤发生进程.转染miRNA激动剂后,MMP2和MMP9基因的表达量在48 h显著下调(P<0.05);Meq基因在48 h表达显著下调(P<0.05).结论:Gga-miR-29b-3p抑制细胞侵袭和病毒原癌基因的表达,其潜在靶基因能够介导肿瘤发生,提示该miRN A可能参与M D肿瘤转化过程.  相似文献   

5.
目的:探明猪圆环病毒3型衣壳(Cap)蛋白如何诱导细胞自噬。创新点:首次证明猪圆环病毒3型Cap蛋白诱导细胞自噬,泛素-蛋白酶体途径也参与其中。方法:构建过表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的真核表达载体,转染HEK293T细胞,采用免疫印迹检测LC3、p62和m TOR等自噬通路的关键分子。利用激光扫描共聚焦显微镜和透射电镜,观察表达Cap蛋白的细胞是否有EGFP-LC3B点状聚集和自噬泡生成。利用氯喹抑制溶酶体酸化,探究衣壳蛋白是否诱导完整的自噬流。利用MG132抑制蛋白酶体途径,探究泛素-蛋白酶体途径是否参与自噬过程。结论:猪圆环病毒3型Cap蛋白通过抑制雷帕霉素靶蛋白的磷酸化诱导HEK293T细胞自噬,泛素-蛋白酶体途径也参与这一过程。  相似文献   

6.
利用脂多糖(LPS)刺激小鼠小胶质细胞BV2,研究泽泻醇对炎症相关分子的抑制及机制.Griess法测定一氧化氮(NO)浓度,RT-PCR和Western blot法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p38、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、蛋白激酶B(Akt)、基质金属蛋白酶3(MMP3)的变化.研究结果表明,泽泻醇不仅对LPS刺激小胶质细胞产生的NO有明显抑制作用,还能在mRNA与蛋白质水平抑制MMP3的表达,这种抑制与其对PI3K/Akt通路的干预相关.阐述了泽泻醇对小胶质细胞的抑制与PI3K/Akt通路的相关机制.  相似文献   

7.
目的:探讨RNA干扰T细胞mTOR表达后诱导T细胞分化对小肠移植免疫耐受的影响。方法:通过shRNA干扰T细胞mTOR表达后,诱导T细胞向Foxp3+Tregs细胞分化。对60只雄性SD大鼠施行30次异位节段小肠移植,随机分为A组(mTOR-shRNA转染组)、B组(mTOR抑制剂RAD001干预)和C组(移植对照组、注射生理盐水)。观察小肠移植后受体大鼠的体重变化、生存时间及移植小肠病理切片评估排斥反应程度。结果:构建的mTOR-shRNA质粒表达载体在体外能有效地抑制大鼠骨髓细胞mTOR基因mRNA和蛋白的表达。RNA干扰大鼠T细胞mTOR基因可调节T细胞的定向分化,Tregs细胞增多,而Th17细胞分化减少。抑制mTOR基因可诱导大鼠异位小肠移植的免疫耐受,减轻受体抗移植物的排斥反应,显著延长移植物的存活时间。结论:RNA干扰T细胞mTOR表达后诱导T细胞分化对小肠移植耐受的研究为mTOR抑制剂(RAD001)在移植后的临床应用提供理论和实验依据。  相似文献   

8.
目的观察鞣花酸对前列腺癌PC-3细胞株的影响。方法:体外培养人前列腺癌PC-3细胞,加入0μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的鞣花酸作用于PC-3细胞,分别作用12小时、24小时和48小时后,应用MTr法测定各浓度组鞣花酸对PC-3细胞的生长抑制作用。应用流式细胞仪检测鞣花酸作用48小时后,PC-3细胞的周期时相变化及凋亡情况。应用免疫细胞化学检测10μg/ml鞣花酸作用24小时后,实验组与对照组细胞Caspase-3蛋白表达情况。结果:鞣花酸明显抑制PC-3细胞的生长,抑制效应呈时间依赖型和浓度依赖型,与对照组比较均有统计学意义(P〈0.05)。应用流式细胞仪检测结果显示,鞣花酸可将PC-3细胞阻滞于G1/S期,并诱导PC-3细胞凋亡。免疫细胞化学结果显示实验组Ctmpase-3蛋白表达明显升高。结论:鞣花酸对前列腺癌PC-3细胞株有明显的生长抑制和诱导凋亡作用。  相似文献   

9.
目的:探讨索拉菲尼与ELK-3和上皮-间质转化以及肝纤维化的关系及其作用机制。方法:Western blot检测索拉菲尼对TGF-β1诱导的肝细胞EMT细胞模型中EMT标志蛋白、ELK-3蛋白表达以及p38 MAPK蛋白的表达的影响。Masson′s trichrome染色检测索拉菲尼对肝纤维化动物组织中胶原沉积水平以及对EMT标志蛋白、α-SMA和ELK-3蛋白表达的影响。结果:索拉菲尼组处理的EMT组与EMT组相比,E-cadherin的表达水平显著升高(P0.05),Vimentin、ELK-3蛋白表达和p38磷酸化水平均显著降低(P0.05)。索拉菲尼灌胃的肝纤维化组与肝纤维化组相比,E-cadherin的表达水平显著升高(P0.05),Vimentin、α-SMA和ELK-3蛋白表达水平均显著降低(P0.05)。结论:索拉菲尼通过下调p38MAPK/ELK-3抑制肝细胞的上皮-间质转化进而抑制肝纤维化的进展。  相似文献   

10.
设计小鼠Txt5基因的特异性引物,将小鼠c DNA作为模板,用PCR扩增出m Txt5编码区,并加入HA标签序列.将这一片段插入p MD-18T载体,再亚克隆至p Adtrack-cmv穿梭载体上.线性化后,转化BJ5183感受态细胞,在BJ5183中发生同源重组获得p Ad-Txt5质粒.p Ad-Txt5线性化后转染293A细胞,包装得到含Txt5基因的病毒.将病毒溶液感染大鼠原代心肌细胞,一段时间后观察绿色荧光,然后通过RT-PCR和免疫印迹法检测HA标签蛋白的表达.结果表明成功构建小鼠Txt5腺病毒表达载体并实现在大鼠原代心肌细胞中的表达.  相似文献   

11.
用从头算 (abinitio)中的MP2方法和密度泛函理论中的B3LYP ,B3PW91 ,B3P86方法分别研究了CH3 NHCH3 -BH3 体系 ,对各种方法所得的构型、能量、原子净电荷等进行了分析比较 ,发现密度泛函方法对该体系可以得到与MP2相近的结果 .结果表明 ,该体系为强相互作用体系 .  相似文献   

12.
在固定床反应器中研究了二甲基二硫醚对Ni/Al2O3上模拟裂解汽油原料油中主要化合物芳烃、单烯烃和共轭烯烃的加氢活性的影响。结果显示,二甲基二硫醚对以上化合物加氢抑制的顺序为:芳香环单烯烃共轭烯烃。通过XRD和XPS表征分析,推测了Ni/Al2O3催化剂失活的可能原因。  相似文献   

13.
INTRODUCTION The visualization of roadside buildings in virtual space using synthetic photorealistic view is one of the common methods for representing the background scene of Car Navigation Systems (CNS) and Internet map services. Since most of these background scenes are implemented by two-dimensional (2D) images, they may give somewhat monotonous impression due to fixed viewpoint position and orientation. For more interactive visualizations that enable arbitrary ad- justment of the …  相似文献   

14.
利用典型零件的加工,介绍使用Mastercam X3软件铣削加工模块设置刀具路径的方法。通过分析零件加工工艺,介绍Mastercam X3软件在3轴加工中心编程的具体操作步骤。文中着重就2D加工和曲面加工操作进行了较详细的介绍,并通过例子体现了自动编程软件在3轴加工中心中应用的优越性。  相似文献   

15.
以共沉淀氢氧化物Ni1/3Co1/3Mn1/3(OH)2和LiOH·H2O为原料,采用流变相反应法(简称RPR法)在950℃煅烧15 h合成了锂离子电池正极材料LiNi1/3Co1/3Mn1/3O2.用X-射线衍射仪(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、电化学工作站、充放电仪等设备测试了材料的结构和电化学性能,XRD表明,合成的材料具有良好的α-NaFeO2层状结构.  相似文献   

16.
介绍了3DS Max建造的三维几何模型的ASE文件数据存储格式,说明了ASE文件的读取方法,结合OpenGL与Delphi开发出深海采矿作业系统可视化软件。  相似文献   

17.
三维成像技术是计算机图形学的一个重要研究方向,在现代临床医学及工业等各方面都有重要的应用。本文介绍了由二维图像序列生成三维图像的重建算法和显示方法;并介绍了如何在Visual C 6.0环境下,由上述算法开发出基于OpenGL的相应程序。  相似文献   

18.
以共沉淀氢氧化物Ni1/3Co1/3Mn1/3(OH)2和LiOH·H2O为原料,研究了其恒电流充放电测试显示,在2.8~4.4 V电压区间,流变相反应法合成的材料首次放电比容量高(达到170 mAh/g),循环性能好.充放电循环40次后,放电比容量为145 mAh/g,容量保持率达85.3%.循环伏安实验表明,材料的结构在循环过程中保持稳定.  相似文献   

19.
篮球3对3练习充分利用了篮球的场地空间,在攻防两端能很好的训练、提高队员之间熟练运用基础配合的能力,掌握一定数量和质量的进攻战术配合、防守方法,为5对5的教学打下良好的基础.因此,篮球3对3教学在篮球技战术教学中具有重要的战略地位.让队员掌握好3对3技巧、方法,将达到事半功倍的效果.  相似文献   

20.
Siliconcarbide (SiC)ceramicmaterialsareusefulad vancedmaterialsinmanyfields,suchasmedicalbiomateri als ,hightemperaturesemiconductors ,synchrotronopticalel ementsandhighstrength /lightweightstructuralmaterials[1] .However,theactualapplicationisstilllimitedduetoitslowreliability ,highmachiningcosts[2 ] .Gelcastingprovidesane conomicalandfeasiblenet shape forminghomogeneousandflawlessgreenbodieswithcomplexgreenshapes.  Gelcastingconsistsofin situpolymerizationthroughwhichamacromolecularnetwor…  相似文献   

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