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1.
印度芥菜BjPCS1基因的表达提高烟草对重金属的抗性 总被引：4，自引：0，他引：4
在植物体内植物络合素(PC)可与重金属螯合,并进一步转运至液泡贮存,使细胞质的重金属浓度降低,从而达到解毒效果。PC不是基因的直接翻译产物,而是以谷胱甘肽(GSH) 为底物由植物络合素合酶催化而成。将来源于重金属超富集植物印度芥菜(Brassica juncea)的植物络合素合酶基因BjPCS1转入烟草,PCR和Northern结果表明,该基因已经整合到烟草基因组中,并在转录水平上表达。在3种重金属(200mmol/L CdCl2、400mmol/L ZnCl2、200mmo/L NiCl2)胁迫条件下,转基因烟草植株的脯氨酸含量、可溶性糖含量、丙二醛含量、相对电导率和叶绿素含量等指标均优于未转化的对照植株,表明转化BjPCS1基因提高了烟草对3种重金属的抗性,其中转基因烟草抗Cd能力最强,并且转基因烟草的T1代种子在Cd处理的情况下萌发状况明显优于对照。这些结果说明BjPCS1基因在利用基因工程改良植物抗重金属能力和净化环境污染方面,具有良好的应用前景。 相似文献
2.
利用同源序列克隆技术在印度芥菜幼苗中分离出2个重金属ATP酶cDNA片段BjHMA3和BjHMA4;实时荧-光定量PCR表明BjHMA3和BjHMA4在所有的组织器官中均有表达,其中在根中表达量最高,叶片中表达量最少;重金属Zn或Cd胁迫均能增强二者在叶片中的表达,表明BjHMA不仅参与植物的生长发育过程,而且在重金属稳态和耐性中具有重要作用. 相似文献
3.
4.
从垂序商陆(Phytolacca americana)的重金属镉胁迫下商陆幼苗叶片的正反向抑制性消减杂交文库(SSH文库)中,获得商陆寡肽转运蛋白基因的EST序列.利用RACE的方法克隆到该基因的全序列cDNA(PaOPT,GenBank注册HQ647015).PaOPT基因在进化中的地位分析表明:它可能属于OPT3基因家族.利用实时荧光定量PCR的方法,分析PaOPT的组织表达特异性以及商陆种子成熟及萌发过程的表达模式.结果表明,该基因是一个在种子中特异性表达的基因,预测它对植物的生长发育有着重要的作用. 相似文献
5.
通过大化集团废弃地重金属污染状况及其优势植物体内元素分布的研究,探索重金属污染对植物的影响,并筛选超富集植物。采集5块样地的植物与土壤,利用ICP-OES检测土壤与植物中元素的含量与分布。土壤pH在7.71～8.43之间,呈弱碱性,有机质含量3.91～9.07 g/kg之间,低于土壤肥力3级水平。5块样地的Zn、As、Cd均超标5倍以上,个别样地还有Pb超标;11种植物中Cu均超标;合成氨厂的何首乌和向日葵中As超标,可见土壤重金属污染对植物的元素分布产生影响。刺藜中Cr、Cu、As及Cd的转移系数均居11种植物之首,其次是龙葵和葎草;但所有植物的重金属富集系数均小于1。虽未筛选到超富集植物但也可以看出刺藜、龙葵和葎草的富集和转移重金属能力较强。大化集团废弃地的Cd-As-Zn的复合污染严重,对生长的植物造成了不同程度的重金属污染。为修复该地污染的土壤,建议引入Cd、Zn、As的超富集植物蜈蚣草和东南景天,并配合当地生长的耐性植物刺藜、龙葵、葎草,构建复合生态屏障。 相似文献
6.
赵珺 《内蒙古科技与经济》2008,(6)
从阿尔巴斯绒山羊及蒙古绵羊血中提取基因组DNA,根据已报道的BMP2基因的保守序列设计上下游引物,扩增山羊及蒙古绵羊的BMP2基因部分序列,将此片段克隆到pMD18-T载体中,筛选阳性克隆,提取质粒DNA,并进行序列测定,并将两者序列进行比对.结果山羊该核苷酸片段与蒙古绵羊的同源性达99%,另与GenBank中人、小鼠、牛、绵羊的同源性分别为87%,85%,98%和99%.说明该基因在不同物种间具有较高的保守性,尤其是山羊与绵羊之间具有更高的保守性. 相似文献
7.
利用同源克隆的方法,从商陆中克隆得到扩展蛋白基因的全长cDNA序列,命名为PaEXP1(GenBank 登录号为GQ851947).PaEXP1长1128bp,含有759bp的完整开放阅读框,编码252个氨基酸,分子量27.1kD,等电点8.55.PaEXP1氨基酸序列N端含有8个半胱氨酸残基,1个组氨酸(His-Phe-Asp,HFD)域,C末端存在4个保守的色氨酸残基,具有扩展蛋白的典型结构.系统进化树分析表明,PaEXP1属于扩展蛋白的α-扩展蛋白家族.Real time-PCR结果表明,PaEXP1主要在根中表达,低温、盐、重金属和渗透胁迫均强烈地抑制其基因的表达.酵母转化实验表明,转PaEXP1可以提高酵母的平均直径,说明PaEXP1参与细胞壁的松弛扩展和细胞的增大过程. 相似文献
8.
从拟南芥中克隆得到AtACO3基因的全长cDNA序列.半定量PCR实验结果表明,200 μmol/L CuCl2处理能明显抑制该基因的表达,而200 μmol/L ZnCl2处理1h则可显著促进其表达.为验证AtACO3蛋白N端的功能,构建AtACO3 5端1632 bp基因片段的原核表达载体pET30a-AtACO3-N,并转化大肠杆菌.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,该基因片段可以在大肠杆菌中稳定表达.进一步的抗性实验表明,异源表达基因AtACO3的N端序列能提高大肠杆菌的Zn2+耐受性. 相似文献
9.
《中国科技信息》2006,(19)
蝴蝶兰花发育相关基因pPI9的克隆与表达分析CloningandExpressionAnalysisofaPhalaenopsisFlowering-relatedgenepPI9郭滨陈东红戴薇魏星明凤摘要:为研究具有复杂而特异花型的蝴蝶兰花发育的分子机制,利用RT-PCR方法从蝴蝶兰花瓣总RNA中分离出834bp长的cDNA片断.序列分析表明,该cDNA片断与拟南芥的PI基因有60%的同源性,命名为pPI9.它包含一个开放阅读框,具有编码24.5ku蛋白质的能力.推导的氨基酸序列中,N端包含一个完整的MADS盒,C端有明显的PI基序.半定量PCR结果表明该基因只在植株的生殖器官中表达,而在营养器官中不表达,… 相似文献
10.
根据鸡白细胞介素18（IL-18）cDNA基因序列设计了1对特异性引物，应用RT-PCR技术，从脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激的我国地方品种萧山鸡原代鸡脾细胞中扩增并克隆鸡IL-18全长基因（Genbank accession，AY628648）。扩增片段全长591bp，共编码197个氨基酸的前体蛋白，其中含有表达完整功能蛋白所必需的起始密码子和终止密码子。该序列与国外报道的鸡IL-18全长基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性为98．99％。只在引导序列中出现两个氨基酸残基的缺失，分子进化分析表明萧山鸡IL-18基因与火鸡以及家鸭基因形成一个独立的分支。将萧山鸡IL-18成熟蛋白序列插入pGEX-4T-2载体并在Ecoli中得到表达，获得45kD的GST-IL-18融合蛋白。经纯化后用于制备多克隆抗体。本研究对萧山鸡白细胞介素18的全长基因进行了克隆及表达，并对其分子进化进行了分析。为深入研究其功能奠定了基础。 相似文献
11.
Identification and characterization of polyubiquitin gene from cDNA library of aspergillus fumigatus
Jata Shankar Taruna Madan Seemi Farhat Basir P. Usha Sarma 《Indian journal of clinical biochemistry : IJCB》2005,20(1):208-212
Aspergillus fumigatus (Afu) causes allergic and invasive forms of diseases in humans. In order to identify genes relevant
for pathogenesis, a total of 235 cDNA clones were randomly selected and sequenced from cDNA library of Afu. One of the partially
sequenced cDNA clones was homologous to polyubiquitin. Sequencing of the complete cDNA clone showed an open reading frame
of 912 bases. Comparison with genomic sequence of Afu using BlastN program, revealed that polyubiquitin gene comprises of
992 bases and contains one intron of 80 bases. The recombinant expression of fusion protein showed an approximately molecular
weight of 43-kDa on SDS-PAGE. The translation product of the cDNA sequence showed four tandem repeats of 76 amino acid residues
in a single polyubiquitin protein and showed 100% identity with polyubiquitin protein sequences of S. cerevisiae, N. crassa,
C. albicans, S. pombe, and M. grisae. Polyubiquitin gene is known to play important role in a variety of cellular processes
and recently have been implicated in fungal pathogenesis. Identification of polyubiquitin gene of Afu has opened up scope
to study its role in understanding Aspergillus biology and pathogenesis. 相似文献
12.
从商陆抑制性消减杂交文库中获得金属硫蛋白PaMT,基因全长141 bp,编码46个氨基酸,等电点和分子量分别为3.85和4.7 kD,具有12个半胱氨酸残基:具有典型的金属硫蛋白结构(CXC结构).进化树和蛋白结构分析表明它属于金属硫蛋白家族.PaMT主要在根中表达,且受重金属胁迫上调其基因表达.蛋白融合表达表明,PaMT可以提高大肠杆菌对重金属离子的耐受力. 相似文献
13.
从浙江宁波雪菜上获得病毒分离物NBXC,病毒提纯后,电镜下可观察到大量长约740 nm的线形粒子。间接ELISA检测结果证实NBXC是芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)的分离物。利用IC-RT-PCR对病毒分离物NBXC的CP和HC-Pro基因进行PCR扩增,分别得到约0.8 kb和1.4 kb的两条条带,与预期的TuMV CP和HC-Pro基因大小吻合。扩增产物克隆后进行序列测定,CP基因序列长度为864个核苷酸,编码288个氨基酸;HC-Pro基因序列长度为1374个核苷酸,编码458个氨基酸。NBXC的CP和HC-Pro基因与已报道的TuMV其他分离物的核苷酸序列同源率分别为90.0%～98.3%和82.2%～96.9%,氨基酸同源率分别为95.8%～99.3%和95.6%～99.3%。从CP和HC-Pro基因核苷酸序列同源性来看,NBXC与TuMV芸薹属分离物有更近的亲缘关系,而与萝卜属分离物亲缘关系较远。 相似文献
14.
CMC聚合物对重金属离子的吸附性能 总被引：2，自引：0，他引：2
通过正交试验得出制备羧甲基纤维素(CMC)聚合物的最佳工艺条件:丙烯酸(AA)/羧甲基纤维素=10,引发剂(硫酸铵)和交联剂(N,N'-亚甲基双丙烯酰胺)用量分别为单体的0.0014倍和0.0015倍.吸胀平衡后,将CMC聚合物在400~450℃下完全灰化16h,消解并用火焰原子吸收法测定聚合物对Zn2+、Cu2+、Pb2+、Cd2+、Cr2+、Ni2+和Mn2+的吸附性能.结果表明,CMC聚合物对重金属离子具有一定的吸附能力,其吸附量随着溶液pH值和重金属离子质量浓度的增加而增大,当pH为9时达到最大;并且CMC聚合物对Pb2+和Cu2+的吸附量要大于其他金属离子. 相似文献
15.
利用同源克隆和RACE方法在商陆( Phytolacca acinosa )中得到一个推测的小G蛋白ArfGTPase激活蛋白 ArfGAP (ArfGTPase activating protein) 的全长cDNA序列 PaAGAP . PaAGAP 序列编码332个氨基酸.蛋白含有保守的锌指结构域(CX2CX16CX2C类)和C2结构域.实时荧光定量PCR表明在寒、旱、盐和重金属的不同时间胁迫下,PaAGAP可以被诱导,表达量有不同程度的上调.由此推测 PaAGAP 可能是通过快速启动转录和翻译,使ARF失活,抑制植物生长素极性运输,来参与植物逆境反应的. 相似文献
16.
文章实验采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定广西南宁、北海、桂林、柳州、百色不同地区木薯产地土壤中重金属元素Pb、Cd、As、Hg、Cr、Cu的含量;通过优化消解条件和ICP-MS仪器的分析参数,从而达到有效的检测结果,各元素检出限(ng/ml)分别为:Pb(0.47),Cd(0.083),As(0.13),Hg(0.22),Cr(0.34),Cu(0.22),方法精密度:3.24%~7.24%,加标回收率:95.3%~106.8%;实验方法适用于土壤中Pb、Cd、AS、Hg、Cr、Cu重金属元素含量的检测,为科学的种植提供有效的实验依据。 相似文献
17.
Suvidya H. Ranade Ashraf Hossani D. N. Deobagkar D. D. Deobagkar B. A. Chopade Pramod S. Khandekar 《Indian journal of clinical biochemistry : IJCB》2009,24(2):142-149
We report complete sequences of 2 genes of S.flexneri 1a an Indian isolate for the first time. Shigella is causative agent
of shigellosis or bacillary dysentery. Genomic library was constructed by shotgun approach. Sequencing was carried out using
Big Dye terminator chemistry using ABI 3730 48 capillary DNA analyzer. 170 recombinants were subjected to nucleotide sequencing.
Sequence data was analyzed, of these 2 clones showed presence of complete genes out of the total clones sequenced. Annotations
were done using various bioinformatics tools. Gene Sfo676 on contig SF21B11, 513 bp long codes for a protein 170 aa long with
molecular weight of 18836.5 daltons. The protein is 99 % identical to S. flexneri 2a 301 and not with any other strain of
Shigella. It has 7 different sites for phosphorylation, myristoylation and glycosylation. Predicted cellular localization
is cytoplasmic membrane. SF0368 is another full-length gene SF0368 on contig SF69C1 is a 312 nucleotide long. It is 103 aa
long with molecular weight 11394.0 daltons. Protein is 100% identical to S. flexneri 2a 301 and 99% with S. sonnei strain
046. The gene shows difference when compared with S.sonnei in mono and dinucleotide frequency as well as amino acid composition. 相似文献