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利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系.多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花多重PCR反应进行优化,建立了扩增效率较高的中棉41的六重PCR反应体系,优化后的体系为HotstarTaq DNA聚合酶用量为1.25 U/50 μL,镁离子的终浓度为3.5 mM,dNTP的终浓度为400 μM,BSA(10mg/mL)的加入量为2μL,选取58℃为反应扩增的退火温度.利用优化的多重PCR体系特异性地检测到转基因棉花中棉41中的外源基因启动子CaMV 35S、终止子TNOS、报告基因NPTII和抗虫基因CrylAc. 相似文献
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采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）的方法对可育转基因栽培小麦鄂恩1号（EN1）和鄂麦11号（EM11）植株的T1代种子中的谷蛋白亚基成份进行分析，验证种子中是否含有对增强小麦展弹性有显著作用的转基因胚乳特异性表达产物——优质高分子量谷蛋白亚基（HMW—GS）。转基因株D193种子中连锁表达两种亚基基因1Dx5和1Dy10，转基因株D185和D186则均表达其中的1Dx5亚基基因，不同基因型受体可能影响转基因的连锁表达。Χ^2检验表明鄂麦1号、鄂麦11号二种基因型T代种子中转基因表达蛋白1Dx5和1Dx5＋1Dy10产生的表型比均符合预期分离比3：1（P〉0．05），两种外源基因在小麦基因组中可能均为单位点整合。表明遗传转化分子育种可以成为改良我国小麦加工品质的有效途径。同时并讨论了SDS-PAGE有效检测转基因在早期世代表达的关键步骤。 相似文献
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实验中,试图以烟草叶片为转化受体,采用根癌农杆菌介导法,将盐芥Na+/H+逆向转运蛋白基因(ThNHX1)转入烟草,获得去除卡那霉素抗性基因,仅含有转ThNHX1耐盐基因的烟草苗,并对影响遗传转化的一些关键因素进行了研究。结果表明,对6株转基因植株进行了PCR分子检测,从凝胶照片中可以看到,转基因烟草株系中有一棵烟草苗的卡那霉素抗性基因条带已不存在,但ThNHX1耐盐基因仍然存在,结果表明该苗即为仅含有转移ThNHX1耐盐基因的烟草苗。 相似文献
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让转基因花卉把世界装扮得更美丽 总被引：1，自引：0，他引：1
21世纪是生物世纪,是转基因生物的时代。自从1983年世界上诞生第一例转基因植物以来,植物基因工程技术已产生了突飞猛进的发展,转基因技术深入到了农业生产的各个领域。通过转基因技术,花卉变得色更艳,姿更美,香更浓,把世界装扮得更美丽。 转基因花卉及其产业优势 转基因花卉,就是利用分子生物学技术,将花卉中某些基因转移到其它花卉植物中去,改变原有生 相似文献
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正通过基因工程技术把外源性目标基因导入某种受体动物的生殖细胞、胚胎干细胞和早期胚胎,并在其染色体上稳定整合,之后经过各种发育途径把外源性基因传递到子代,这就是动物的转基因,或称转基因动物。外源性基因导入受体动物有不同的方法,同时,由于有不同的受体动物,因此要根据实际情况采用不同的方法对动物进行转基因。大致而言,动物转基因的方法有:逆转录病毒法、显微注射法、胚胎干细胞介导法、精子载体法和体细胞核移植法(体细胞克隆介导法)等。通过逆转录病毒转移基因研究人员早就发现,逆转录病毒常常能侵入宿主细胞并整合于细胞中的DNA,因此逆转 相似文献
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目的:分析两性霉素B对医院口腔感染假丝酵母菌的失效性。方法:给予830例口腔感染患者两性霉素B治疗,初始3d的剂量是1、3、5 mg,加入5%葡萄糖溶液40 mg,保持速度是4 mL/h,从第4天开始每日增加4 mg,直至20 mg,后续保持该剂量;持续1~3个月的疗程,总用药量是1~1.5 g,并采用假丝酵母菌R因子检测方法分析两性霉素B对感染口腔假丝酵母菌的失效性。结果:从60株多重抗药性假丝酵母菌中分离出39株R因子,阳性率为65.5%,40株假丝酵母菌R因子的抗药性基因结构中3种以上抗药性基因者占有90%;结论:假丝酵母菌对两性霉素B的抗药性与传递R因子具有较强的关联性,利用R因子对两性霉素B对感染口腔假丝酵母菌失效性的分析具有安全和高效性的特征。 相似文献
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聚-β-羟基丁酸(polyhydroxybutyric acid,PHB)是发现最早且研究最透彻的一种生物可降解塑料.莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)素有"光合酵母"之称,是理想的转基因受体生物.通过转基因技术将PHB生物合成的关键酶基因导入莱茵衣藻,利用光合作用合成PHB,降低PHB的生产成本.从真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)分离出phbB和phbC基因,然后构建phbB和phbC基因的衣藻表达载体p105B124和pH105C124.通过"珠磨法"遗传转化技术共转化p105B124和pH105C124,获得了二价转基因衣藻.分子检测结果表明phbB和phbC基因均已整合到莱茵衣藻基因组中.随后进行结晶紫染色和显微镜观察转基因藻,发现二价转化子的核区和细胞膜附近分布有白色空泡;进一步的电子显微镜观察结果表明白色空泡是由细胞中合成的PHB聚集而成,电镜下观察到由PHB形成的明亮的圆形颗粒.光照(90μE/m2/s)条件下培养转基因藻,出现生长受抑制现象,这可能是由于PHB颗粒在藻细胞内随机分布,干扰了细胞正常的生命活动. 相似文献
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聚-β-羟基丁酸（polyhydroxybutyric acid，PHB）是发现最早且研究最透彻的一种生物可降解塑料。莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）素有“光合酵母”之称，是理想的转基因受体生物。通过转基因技术将PHB生物合成的关键酶基因导入莱茵衣藻，利用光合作用合成PHB，降低PHB的生产成本。从真养产碱杆菌（Alcaligenes eutmphus）分离出phbB和phbC基因，然后构建phbB和phbC基因的衣藻表达载体p1058124和pH105C124。通过“珠磨法”遗传转化技术共转化p1058124和pH105C124，获得了二价转基因衣藻。分子检测结果表明phbB和phbC基因均已整合到莱茵衣藻基因组中。随后进行结晶紫染色和显微镜观察转基因藻，发现二价转化子的核区和细胞膜附近分布有白色空泡；进一步的电子显微镜观察结果表明白色空泡是由细胞中合成的PHB聚集而成，电镜下观察到由PHB形成的明亮的圆形颗粒。光照（90μE／m^2／s）条件下培养转基因藻，出现生长受抑制现象，这可能是由于PHB颗粒在藻细胞内随机分布，干扰了细胞正常的生命活动。 相似文献
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植物转基因技术为培育高效抗虫水稻新品种开辟了新的途径。豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因是一种广谱抗虫基因 ,该成果采用最新研究策略 ,对该基因进行体外修饰 ,使其转译产物最终定位于细胞的内质网中 ,以增加外源抗虫物质的稳定性。实验证明 ,转修饰cpti基因的植物无论是抗虫蛋白含量还是抗虫能力均比转野生型cpti基因植物有显著的提高。已获大量转基因水稻株系 ,包括著名水稻恢复系明恢 81和明恢 86,并用其配制了杂交组合。转基因抗虫杂交水稻已获国家有关部门批准进行中间试验和环境释放 ,大田试验结果表明 ,转基因杂交水稻具有优良的抗虫特性和广阔的应用前景。 相似文献