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本文就限制酶切割后获得的DNA片段种类数、识别序列具有方向性、切割后产生的末端、相同的限制酶切割目的基因与质粒、目的基因与质粒的连接五个方面对学生在解题中易错的疑难知识进行归类分析。 相似文献
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对近年来高考试卷中考查“选择限制酶以成功构建基因表达载体”的试题进行分析,总结归纳出6条解题策略：酶切位点在目的基因两侧和载体上必须都存在;酶切不能破坏特殊序列;善用“双酶切”,注意方向性;合理对标记基因进行酶切;酶切后的末端必须能正常连接;巧用“同尾酶”。 相似文献
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基因工程相关内容操作性强,但是在中学生物学教学中难以进行实际的实验操作。为此,本文对近年来基因工程的重要考点进行了解读。1限制酶限制酶中的"限制"的含义是它比普通酶具有更强的专一性,这种专一性表现在三个层次:识别DNA(不识别RNA)、识别特定序列(两条链正反读序列一样)、只能切割特定序列内特定位点的磷酸二酯键。1.1限制酶的特异性例1(2010浙江高考)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸是否可行?解析烟草花叶病毒是RNA病毒,限制酶不能识别RNA,所以不可行。 相似文献
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<正>例1为了解基因结构,通常会选取某一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小,然后再用另一种限制酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小,表1是某小组进行的相关实验所得结果。表1 相似文献
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谢文栋 《试题与研究：高中理科综合》2015,(6):71-78
考点突破考点一基因工程的基本操作工具(一)重点归纳1.与DNA分子相关的酶(1)几种酶的比较(2)限制酶与DNA连接酶的关系1限制酶不切割自身DNA的原因是:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。2DNA连接酶起作用时不需要模板。2.载体(1)作用1作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。2利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 相似文献
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仔细研究近年来各地的生物高考题,发现限制酶的切割方法是高考中的热门考点。下面就对限制酶主要的切割方法进行分析总结,归纳其优缺点。 相似文献
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人教版高中生物学全一册教材基因工程一节,介绍了限制性内切核酸酶和运载体,阐明了重组DNA的构建过程：先用限制酶切割运载体（质粒）,产生黏性末端,再用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同黏性末端,加入DNA连接酶,即可形成重组DNA分子（也叫重组质粒）。学生学习完这部分内容之后,由于对限制酶和运载体搭配使用及基因检测知识认识不够深入,易产生错误。 相似文献
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限制酶全称限制性核酸内切酶,能识别并切割具有特异序列的双链DNA分子,主要从原核细胞中分离纯化而来,迄今为止,已分离出来的限制酶约有4000余种.作为基因工程中非常重要的一种工具,它应用广泛,是历年高考中能力题的命题着力点,但由于书本相关内容介绍简单,而考试命题时常有所拓展,很多师生在解答此类题目时常发生认知冲突,产生很大的困惑,为此,笔者总结了教学过程中的一些问题,供大家参考. 相似文献
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1基因工程中的重要酶
1.1限制性核酸内切酶（简称＂限制酶＂）是可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA,使DNA链中磷酸二酯键断开的一类内切酶,被誉为＂分子手术刀＂。 相似文献
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从单酶切到双酶切看目的基因与运载体结合的准确率 总被引：1，自引：0，他引：1
2008年江苏省和海南省高考、2009年江苏省高考生物学试卷都考查了基因工程的酶切过程。题目新颖,体现了生物科学的时代特征。学生普遍反映难。究其原因,人教版教材（选修3）叙述的是早期基因工程的“单酶切”,而高考试卷讨论是现代基因工程的“双酶切”以及“双酶切”的优势,两者落差较大。 相似文献
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限制性核酸内切酶主要是微生物体内的一类酶,能将外来的DNA切断.由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶,又称限制酶,是基因工程的"分子 相似文献
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通过设置层层问题,帮助学生理解基因工程中限制酶的作用特点,其与电泳技术在目的基因及质粒获取中的具体应用,培养学生的逻辑思维的习惯和科学探究的能力. 相似文献
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1从原核生物中分离纯化出来的限制酶是否会切割自身的DNA？构建好的重组质粒若以大肠杆菌等原核生物为受体细胞,是否会被其中的限制酶切开而不能起作用呢？ 相似文献
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近三年,江苏高考涉及到限制酶的试题"情有独钟",在其他省市高考试题中也频频出现,并且往往具有较高的难度.因此下面针对限制酶的基本知识作一简单介绍并进行相关高考试题的评析. 相似文献
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1限制酶为什么只切割外源DNA而对自身DNA不起作用?限制酶存在于原核生物体内,而原核生物体内限制酶与甲基化酶往往同时存在。甲基化酶同限制性内切酶具有完全相同的识别序列,甲基化酶使识别序列中的某个碱基发生甲基化,从而保护DNA不被限制性内切酶切开。 相似文献
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本论文用质粒载体PBC1-CD152转化大肠杆菌DH5a，以Amp(50mg／m1)筛选阳性单个菌落，LB培养基大量培养，按照质粒小量提取试剂盒使用方法抽提质粒，AVAⅠ、HindⅢ酶切和PCR扩增检测。可育雌鼠注射PMSG与HCG超排卵，输卵管内收集，移植受体母鼠输卵管腹壶部。结果表明：AVAⅠ酶切产物有一条为2．0kb的片段，证明是目的基因的启动子，从而证明质粒上含有我们所需的目的基因片段。HindⅢ酶切后出现一条带，与质粒的大小相符。共处理十批小鼠100只，有70只为可用供体，处理有效率为。70％，共捡胚1425枚，只均捡卵20．36枚。共处理受体小鼠十批40只，每只植入胚胎20枚，共出生小鼠274只，出生率为34．25％。本次实验成功扩增了免疫耐受诱导基因皮肤靶向表达载体PBC1-CD152，并以小鼠为动物模型，建立了完善的显微注射法转基因技术流程。 相似文献
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将萤火虫萤光素酶基因重组到质粒pBR325中,通过“三亲交配”和同源重组,将萤光素酶基因整合到Ti质粒pGV3850:1103。通过改良的叶盘转化法,用萤光素酶基因转化单子叶植物花叶芋,获得转基因植株。对再生植株的胭脂碱测定、新霉素磷酸转移酶分析、DNA点杂交、萤光素酶基因活性测定,证明萤光素酶基因已转化到花叶芋中并进行了表达。 相似文献
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基因的分离定律为遗传学理论的形成奠定了科学基础,正因为它的特殊地位,使其成为各地历年高考的热点。本文对高考试题中"基因的分离定律"考查角度做出分析,以期与同仁携手并进,提高复习效率。 相似文献