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用于农杆菌转化的雪花莲外源凝集素(GNA)基因植物中间表达载体的构建 总被引：1，自引：0，他引：1
雪花莲外源凝集素(GNA)是一类能特异地和甘露糖残基结合的蛋白质成分,对人畜毒性极低,但对同翅目昆虫有强烈的抗性.为利用雪花莲外源凝集素对同翅目害虫的抗性,将雪花莲外源凝集素基因置于Ubi启动子和Tnos终止子的控制之下,插入pCAMBIA3300的SmaI位点,构建了可用于农杆菌转化的植物中间表达载体-pCUGAN-Bar.将pCUGAN-Bar电击转入农杆菌,得到了带有pCUGAN-Bar的农杆菌菌株,可用于小麦和水稻的转化工作. 相似文献
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农杆菌介导的白菜遗传转化影响因子研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
白菜遗传转化技术中最常用的方法是农杆菌介导法。由于白菜的再生能力较低，因此农杆菌介导白菜遗传转化的研究报道较少。本文就近十年来的研究进展作一简要回顾，并对影响其转化及再生频率的关键性因子，如植物基因型、外植体及生理状态、农杆菌菌株、感染方法和培养基附加成分等方面进行了较详细的讨论。 相似文献
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根癌农杆菌介导转化法是目前应用最广泛的植物转基因方法,通过植物表达载体上DNA的加工和转移将外源DNA转运到植物细胞内.主要介绍了根癌农杆菌介导植物遗传转化的分子机制. 相似文献
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细胞饼瞬时转化技术具有重要的应用前景,然而其转化效率的优化研究尚未见报道。通过农杆菌介导法,系统地比较不同农杆菌浓度,抗氧化剂以及表面活性剂的添加对细胞饼瞬时转化效率的影响。研究结果表明:1)侵染用农杆菌的浓度在较高水平(OD=1.0)时更有利于转化效率的提升;2)两种抗氧化剂中,辛硫酸效果较半胱氨酸为好。但两者均表现为低浓度对转化效率具有促进作用,而高浓度则表现为抑制作用;3)测试的两种表面活性剂,Triton X-100以及Silwet L-77对转化效率均具有显著提升作用,而Silwet L-77的作用则更为突出;4)在优化条件下,人白介素10的含量较对照高出3.66倍。本研究的结果可进一步提升细胞饼瞬时转化技术的应用前景,为后续这一技术的应用奠定了一定的理论基础。 相似文献
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目的:探讨根癌农杆菌介导转化平菇菌丝体的最佳转化条件。方法:以平菇ACCC52857为受体,利用潮霉素B抗性基因作为筛选标记,建立根癌农杆菌介导的平菇菌丝遗传转化体系;探讨乙酰丁香酮(AS)的浓度,根癌农杆菌的浓度,共培养的时间和共培养的温度这四个条件对转化的影响。结果:根癌农杆菌菌液浓度为OD600=0.6~0.7,诱导培养基中添加200μmol/L AS,25℃共培养3~5d,其转化效率最高。结论:对根癌农杆菌介导平菇菌丝转化体系条件的优化,为提高遗传转化效率,以及菌株选育工作奠定基础。 相似文献
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《集宁师专学报》2016,(5):1-4
该文就农杆菌介导的vbp基因遗传转化调控机理进行研究。方法一:分析vpb1基因启动子序列;方法二:对探测载体中vpb1基因启动子的转录活性进行验证;方法三:设计vbpl基因启动子序列突变位点。结果:(1)基于荧光蛋白表达情况来看,在pRSET-A质粒中的vbpl基因启动子能够将荧光基因的表达予以正常启动。(2)能够正确构建pRSET-m1突变质粒,vbp1基因启动子的转录活性会随着SigmaA结合位点的去除而降低。(3)能够正确构建p RSET-m2突变质粒,vbp1基因启动子的转录活性会随着转录因子Fnr结合位点中-65位碱基的突变而增强。(4)能够正确构建pRSET-m3突变质粒,vbp1基因启动子的转录活性会随着转录因子Fnr结合位点中-66位和-68位碱基的突变而消失。结论:深入研究农杆菌介导的vbp基因遗传转化调控机理,能够找出影响农杆菌的VBP蛋白表达的相关因素,有可能使所获得的农杆菌菌株具有较高的转化效率,以便能够有效提高植物转基因效率。 相似文献
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基因瞬时表达是研究目标基因功能的快速、有效手段,在植物领域得到了广泛应用。为了使学生充分了解基因工程技术在植物次级代谢物研究中的应用,实现科研反哺教学,设计了植物基因瞬时表达并影响其次级代谢物质积累的综合实验。选取非模式植物莲（Nelumbo nucifera）转录因子NnWRKY70和NnMYB5为研究对象,运用分子克隆技术构建双元表达载体。利用农杆菌注射法将目标基因导入莲花瓣中实现瞬时转化,发现过表达NnWRKY70和Nn MYB5能促进莲生物碱的合成以及花瓣花青素的积累。该实验是对以往植物生物学及生理学实验内容的扩充,有利于培养和提高学生的科研思维和实践创新能力。 相似文献
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现行高中生物教材 (选修 )P .61对“工程菌”的注释为 :用基因工程的方法 ,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系一般称为“工程菌” ,如含有人胰岛素的大肠杆菌菌株 ,含有抗虫基因的土壤农杆菌菌株都是“工程菌”。笔者认为 ,所举例中含有胰岛素的大肠杆菌菌株属于“工程菌”这种说法欠妥 ,应改为“如含有人胰岛素基因的大肠杆菌菌株” ,这样 ,才能与后一句即含有抗虫基因的土壤农杆菌菌株都属“工程菌”相对应。对“工程菌”解释的商榷$贵州省遵义县第三中学!563100@鄢世加 相似文献
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本文从农杆菌Ti质粒的介绍、重组质粒导入农杆菌的方法、农杆菌侵染植物细胞机理和转化法的影响因素4个角度,深入解读了近几年浙江选考题中涉及的农杆菌转化法。 相似文献