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PCR法分析WSSV在日本对虾体内的感染增殖 总被引:2,自引:1,他引:2
注射白斑症病毒(WSSV)感染日本对虾,隔一定时间取样。PCR检测病毒在对虾体内的分布情况.结果表明:感染后12h首先在血液和鳃中出现病毒,而后是消化道和心脏,最后是肌肉和附肢,但在肝胰腺中没有观察到病毒. 相似文献
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利用RT-PCR技术从日本对虾中克隆到β-actin基因的cDNA,通过双酶切将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中,转化大肠杆菌E.coli BL21感受态细胞,获得阳性克隆.4℃下IPTG诱导表达,Glutathione Sepharose 4B纯化后获得高纯度的β-actin蛋白.① 相似文献
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泥蚶肌肉提取液经硫酸铵二步分级沉淀后,再经DEAE-Sepharose(Fast Flow)离子交换和SephacrylS-200-HR分子筛层析,从中分离纯化得到泥蚶肌肉凝集素.经测定,该凝集素分子量约为238kDa,为单个亚基的蛋白质,其相对分子量为60kDa,分子中含3.27%的糖.在氨基酸组成中,谷氨酸(Glu)含量最高,其次是丝氨酸(Ser)和天门冬氨酸(Asp).泥蚶肌肉凝集素对人和动物红细胞均有凝集作用,其中对兔的红细跑的凝集活性最高.该凝集素对兔的红细胞的凝集活性不被测试的10种浓度为200mmol·L^-1的糖所抑制.pH6.0~7.0时具有较强活性;热稳定性较高,在30-50℃的温度范围内对兔红细胞的凝集仍保持原有活性,60℃以后活力下降;凝集活性依赖于Ca^2+. 相似文献
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采用家鸡、家鸽、家兔、虎纹蛙、猪的红细胞测定法国亮大蜗牛凝集素和白玉蜗牛凝集素的凝集活性,进行糖抑制、热稳定性、pH及Ca2+影响试验.结果表明,法国亮大蜗牛凝集素和白玉蜗牛凝集素都能凝集家鸡、家鸽、家兔、猪4种红细胞,且对兔红细胞的凝集活性最高,对蛙红细胞的凝集活性最低;两者凝集活性在pH7~8最适宜,它们均有一定的热稳定性,部分糖对蜗牛凝集素产生抑制作用,金属离子能影响蜗牛凝集素的凝集效价,蜗牛凝集素的凝集活性依赖于Ca2+. 相似文献