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61.
综述了乳酸菌质粒的研究发展及其在食品工业中的应用。主要包括筛选和改良生产菌种,构建食品级载体受体系统和建立体内乳酸菌分子克隆体系三方面内容。  相似文献   
62.
辣椒茎尖及下胚轴切段,能被含Ti质粒pC27的根癌农杆菌感染。该质粒带有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸基转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化辣椒细胞。卡那霉素抗性绿苗经NPT-Ⅱ酶活性检测及DNA分子杂交试验表明,外源基因已导入辣椒细胞,并能在植株上表达出相应的性状。  相似文献   
63.
采用基因枪法,将SCaM4-Citrine、PepA-mRFP和ECBP21-mRFP 3种融合蛋白基因转化到洋葱内表皮细胞.同时,将SCaM4-Citrine、PepA-mRFP基因以及SCaM4-Citrine、ECBP21-mRFP基因分别等量混合,共转化入洋葱内表皮细胞,23℃光照培养18~22 h,利用激光共聚焦显微镜可观察到大量融合蛋白的表达,基因枪转化技术获得成功.并发现,对于洋葱表皮细胞来说,幼嫩部分的细胞转化率比老的高,并且枪击压力为7 580 kPa或9 300 kPa时为最适压力.  相似文献   
64.
狭义的遗传工程专指基因工程,它包括外源基因的分离,转移,整合与表达等一系列步骤。其中外源基因的转移需要借助载体。本文综述了载体的基本条件,几种常用载体及构建,并进一步探讨了遗传工程中选择或构建载体应当考虑的一些问题。  相似文献   
65.
质粒DNA快速提取法在基础课实验中的应用   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文对质粒DNA及其结构、形态和功能进行了综述,介绍了快速提取质粒DNA的基本步骤,并对其提取过程中的注意事项进行了剖析,分析了该方法的优点。  相似文献   
66.
一种简易提取细菌质粒DNA的方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
对常规碱裂解法小量提取细菌质粒DNA的方法进行了改进,用生理盐水代替溶液Ⅰ重悬菌体,简化了试剂配制的过程,既经济又省力.利用该方法获得的质粒DNA的量及纯度与常规碱裂解法获得的质粒DNA基本一致,完全可以满足基因工程基础实验的要求.此实验是比较适合中学实验室的学生实验,有利于基因工程实验在中学教学中的普及.  相似文献   
67.
重组质粒pRSET DNA纯化方法的比较   总被引:2,自引:0,他引:2  
分别采用柱式小量质粒抽提纯化试剂盒和聚乙二醇沉淀法纯化重组质粒pRSET DNA,琼脂糖凝胶电泳和DU800核酸蛋白分析仪鉴定已纯化的重组质粒pRSET DNA的纯度.结果显示,采用聚乙二醇沉淀法纯化重组质粒pRSET DNA:A260/280=1.83,试剂盒所得结果:A260/280=1.91.与试剂盒相比,聚乙二醇沉淀法获得纯化质粒的纯度没有显著性差异,常规质粒纯化实验中可用此法代替昂贵的试剂盒.  相似文献   
68.
由于在农村推行生产责任制和实行科学种田,近年来我国农业生产有了全面、稳定和持续的增长,初步解决了十亿人口的温饱问题.但是要进一步满足对农产品的需求,仍需要作出巨大的努力,其中包括发展传统的农业科学和尽量采用植物生物技术.植物生物技术包括五个分支领域,即用离体技术改良植物品种、经济植物的快速繁殖、超低温种质保存、植物细胞的大量培养和植物遗传工程,这些领域的进展都会直接或间接地对农业的发展产生影响.本文不打算全面评述植物生物工程的进展,仅就那些在今后5—15年可能在农业发展上产生实际效果的技术作一粗略的估价和展望.  相似文献   
69.
目的克隆小鼠内皮抑素(Endostatin)编码区cDNA序列及测序鉴定并构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因表达载体.方法从小鼠肝细胞提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增获得全长Endostatin基因,测序并利用基因重组技术构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.结果分光光度计测定50倍稀释的总RNA抽提产物,A260=0.834,A280=0.407,A260A280=2.049,总RNA浓度为1.668g/L.EndostatincDNA的RT-PCR产物与载体pMD18T连接并经测序证实Endostatin序列与文献报道完全一致,并构建了含Egr-1启动子的IFNY和Endostain双基因共表达质粒pEgY-IFN(Y)-Endostatin.结论成功克隆小鼠Endostatin基因,构建了pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.  相似文献   
70.
为了方便、快速地检测大豆及其加工食品中的转基因成分,准确定量转基因大豆的转基因含量,构建含常用转基因插入元件花椰菜花叶病毒Ca MV35S启动子、NOS终止子、新霉素磷酸转移酶基因NPTⅡ、玄参花叶病毒FMV35S启动子和大豆内源基因Lectin-1的质粒DNA标准物质,质粒DNA中靶基因元件均为单拷贝。开展了质粒DNA标准物质的均匀性、稳定性、检测适用性、定值及不确定度评价。结果表明,在实时荧光定量PCR(q PCR)检测中,质粒DNA的4种转基因插入元件分别与大豆内源基因Lectin-1的比值为0.98±0.06(Ca MV35S:L-1),0.95±0.06(FMV35S:L-1),1.05±0.08(NOS:L-1),1.11±0.08(NPTII:L-1)(k=2),靶基因扩增的标准曲线R20.99,可用于转基因检测实验室的结果质量控制,能力验证等活动。  相似文献   
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