小鼠Endostatin基因的分子克隆、鉴定及双基因共表达质粒pEgr-IFNγ-Endostatin的构建     

肖平  李辉南  潘雪娜  贾少微  高凤彤 《深圳特区科技》2005,(Z1):184-186

目的克隆小鼠内皮抑素(Endostatin)编码区cDNA序列及测序鉴定并构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因表达载体.方法从小鼠肝细胞提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增获得全长Endostatin基因,测序并利用基因重组技术构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.结果分光光度计测定50倍稀释的总RNA抽提产物,A260=0.834,A280=0.407,A260A280=2.049,总RNA浓度为1.668g/L.EndostatincDNA的RT-PCR产物与载体pMD18T连接并经测序证实Endostatin序列与文献报道完全一致,并构建了含Egr-1启动子的IFNY和Endostain双基因共表达质粒pEgY-IFN(Y)-Endostatin.结论成功克隆小鼠Endostatin基因,构建了pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.  相似文献   

转基因大豆质粒DNA标准物质的研制     

《实验室研究与探索》2016,(5)

为了方便、快速地检测大豆及其加工食品中的转基因成分,准确定量转基因大豆的转基因含量,构建含常用转基因插入元件花椰菜花叶病毒Ca MV35S启动子、NOS终止子、新霉素磷酸转移酶基因NPTⅡ、玄参花叶病毒FMV35S启动子和大豆内源基因Lectin-1的质粒DNA标准物质,质粒DNA中靶基因元件均为单拷贝。开展了质粒DNA标准物质的均匀性、稳定性、检测适用性、定值及不确定度评价。结果表明,在实时荧光定量PCR(q PCR)检测中,质粒DNA的4种转基因插入元件分别与大豆内源基因Lectin-1的比值为0.98±0.06(Ca MV35S:L-1),0.95±0.06(FMV35S:L-1),1.05±0.08(NOS:L-1),1.11±0.08(NPTII:L-1)(k=2),靶基因扩增的标准曲线R20.99,可用于转基因检测实验室的结果质量控制,能力验证等活动。  相似文献   

重组质粒DNA的提取和纯化方法研究     

邓宁 《商丘师范学院学报》1996,(Z4)

质粒ＤＮＡ的提纯是现代分子遗传学和基因工程的重要技术，本实验对质粒ＤＮＡ的提取和纯化方法进行了比较研究．并通过改进，建立了简便、快速提取和纯化质粒ＤＮＡ的方法．利用此法所提质粒ＤＮＡ收率大，纯度高，能适于细菌转化、细胞转染及酶切分析等进一步实验研究．  相似文献   

关于近年江苏高考试卷中基因工程题目的思考     

李洪育  陈莎莎 《中学生物学》2011,(11):52-53

基因工程操作程序主要包括4个步骤:目的基因的获取、基因的表达与载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。重组DNA技术(获取目的基因和基因的表达与载体的构建)是整个  相似文献   

科技杂志要览     

《中国科技信息》2012,(24):29-32

肝胚瘤细胞株HepG2中HBx蛋白对SOCS3表达的影响及其机制The influence of Hepatitis B Virus X Protein on the expressionof SOCS3 protein and its mechanisms in HepG2 cells管世鹤[1]潘颖[1]杨凯[1]吴圆圆[1]杨东亮[2]目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein,HBx)对肝胚瘤细胞株HepG2表达信号抑制因子3(SOCS3)的影响及其机制.方法将表达HBx蛋白的重组质粒FL1-145HBx转染HepG2细胞,以不同浓度的SRC抑制剂PP2处理转染细胞,运用Westem blot和RT-  相似文献   

小鼠牙本质涎磷蛋白基因重组腺病毒载体的构建     

《中国科技信息》2008,(7):10

  相似文献   

美利用质粒制造诱导多功能干细胞     

《中国科技信息》2009,(7)

继英国和加拿大科学家3月1日在《自然》杂志网站上报告说,他们利用一种基因“转位子”（即DNA中一段可以移动的基因序列）来替代病毒作为运输所需基因的载体,将普通皮肤细胞转化为诱导多功能干细胞（iPS细胞）之后,美国科学家又传捷报：威斯康星州立大学科学家在3月26日出版的《自然》杂志上宣称,他们找到了不需要借助病毒或外来基因、更安全地将人类皮肤细胞变成iPS细胞的一种新方法。  相似文献   

细菌质粒     

彭昌文 《济宁师范专科学校学报》2000,21(6):40-41

阐述了质粒的统一命名规则,并对已发现的质粒进行初步的分类。  相似文献   

细菌质粒及其在基因工程中的应用     

姚庆智 《内蒙古科技与经济》2000,(5):24-26

细菌质粒作为一种特殊的遗传结构不仅在微生物遗传中起着基因库的作用,而且将其应用在基因工程中,使转基因生物在工业、农业、医学等各个领域都发挥着极大的作用,扩大了人类的生存空间,为解闷１世纪所面临的危机提供了一种保障。  相似文献   

pCR-HBc-X6-βhCG CTP37 DNA疫苗的大规模提取和纯化     

周红霞  周梅仙  何毅  刘景晶 《南京晓庄学院学报》2005,21(5):56-59

本文研究了DEAE-Cellulose阴离子交换树脂纯化pCR-HBc-X6-βhCG CTP37质粒DNA的方法。经研究发现纯化的质粒不含RNA和蛋白质污染;其OD260/OD280高于1.8;每2500ml发酵液可得到4.95mg的质粒DNA。  相似文献