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本文将已构建好的带有乳糖酶基因的杆状病毒(AcNPV p10 Z-9)作为载体,经口服感染人工饲养的银纹夜蛾(Argyrogra(?) agnata)幼虫,在昆虫体内高效表达乳糖酶蛋白,表达水平可占虫体可溶性蛋白的20％。将虫匀浆后,经高速离心、丙酮沉淀及冷冻干燥等方法,即可制备成粗酶。进一步经FPLC β-aminophenyl-β-D-thiogalactopyranoside亲和柱层析方法制备成精制酶,可作为试剂及药物应用.经测定纯化后的酶比活为150000u/mg蛋白。酶活力的最适pH值是6.0～8.0,最适温度为30～40℃。该酶水解对硝基苯-β-D-半乳糖(ONPG)的米氏常数(Km)值为7.14×10~(4)mol/L,乳糖可竞争性地抑制乳糖酶水解ONPG的能力,Ki值为1.30×10~(-3)mol/L。 相似文献
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