乳糖诱导Pfu DNA聚合酶基因的表达及酶的纯化     

吴海洪  孙章辉  蔡谨 《科技通报》2008,24(1):23-28

利用乳糖诱导重组大肠杆菌BL21(DE3)中Pfu DNA聚合酶基因的表达。对诱导菌株起始生长量、乳糖浓度和诱导持续时间进行了优化,尝试使用JK110弱阳离子交换柱和Sephadex G-75凝胶层析柱来分离纯化Pfu DNA聚合酶,并用PCR扩增实验检测酶活性。结果表明乳糖可以有效诱导Pfu酶的表达,JK110离子交换柱有较好的纯化效果,从500 mL培养液中可以得到3×105U的酶活,比活达22,200 U/mg,结果好于IPTG诱导表达。  相似文献