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将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在不同的诱导时机、诱导温度、IPTG的浓度和Mg~(2+)浓度条件下培养大肠杆菌,通过SDS-PAGE和发光强度检测分析TAT-LUC的酶活性强度及表达量;将高活性的TAT-LUC与LUC对比检测ATP,通过发光强度分析TAT-LUC的敏感性和可靠性。表明:在含Mg~(2+)浓度为50mmol/L的LB培养基中将大肠杆菌培养至OD600为0.6时,加入终浓度为0.5mmol/L的IPTG,22℃诱导16h可获得大量高活性的TAT-LUC;相比LUC,TAT-LUC可以检测到小于10nmol/L的ATP,发光强度与ATP含量呈强相关性(R2=0.99);并且不用裂解细胞,TAT-LUC可直接检测至少40个细胞内ATP;穿膜肽标记的荧光素酶蛋白成功用于检测活细胞内的ATP含量。 相似文献
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王淋力 《佳木斯职业学院学报》2022,(4):25-27
"不忘初心、牢记使命"是中国共产党人在进入新时代以来,立足于全新的历史方位上提出来的一个重要命题,蕴含着"我是谁、我从哪里来、我到哪里去"的内在逻辑,深刻体现了中国共产党人鲜明的价值追求、价值导向和价值遵循.五千多年的中华优秀传统文化的沉淀是其历史之根,马克思主义理论科学真理的支撑是其理论之基,中国共产党百年奋进历程的... 相似文献
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英语教师专业发展的基础能力也决定了其教学质量能否提升和发展,更展现了英语教师的实践能力水平的高低。所以,作为英语教师专业发展基础能力的学科专业知识也受到越来越多的关注。不同以往更多关注于学生的实践能力,该文旨在研究新课改背景下英语专业师范生专业知识发展的困境以及对策。在分析与总结了其他学者的研究以及查看相关文献后,该文以学科专业知识为理论基础,利用问卷调查,访谈,课堂观察等方法对六盘水师范学院英语专业的学生进行个案研究。探究地方本科院校英语师范生学科知识建构的困境,从而提出合理有效发展策略。 相似文献
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自觉对比法产生于50年代苏联、东欧诸国。这派的教学法认为语言是由语音、词汇、语法三要素构成的体系,因此提倡知识→技能→熟巧三段说和“自觉学习”论。这派的学者认为母语对学习外语有很大作用,教学必须通过翻译和对比才能较好地掌握其他国家的语言。我们发现,在教学中运用这种教学法可以收到良好教学效果。中学生由于缺乏语言环境,英语教学实效不理想,因此,在教学中,通过汉语与英语的语法比较,可以促进他们更好地掌握外语语法的特点,避免中国学生常犯的许多错误。例如,英语的词类分十类,汉语的词类也是十类,大多词类有相同点,但也有不同点。如汉语中的形容词可作谓语,在英语中则不行。讲清这一点,可以使学生在翻译时不犯缺成分的错误。 相似文献
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