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1.
由O’Farrel等1975年建立的双向电泳技术是目前唯一能将数千种蛋白质同时分离与展示的分离技术。双向电泳的原理是,第一向进行等电聚焦(isoelectric focusing,IEF),蛋白质沿pH梯度分离至各自的等电点;随后,再沿垂直的方向进行SDS—PAGE电泳,按分子量大小进行分离。样品经过电荷和质量两次分  相似文献   
2.
某铀尾矿区生长着大量美洲商陆(Phytolacca americana L.),目前还未见美洲商陆耐受及富集铀相关蛋白质组学研究报道。为了找到铀耐受及富集表达相关蛋白,建立了铀尾矿区和对照区2种不同生境美洲商陆根系蛋白质组研究技术。通过全蛋白质制备条件优化、2DE电泳条件摸索以及染色方法选择,得到了重现性好、分离效果和清晰度都很高的美洲商陆根系双向电泳差异凝胶图谱。经软件分析,筛选出了铀耐受及富集相关蛋白24个,上调表达11个、下调表达13个。  相似文献   
3.
现代生物学表明,所有生物性状的变化是基因表达变化的结果.双向电泳是目前蛋白质常规分析技术中分辨率较高的方法.采用双向电泳技术分析了正常大鼠、心肌缺血模型大鼠、药物处理后的大鼠的血清蛋白组的差异,从而探讨利用双向电泳技术分析药物处理的有效性.  相似文献   
4.
双向电泳技术是当前蛋白质组学研究中的重要技术。设计"双向电泳检测热休克处理对细菌蛋白表达谱的影响"的实验,以PGEX-4T-2大肠杆菌中可溶性总蛋白为研究对象,采用双向电泳技术筛选热休克处理后有差异表达的蛋白。实验获得了稳定性较高、分辨率和重复性较好的电泳图谱,建立了一种适于本科实验教学的双向电泳技术体系。通过该实验,学生可以掌握双向电泳技术的基本原理、实验方法以及蛋白提取的一般思路与方法。  相似文献   
5.
IEF/SDSPAGE双向电泳的高分离度是各种类型的单向PAGE无法比拟的.以Bio-Rad公司的PR0rrEANⅡxi2-D电泳系统为基础,初步研究了IEF/SDSPAGE双向电泳技术建立的条件.  相似文献   
6.
目的应用双向电泳及串联质谱技术,研究不同剂量三氯乙烯(TCE)诱导L-02肝细胞蛋白质表达谱的差异.方法L-02肝细胞分别用不同剂量TCE和溶剂对照(DMSO)处理后,提取细胞总蛋白,双向凝胶电泳分离蛋白质组成分,银染显色,经ImagerMaster 2D Platinum 5.0软件分组分析比较四组图谱,并对差异蛋白斑点进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间串联质谱(MALDl-TOF-TOF-MS)分析鉴定.结果得出差异较明显的蛋白质斑点15个,不同剂量TCE刺激后表达分别上调、下调或消失,提示TCE可引起肝细胞蛋白表达发生改变.通过质谱鉴定和lPI human数据库检索,鉴定了其中9个TCE诱导L-02肝细胞相关的蛋白质.结论这些结果为深入研究TCE毒作用相关的蛋白质及TCE毒作用的分子标志物提供依据,并为阐明TCE毒作用的分子机制提供线索.  相似文献   
7.
本文报道了冷激失绿水稻突变体1103s在失绿过程中叶蛋白的变化。电泳结果显示。未经诱导的1103s与其突变原始亲本8902s的蛋白组成未见明显差异;诱导后失绿的叶片中,Rubisco的大、小亚基表达正常,一个56.2kd(PI=4.5)的特异蛋白PI缺失。同一叶片上,在与失绿组织相邻的绿色组织中,此蛋白亦被检测到,不过量有明显减少。研究结果表明,该蛋白伴随失绿过程消失,而随复绿出现,且该蛋白的表达调控与形态性状紧密连锁。故推测PI蛋白可能是冷激应答蛋白。  相似文献   
8.
本文研究的主要目的是建立大肠杆菌可溶性蛋白质组的双向电泳技术,以等点聚焦为第一向,SDS—PAGE为第二向进行双向电泳,并对样品处理方式、蛋白上样量和染色方法等关键因素和环节进行了比较研究,通过实验条件的筛选和优化获得了较满意的双向电泳图谱。采取的方法具有较高的分辨率和重复性,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础,成功地用于了本科实验教学中。  相似文献   
9.
利用蛋白质纽学技术分析子宫内膜癌患者与健康者血清蛋白的表达差异,试图寻找子宫内膜癌血清的蛋白质标志物。乙腈沉淀法去除子宫内膜癌患者组与健康组血清中的高丰度蛋白,双向凝胶电泳,软件分析差异性蛋白点。相对于健康组,子宫内膜癌患者组表达量下调的蛋白质点有2个,表达量上调的蛋白质点有11个。所得到的差异蛋白质点为子宫内膜癌的进一步研究奠定了基础。  相似文献   
10.
同工酶研究及其应用进展   总被引:12,自引:0,他引:12  
本文阐述了同工酶的分离技术及同工酶研究在动物、植物、微生物、农业和医学等方面的应用,说明同工酶分析技术具有重要的应用前景。  相似文献   
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