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| 尿嘧啶DNA糖苷酶活性的电泳凝胶成像分析测定 | |
| 引用本文： | 陈朝银,刘丽,贲昆龙.尿嘧啶DNA糖苷酶活性的电泳凝胶成像分析测定[J].科技通报,2004,20(2):116-120. |
| 作者姓名： | 陈朝银 刘丽 贲昆龙 |
| 作者单位： | 1. 昆明理工大学生物工程系,昆明,650224;中国科学院研究生院昆明动物研究所,昆明,650223 2. 华南农业大学动物科技学院,广州,510642 3. 中国科学院研究生院昆明动物研究所,昆明,650223 |
| 基金项目： | 云南省省院合作项目(96S004)，云南省应用基础基金项目(98C095M) |
| 摘 要： | 尿嘧啶DNA糖苷酶(UNG)是防止PCR假阳性反应的工具酶,参照限制性DNA内切酶活力测定法的原理(以完全消化DNA带型的最高稀释度为一个活性单位)和应用凝胶成像分析技术,建立了UNG酶活性的非同位素检测新方法.反应体积为20μL,底物dU ung(dU DNA)为165μg,加UNG后在适当温度下反应10min,使底物去除尿嘧啶,其AP位点经碱降解.通过琼脂糖凝胶电泳和凝胶成像分析,测定底物dU ung的残留量以测定UNG酶活性.酶活力以37℃每分钟降解1ngdU ung的酶量为一个单位,检测灵敏度为1ng,检测线性范围为0～165ng.该法简便易行、客观、精密,重复性好(CV<3%),结果显示直观. |
| 关 键 词： | 生物化学 尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG） 酶活性 电泳凝胶成像分析 酶活性测定 |
| 文章编号： | 1001-7119(2004)02-0116-05 |
| 修稿时间： | 2003年2月17日 |
Assay of Uracil DNA Glycosylase Activity with Gel Electrophoresis and 1D Image Analysis System |
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| CHEN Chao-Yin.Assay of Uracil DNA Glycosylase Activity with Gel Electrophoresis and 1D Image Analysis System[J].Bulletin of Science and Technology,2004,20(2):116-120. | |
| Authors: | CHEN Chao-Yin |
| Institution: | CHEN Chao-Yin~ |
| Abstract: | |
| Keywords: | biochemistry uracil DNA glucosylase activity gel electrophoresis 1D image analysis |
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