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蔺草基因组DNA提取条件的优化研究
引用本文:徐方娇,李礼君,顾朱益,茅瑶琼,王忠华.蔺草基因组DNA提取条件的优化研究[J].科技通报,2010,26(4):523-530.
作者姓名:徐方娇  李礼君  顾朱益  茅瑶琼  王忠华
作者单位:浙江万里学院,生物技术研究所,浙江宁波,315100
基金项目:浙江省科技厅计划项目 
摘    要:以来自宁波高桥种质资源圃中的15个蔺草样品为材料,进行了基因组DNA提取条件的优化研究,结果表明:加入Proteinase K后,DNA的浓度普遍在600μg/mL以上,A260/A280值在1.8-2.0之间,浓度随加入量的增加呈递增状态,在加入量为6μL时提取效果最好。Proteinase K水浴温度与时间的条件优化试验中发现,最佳的水浴温度为65℃,水浴时间以30 min,离心条件在转速10,000 r/min,时间8 min时获得的DNA质量较好。加入RNase A后,A260/A280值在1.8-2.0之间,随加入量的增加纯度也增大,加入量以3μL为宜;RNase A水浴时间在10 min时A260/A280值普遍最接近1.8,浓度也较高。应用所获得的优化提取条件对宁波市高桥镇种植的15个蔺草样品进行提取DNA测试,电泳结果表明所有品种都出现了特异性DNA条带。由此,在进行蔺草实生苗基因组DNA提取时,建议采用如下条件:Proteinase K加入量6μL,水浴温度为65℃,时间为30 min;第一步DNA沉淀的离心转速为10,000r/min,离心时间为8 min。RNase A加入量3μL;RNase A水浴时间10 min。

关 键 词:蔺草  基因组DNA  试剂盒提取法  分离  纯化

Optimization Study of Extraction Method of Genomic DNA from Mat Rush
XU Fangjiao,LI Lijun,GU Zhuyi,MAO Yaoxiong,WANG Zhonghua.Optimization Study of Extraction Method of Genomic DNA from Mat Rush[J].Bulletin of Science and Technology,2010,26(4):523-530.
Authors:XU Fangjiao  LI Lijun  GU Zhuyi  MAO Yaoxiong  WANG Zhonghua
Abstract:
Keywords:
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