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斜纹夜蛾核型多角体病毒日本株pif-2基因的克隆及原核表达
引用本文:胡贵玉,王文兵,盛晔,黄光镁,石瑞英,金玉婷,朱江.斜纹夜蛾核型多角体病毒日本株pif-2基因的克隆及原核表达[J].科技通报,2010,26(1):81-87.
作者姓名:胡贵玉  王文兵  盛晔  黄光镁  石瑞英  金玉婷  朱江
作者单位:1. 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院,江苏,苏州,215123
2. 江苏大学生命科学研究院,江苏,镇江,212013
基金项目:苏州市科技支撑计划项目(SNG0924)
摘    要:为研究斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura muhicapsid nucleopolyhedrovirus.SpltMNPV)侵染规律,根据SphMNPV中国株(G2)ORF135基因序列设计引物,经PCR扩增,从SpltMNPV日本株(B)基因组中克隆了pif-2基因。核苷酸序列分析表明,该基因是甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)pif-2的同源物,读码框含1278bp,编码425个氨基酸的蛋白质,推定分子量为48.6kD。与其他杆状病毒的同源物比对显示.SpltMNPV-JP-B PIF-2蛋白中14个Cys残基高度保守。联配分析表明,SphMNPV-JP-B pif-2的核苷酸序列与其他13种核型多角体病毒的同源性有较大差异。将pif-2克隆至原核表达载体pET32a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中获得了融合表达,SDS-PAGE分析表明在约69kD处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。

关 键 词:斜纹夜蛾  核型多角体病毒  pif-2基因  原核表达

Cloning and Expression of pif-2 Gene of Spodoptera litura Mniticapsid Nucleopolyhedrovirus Japanese Strain (B)
HU Guiyu,WANG Wenbing,SHENG Ye,HUANG Guangmei,SHI Rueiyin,JIN Yutin,ZHU Jiang.Cloning and Expression of pif-2 Gene of Spodoptera litura Mniticapsid Nucleopolyhedrovirus Japanese Strain (B)[J].Bulletin of Science and Technology,2010,26(1):81-87.
Authors:HU Guiyu  WANG Wenbing  SHENG Ye  HUANG Guangmei  SHI Rueiyin  JIN Yutin  ZHU Jiang
Institution:1.Life Sciences College/a>;Soochow University/a>;Suzhou 215123/a>;China/a>;2.Institute of Life Sciences/a>;Jiangsu University/a>;Zhenjiang 212013/a>;China
Abstract:In order to study the rule of the infection of pif-2 protein of Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus(SpltMNPV),the primers were designed according to the sequence of SpltMNPV-G2 ORF135.The pif-2 gene was am-plified by PCR from SpltMNPV-JP-B.Nucleotide sequence analysis demonstrated that this gene is homologous with SeM-NPV pif-2,and has a 1278 bp ORF,encoding 425 amino acids with a predicted molecular weight of 48.6 kDa.Align-ment of SpltMNPV-JP-B pif-2 and other baculovirus homologues reveale...
Keywords:Spodoptera litura  nucleopolyhedrovirus  pif-2 gene  expression  
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