| 大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNALeu的相互作用头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组 |
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| 引用本文： | 李勇,王恩多.大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNALeu的相互作用头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组[J].中国科学院研究生院学报,2003,20(1):117-122. |
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| 作者姓名： | 李勇 王恩多 |
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| 摘 要： | 第一部分为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA
Leu1和tRNALeu2接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶.
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| 关 键 词： | tRNALeu 亮氨酰-tRNA合成酶相互作用 头孢菌素酰化酶 假单孢菌 亚基重组 |
Study on the
Interaction Between Leucyl-tRNA Synthetase and tRNALeu from Escherichia Coli
Gene Expression, Post-Translational Processing and Subunits Reconstitution in Vivo of
Cephalosporin Acylase from Pseudomonas |
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| Abstract.Study on the
Interaction Between Leucyl-tRNA Synthetase and tRNALeu from Escherichia Coli
Gene Expression, Post-Translational Processing and Subunits Reconstitution in Vivo of
Cephalosporin Acylase from Pseudomonas[J].Journal of the Graduate School of the Chinese Academy of Sciences,2003,20(1):117-122. |
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| Authors: | Abstract |
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| Keywords: | |
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