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大豆磷脂酶D的固定化及其催化功能
引用本文:孙红叶,朱梦男,姚改芳,张华,金日生.大豆磷脂酶D的固定化及其催化功能[J].安徽科技学院学报,2024(1):77-87.
作者姓名:孙红叶  朱梦男  姚改芳  张华  金日生
作者单位:合肥工业大学食品与生物工程学院
基金项目:国家自然科学基金面上项目(31970312,32170315);;安徽省科技重大专项(202003a06020011);
摘    要:目的:单因素试验研究大豆磷脂酶D(phospholipase D,PLD)的固定化工艺以及固定化PLD催化合成大豆磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)的最佳工艺。方法:首先通过非极性溶剂辅助St9ber法制备纳米级介孔二氧化硅作为固定化酶的载体,通过吸附-沉淀-交联方式将PLD固定,单因素试验优化固定化条件,并对固定化后的PLD进行结构表征和热稳定性及贮存稳定性研究;然后利用固定化PLD以大豆卵磷脂和L-丝氨酸为底物催化合成PS,并通过单因素试验确定最佳合成工艺;最后对固定化PLD的循环使用性能进行研究。结果:非极性溶剂辅助St9ber法制备的介孔二氧化硅BET比表面积为948 m2/g,气孔体积为1.35 cm3/g,孔径为8.20 nm,平均粒径为335.10 nm,扫描电镜确定载体的形貌为近球形结构;当加入5.00 mL乙醇、1.00 mL酶液(温度为35℃、pH为6.50)、0.40 mL戊二醛时,固定化PLD的相对酶活达到最大值(88.39%±1.00%),蛋白固定化率为80.76%±1.30%;70℃时游离...

关 键 词:大豆磷脂酶D  固定化酶  转磷脂酰化反应  大豆磷脂酰丝氨酸
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