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中国特有濒危裸子植物白豆杉RAPD反应体系的优化
引用本文:欧阳蒲月,苏应娟,易俗.中国特有濒危裸子植物白豆杉RAPD反应体系的优化[J].怀化学院学报,2007,26(2):76-78.
作者姓名:欧阳蒲月  苏应娟  易俗
作者单位:1. 广东化工制药职业技术学院, 广东 广州 510520;中山大学 生命科学学院, 广东 广州 510275
2. 中山大学 生命科学学院, 广东 广州 510275
摘    要:采用改进的CTAB法提取中国特有濒危裸子植物白豆杉(Pseudotaxus chienii)嫩叶总DNA,进行RAPD分析.分别研究了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2 和TaqDNA聚合酶用量对RAPD PCR扩增反应结果的影响.筛选并建立了适合于白豆杉RAPD扩增的反应体系:总体积25μL,其中10×PCR缓冲液(500 mmol/L KCl,100 mmol/L Tris-HCl,1.0%Triton X-100,20 mmol/L MgCl2)2.0μL,引物(1.5μmol/L)0.5μL,dNTPs(10 mmol/L)0.4μL,模板1μL(35 ng),Taq酶0.8μL(0.5 U),水20.3 μL.

关 键 词:白豆杉  RAPD  反应体系  优化
文章编号:1671-9743(2007)02-0076-03
修稿时间:2006-11-10

Optimal Choice for Reaction System in RAPD Analysis of Pseudotaxus Chienii (Taxaceae)
OUYANG Pu-yue,SU Ying-juan,YI Su.Optimal Choice for Reaction System in RAPD Analysis of Pseudotaxus Chienii (Taxaceae)[J].Journal of Huaihua University,2007,26(2):76-78.
Authors:OUYANG Pu-yue  SU Ying-juan  YI Su
Abstract:The DNA templates of Pseudotaxus chienii(Taxaceae)extracted from young leaf were amplified by RAPD.Effects of the content of DNA temlates,primers,dNTP,Mg2+ and Taq DNA polymerase on experimental results were tested and the optimal reaction system of RAPD for Pseudotaxus Chienii(Taxaceae)was determined as follows:35 ng DNA template,2.0 mmol/L Mg2+,0.018 umol/L primer,250 umol/L dNTPs,0.5 u Taq DNA polymerase in total 25 uL reaction volume.
Keywords:Pseudotaxus chienii(Cheng)Cheng  RAPD  reaction system  optimal choice
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