| Myostatin基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 唐量,胡柏平,熊正英,张英起.Myostatin基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达[J].体育科学,2008,28(12). |
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| 作者姓名： | 唐量 胡柏平 熊正英 张英起 |
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| 作者单位： | 1. 陕西师范大学体育学院运动分子生物学实验室,陕西,西安,710062
2. 第四军医大学生物技术中心,陕西西安,710033 |
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| 基金项目： | 陕西省体育局科研课题资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建人Myostatin基因的真核表达载体pVAC-Ms,并在真核细胞中进行表达,为后续研究Myostatin蛋白的检测方法、强力药物的筛选及废用性肌肉萎缩的治疗提供实验依据。方法:化学耦联方法合成Myostatin C-末端区(330bp)基因序列,利用PCR技术扩增5′端和3′端酶切位点为BamH I和EcoR I,然后克隆至真核表达载体pVAC1-cms,得到重组质粒pVAC-Ms。质粒纯化后采用脂质体介导转染CHO细胞,瞬时转染后收集CHO细胞,利用RT-PCR技术和细胞荧光免疫技术检测Myostatin在CHO细胞中的转录和蛋白表达。结果:酶切和测序结果表明,Myostatin真核表达载体pVAC-Ms构建成功,RT-PCR和细胞荧光免疫检测结果表明,瞬时转染的CHO细胞中Myostatin基因明显转录,蛋白明显表达。结论:实验成功构建了在真核细胞中能有效表达人Myostatin重组蛋白的真核表达载体,为运动员Myostatin蛋白表达的检测、强力药物筛选、训练监控及废用性肌肉萎缩治疗等方面的后续研究提供实验基础。
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| 关 键 词： | Myostatin pVAC1-cms CHO细胞 RT-PCR 细胞免疫荧光 |
Construction of Eucaryotic Expression Vector of Myostatin and Expression in CHO Cell |
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| TANG Liang,HU Bo-ping,XIONG Zheng-ying,ZHANG Ying-qi.Construction of Eucaryotic Expression Vector of Myostatin and Expression in CHO Cell[J].China Sport Science,2008,28(12). |
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| Authors: | TANG Liang HU Bo-ping XIONG Zheng-ying ZHANG Ying-qi |
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| Institution: | TANG Liang1,HU Bo-ping1,XIONG Zheng-ying1,ZHANG Ying-qi21.Shaanxi Normal University,Xi'an,710062,China,2.Fourth Military Medical University,Xi'an,710033,China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Myostatin pVAC1-cms CHO cell RT-PCR cell immunofluorescence |
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