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| 幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建 | |
| 引用本文： | 姜云水,方平楚,付亚萍,朱诚.幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建[J].科技通报,2004,20(3):189-193. |
| 作者姓名： | 姜云水 方平楚 付亚萍 朱诚 |
| 作者单位： | 1. 浙江大学医学院病原生物学研究所,杭州,310006 2. 中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室,杭州,310006 3. 浙江大学生命科学学院,杭州,310029 |
| 基金项目： | 浙江省自然科学基金重点项目(ZA0213)，浙江省医药卫生重点科技项目(2001ZD004) |
| 摘 要： | 目的 构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法 采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3′端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBI A1300的表达框架内.结果 PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBI A1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论 成功构建CTB和cagA融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础. |
| 关 键 词： | 生物工程 幽门螺杆菌 cagA基因 CTB基因 水稻Wx启动子 基因融合 植物表达载体 |
| 文章编号： | 1001-7119(2004)03-0189-05 |
| 修稿时间： | 2003年10月12 |
The Cloning of the Fusion Gene of Helicobacter Pylori CagA and CTB and Construction of Its Plant Expression Vector |
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| JIANG Yun-shui,FANG Ping-chu,FU Ya-ping,ZHU Cheng.The Cloning of the Fusion Gene of Helicobacter Pylori CagA and CTB and Construction of Its Plant Expression Vector[J].Bulletin of Science and Technology,2004,20(3):189-193. | |
| Authors: | JIANG Yun-shui FANG Ping-chu FU Ya-ping ZHU Cheng |
| Institution: | JIANG Yun-shui~1,FANG Ping-chu~1,FU Ya-ping~2,ZHU Cheng~3 |
| Abstract: | |
| Keywords: | bio-engineering helicobacter pylori cytotoxin assiociated gene Cholera Toxin B subunit gene Wx promoter of rice gene fusion plant expression vector |
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