| 增强型绿色荧光蛋白在莱茵衣藻中的高效表达 |
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| 引用本文： | 胡章立,王潮岗,吴锦霞.增强型绿色荧光蛋白在莱茵衣藻中的高效表达[J].深圳特区科技,2005(Z1):217-222. |
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| 作者姓名： | 胡章立 王潮岗 吴锦霞 |
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| 作者单位： | 深圳大学生命科学学院 |
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| 摘 要： | 莱茵衣藻素有"光合酵母"之称,是目前少数三套基因组均能进行遗传转化的生物.但由于莱茵衣藻细胞中存在复杂的表达调控体系、密码子偏爱等原因,莱茵衣藻的外源基因表达体系目前还处于探索阶段.通过构建两个莱茵衣藻外源基因表达载体,即以RBCS2序列为启动子的p105和以HSP70A RBCS2序列为启动子的pH105,分别将增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)插入两个表达载体中,得到p105G124和pH105G124转化载体.然后通过"珠磨法"转化细胞壁缺陷的莱茵衣藻cc-849,并得到两种类别的转基因藻Tran-Ⅰ和Tran-Ⅱ.在光诱导和热激诱导条件下,两种类型的转基因藻均能稳定表达绿色荧光蛋白.通过实验比较二者的转化效率和蛋白表达水平,结果显示pH105可使egfp基因的转化效率提高8倍;HSP70A-RBCS2启动子至少使绿色荧光蛋白的表达水平提高了2倍,40℃热激后绿色荧光蛋白的表达量再提高约3倍.以上结果表明获得的pH105是一个高效、可诱导的莱茵衣藻外源基因表达载体,这为利用莱茵衣藻高效表达外源基因和开发生物反应器奠定基础.
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| 关 键 词： | 莱茵衣藻 转基因藻 HSP70A-RBCS2 启动子 egfp基因 |
High-efficient Expression of Enhanced Ereen Fluorescent Protein (eGFP) in Chlamydomonas Reinhardtii |
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| Authors: | Hu Zhangli Wang Chaogang Wu Jinxia |
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