| L-ficolin突变体原核表达载体的构建及表达产物的鉴定 |
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| 引用本文： | 张家忠,李小燕,向田,章晓联.L-ficolin突变体原核表达载体的构建及表达产物的鉴定[J].襄樊职业技术学院学报,2007,6(2):23-26. |
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| 作者姓名： | 张家忠 李小燕 向田 章晓联 |
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| 作者单位： | 1. 襄樊职业技术学院,医学院,湖北,襄樊,441021
2. 武汉大学,免疫系,湖北,武汉,443000 |
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| 摘 要： | 目的构建L-ficolin突变体的原核表达载体，为研究L-ficolin的糖结合位点奠定基础。方法设计L-ficolin突变体基因上、下游引物，分别引入EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点。以插入L—ficolin M2（Val144Phe）和M6（Glu 307Asp）点突变的完整编码区基因的质粒pCDNA3-L-ficolin为模板，通过PCR扩增获得突变体的基因片段，将其克隆入原核表达载体pGEX—KG．然后通过酶切和序列测定对其进行鉴定；将此表达载体转化入表达菌BL21（DE3）pLvSs诱导表达。并采用SDS—PAGE对表达产物进行鉴定。结果经酶切及序列分析表明．成功地构建了重组原核表达载体pGEX-KG—L—ficolin—M2、pGEX-KG-L-ficolin—M6，SDS—PAGE显示目的蛋白大量表达。结论L—ficolin突变体融合蛋白可以在大肠杆菌中大量表达。为研究L-ficolin的糖结合位点打下基础。
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| 关 键 词： | L-ficolin 突变体 载体构建 基因表达 |
| 文章编号： | 1671-914X（2007）02-0023-04 |
| 收稿时间： | 2006-11-09 |
Construction of Prokaryotic Expression Vector L-ficolin Mutant and Identification of Expressed Protein |
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| ZHANG Jia-zhong,LI Xiao-yan,XIANG Tian,ZHANG Xiao-Lian.Construction of Prokaryotic Expression Vector L-ficolin Mutant and Identification of Expressed Protein[J].Journal of Xiangfan Vocational and Technical College,2007,6(2):23-26. |
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| Authors: | ZHANG Jia-zhong LI Xiao-yan XIANG Tian ZHANG Xiao-Lian |
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| Keywords: | L-ficolin mutant vector conclusion Gene expression |
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