| DHA-1型β-内酰胺酶基因克隆及其结构 |
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| 引用本文： | 陆玮新,魏泽庆,俞云松.DHA-1型β-内酰胺酶基因克隆及其结构[J].湖州师范学院学报,2007,29(1):99-103. |
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| 作者姓名： | 陆玮新 魏泽庆 俞云松 |
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| 作者单位： | 1. 湖州师范学院,医学院,浙江,湖州,313000
2. 浙江大学医学院附属第一医院,传染科,浙江,杭州,310003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30270074)，浙江省自然科学基金资助项目(M303812) |
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| 摘 要： | 为了克隆多重耐药肺炎克雷伯菌质粒介导的DHA-1型β-内酰胺酶并探测其序列的结构特征,抽提接合菌的质粒,用限制性内切酶HindIII消化,酶切粘末端用Taq酶补平并在末端加单个的脱氧腺苷(A),与pGEM-TEasy载体进行T-A克隆.在含氨苄西林和头孢西丁的平板上筛选重组菌,抽提重组质粒,酶切分析,克隆片段用步移法测序.通过以上方法,克隆筛选到含5.2kb插入片段的重组质粒pT948,插入片段测序发现其含有一个DHA-1基因和一个ampR基因,依次在DHA-1结构基因的侧翼发现一个插入序列IS26.因此,可以认为成功克隆了质粒介导的DHA-1基因,并在其相邻序列中存在插入序列IS26.
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| 关 键 词： | 克隆 β-内酰胺酶 质粒 插入序列 |
| 文章编号： | 1009-1734(2007)01-0099-05 |
| 修稿时间： | 2006年12月22 |
The Cloning of the DHA-1 Tape β-lactamase's Gene and Its Structure |
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| LU Wei-xin,WEI Ze-qing,YU Yun-song.The Cloning of the DHA-1 Tape β-lactamase''''s Gene and Its Structure[J].Journal of Huzhou Teachers College,2007,29(1):99-103. |
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| Authors: | LU Wei-xin WEI Ze-qing YU Yun-song |
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