| 猪圆环病毒Ⅱ型河南地方株ORF4的克隆及原核表达 |
| |
| 引用本文： | 郑鸣,王老七,边传周,王永芬.猪圆环病毒Ⅱ型河南地方株ORF4的克隆及原核表达[J].河南职业技术师范学院学报,2014(4):52-55. |
| |
| 作者姓名： | 郑鸣 王老七 边传周 王永芬 |
| |
| 作者单位： | 河南牧业经济学院生物工程系,河南郑州450011 |
| |
| 基金项目： | 河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目（2011GGJS-192） |
| |
| 摘 要： | 根据GenBank数据库中猪圆环病毒Ⅱ型的基因组序列设计引物,采用PCR技术从病料基因组DNA中扩增出PCVⅡ河南地方株ORF4基因,全长180 bp,编码59个氨基酸.将该基因克隆至载体pGEX-4T-3中形成pGEX-4T-3-ORF4表达载体.经PCR、酶切和测序鉴定后,转化表达菌株BL21（DE3）诱导表达.SDS-PAGE结果显示：ORF4能够在大肠杆菌中表达,产物的分子量约为32 kD,且以包涵体形式存在.Western Blot检测结果显示,纯化后的ORF4蛋白能够与鼠抗6＆#215;His标签单克隆抗体发生特异性反应,为进一步研究PCVⅡORF4蛋白的特性与功能奠定了基础.
|
| 关 键 词： | 猪圆环病毒Ⅱ型 ORF4基因 原核表达 |
| 本文献已被 维普 等数据库收录！ |
|
