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1.
[目的]建立流式细胞术分析肿瘤细胞内阿霉素分布的方法,并研究低浓度五味子乙素对K562细胞内化阿霉素的影响。[方法]体外培养猪内皮细胞(pEC),以20μmol/L阿霉素处理2、4和6小时;或加入不同浓度阿霉素(0、10、20、40、80和100μmol/L)处理4小时。培养K562细胞,以5μmol/L阿霉素处理2、4和6小时;或加入不同浓度阿霉素(0、2.5、5、10和20μmol/L)处理4小时。采用不同浓度(0、25、50和100μmol/L)五味子乙素(Sch B)与阿霉素联合处理K562细胞4小时。收集细胞,采用流式细胞术分析阿霉素的特异荧光。[结果]固定浓度处理pEC(20μmol/L)和K562(5μmol/L)后检测,发现细胞内荧光强度随时间延长而增加,两种细胞4小时组荧光强度分别达到6小时组的96.93%和95.23%/。在直方图上,阴性和阳性细胞群界限分明。阿霉素(2.5、5和10μmol/L)单独处理细胞的荧光强度分别为26.78±3.34、64.70±6.24和118.35±9.67;添加25μmol/L Sch B实验后荧光强度增加到43.45±4.25、103.74±7.36和146.69±8.32,Sch B显著增加了K562细胞内阿霉素的分布(p<0.05)。[结论]建立的方案可快速测定细胞内的阿霉素分布;低浓度Sch B促进肿瘤细胞内化阿霉素。 相似文献
2.
大黄鱼基因组DNA的提取及其RAPD分析条件的探索 总被引：9，自引：0，他引：9
通过实验筛选出一种快速、简便提取大黄鱼基因组 DNA的方法 .以该法提取的大黄鱼基因组 DNA为模板 ,对大黄鱼 RAPD分析中的 DNA模板浓度、镁离子浓度、d NTPs浓度、引物浓度和 Taq酶浓度进行了研究 ,初步确定了适于大黄鱼 RAPD分析的最佳反应体系 :2 5μL反应体系中 ,含模板 DNA2 5 ng,1 0× PCR缓冲液 2 .5μL,d NTPs1 0 0μmol/L,Mg Cl2 2 .5 mmol/L,引物 0 .2μmol/L,Taq DNA聚合酶 1 .0 μmol/min. 相似文献
3.
枇杷果肉制成丙酮粉,经硫酸铵分级沉淀、透析,DEAE-纤维素柱层析、ACA_(34)柱层析和FPLC分离等方法,分离和纯化得到多酚氧化酶的两个同工酶(酶A和酶B).酶B由一个或几个分子量为42×10~3D的亚基组成.酶的动力学研究表明:酶A、酶B的K_m(多巴胺为底物)均为2.40×10~(-3)mol/L,以邻苯二酚为底物时,酶A和酶B的K_m分别为0.163×10~(-3)mol/L和1.54×10~(-3)mol/L.酶底物特异性表明,酶B是邻位二酚酶,不能作用于单酚和间位二酚. 相似文献
4.
目的建立TFV·DF测定方法。方法:Alltech混合阴离子交换C8100A7μm色谱柱(250×4.6mm),以0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH6.0)-乙腈(65:35)为流动相,流速为1.0mL/min;检测波长为260nm,柱温为室温。结果TFV.DF质量浓度在1.0～50.0μg/ml范围内与峰面积线性关系良好。RSD为0.43%。结论:HPLC法灵敏、简便、准确、重现性好,能满足质量控制要求。 相似文献
5.
生物转化体系中β-丙氨酸含量测定方法建立与优化 总被引：3，自引：0，他引：3
建立了高效液相色谱法直接测定生物催化产物中β-丙氨酸含量的新方法。转化产物经过衍生试剂2,4-二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生后进行液相色谱分析,色谱柱为Zorbax SB C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相分别为0.02mol/LNaAc-HAc缓冲液(A,pH6.2)和流乙腈(B);线性梯度洗脱色谱柱,流动相B浓度(体积百分含量)0→25min内由5%升高至40%;洗脱液流速为1.0mL/min;检测波长为360nm,参比波长为600nm;样品进样量为20μL。 相似文献
6.
目的:探讨不同浓度ALA对NaCl胁迫下酸枣种子发芽过程中ASA-GSH循环的影响。方法:以酸枣种子为试验材料,以清水处理为对照,不同浓度ALA浸种24h后在50mmol/L NaCl胁迫下,研究ALA对酸枣种子胚芽和胚根中的ASA、DHA、GSSG、GSH、APX、GR含量。结果:盐胁迫下,ALA浸种可使酸枣子叶和胚根中ASA、DHA、GSH、GSSG的含量较50mmol/L NaCl处理增加。结论:在50mmol/L NaCl胁迫下酸枣叶片和胚根中ASA-GSH循环系统受到损害,ALA浸种具有良好的缓解效应。 相似文献
7.
建立了人体血浆多相模型,研究了人体血浆体系中Tb(Ⅲ)物种的分布.结果表明,Tb(Ⅲ)的物种形式随着Tb(Ⅲ)的量浓度的变化而变化.当Tb(Ⅲ)的量浓度低于4.000×10-8mol/L时,大部分Tb(Ⅲ)物种以可溶态存在;当Tb(Ⅲ)的量浓度高于4.000×10-8mol/L而低于1.667×10-2mol/L时,沉淀物种(TbPO4和Tb2(CO3)3)成为Tb(Ⅲ)的主要物种.可溶的Tb(Ⅲ)在量浓度低于1.0×10-4mol/L时,主要与运铁蛋白键合,分布于[Tb(Tf)]中;当Tb(Ⅲ)的量浓度高于1.0×10-4mol/L时,运铁蛋白耗尽,可溶的Tb(Ⅲ)主要分布于[Tb(HSA)],[Tb2(Tf)],[Tb(Ox)]和[Tb(Cit)]等物种中. 相似文献
8.
建立了同时测定氧化槐果碱、槐定碱和苦参碱的HPLC(高效液相色谱)方法.用VP-ODS(维普C18柱)150mm×4.6 mm,5 μm色谱柱,柱温40℃,流动相为0.01mol/L pH 8.5 磷酸盐缓冲溶液-甲醇(40:60),流速1.0 mL/min,紫外检测器波长215 nm.结果表明,3种生物碱在确定的色谱条件下得到很好的分离,且在所选质量浓度范围20~200 mg/L内线性关系良好,回收率范围97.2%~102%. 相似文献
9.
《黑龙江科技信息》2015,(23)
目的:建立HPLC法测定参茸王浆口服液中10-羟基-2-癸烯酸的含量方法。方法:采用C18柱(250×4.6mm,5μm)色谱柱;甲醇-0.03mol/L盐酸溶液-水(55:10:35)为流动相;流速1.0m L·min-1;柱温30℃;检测波长210nm。结果:该方法 10-羟基-2-癸烯酸在50.05μg·m L-1~1000.99μg·m L-1浓度范围内具有良好的线性关系,R=0.99992;平均回收率分别为99.81%,RSD(%)=0.28%。结论:该方法专属性强,重复性好,可用于参茸王浆口服液中10-羟基-2-癸烯酸的含量测定及其质量控制。 相似文献
10.
11.
《中国科技信息》2016,(22)
正建立了高效液相色谱法(HPLC)测定再造烟叶中柠檬黄含量的分析方法。采用ZORBAX SB-C18(5μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱分离,以甲醇及20mmol/L乙酸铵水溶液为流动相梯度洗脱,测定波长为426 nm,外标法定量,在0.5~200μg/m L范围内,柠檬黄的峰面积与其质量浓度间呈良好的线性关系,相关系数(r2)为0.9998,检出限为0.086μg/m L,定量限为0.26μg/m L,在1、50、200μg/m L添加水平下的加标回收率为96.7%~99.2%,相对标准偏差RSD值小于5%。试验结果表明,该方法操作简单易行、精密度高、回收率和重现性好。 相似文献
12.
双向电泳分离在髋关节运动损伤中的治疗分析 总被引：1，自引：0，他引：1
目的:研究富血小板双向电泳分离在髋关节运动损伤中的治疗分析,提高诊疗效果。方法:考察患者的富血小板的颗粒的粒径(130 nm和290 nm),分析富血小板的HA分子量(1.1×104 g/mol和3.0×105 g/mol)以及PNIPAm聚合量对患者的髋关节Haversian腺增生和滑膜炎及腱端炎的治疗效果。对富血小板的PNIPAm分子内及分子间疏水相互作用加强,形成疏水层,合成有机-无机杂化颗粒,设计合成结构可控、性能可调的微凝胶。结果:其中31例骨骼肌升高(110~1131μmol/L);10例骨骼支撑力升高。对患者进行心肌酶谱测试:其中5例CK(92~125 umol/L)、CK-MB(61~312 umol/L),骨骼淀粉酶:2例升高(125~3165 umol/L),骨骼反应时间:1例PT15 s。壳聚糖微球粒径分别为:2.1、7.2、12.5μm,这些因素都促进了骨骼的生长和修复,这些因素对释放(1-β-4)D-葡糖醛酸和(1-β-3)-N-乙酰基-D-氨基葡糖双糖单元有利。该治疗方案治疗效果较好,患者得到康复。结论:采用双向电泳分析,生成患者的富血小板血浆制备其他亲水性微球,提高患者体内的富血小板再生能力,对治疗患者的髋关节运动损伤效果显著。 相似文献
13.
目的:建立氧氟沙星滴眼液的含量测定方法。方法:采用紫外-可见分光光度法。以盐酸溶液(0.1mol/L)为溶剂,检测波长是293nm。结果 :回归方程为A=0.0839845C+0.0033208(r=0.9998),氧氟沙星在3.0~9.0μg/m L浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.28%,RSD为0.68%。结论 :该方法简便快速、重现性好、结果准确可靠、操作简单方便,可作为快速测定氧氟沙星滴眼液含量的方法 。 相似文献
14.
目的:建立凝胶色谱法测定头孢哇林钠的聚合物的方法.方法:采用葡聚糖凝胶Sephadex G-10柱(16mm×33cm),流动相:A:0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0),B:0.01%十二烷基硫酸钠溶液.流速为1.0mol/min;检测波长为254nm,进样量为200uL.结果:头孢唑林钠在6.696～29.54mg/mL范围内,浓度与聚合物的峰面积呈良好线性关系(r=0.9986),可精确对高分子杂质峰进行定量.结论:该方法简便,准确,重现性好. 相似文献
15.
采用Trivelli等报道的Bio-Rex70阳离子交换树脂微柱层析法和Roger等报道的果糖胺法(两法均作了适当修改),分别对73例糖尿病患者及61例正常人进行了HbA_(1c)、HbA_1及糖基化血浆蛋白(Gpp)的测定.结果显示患者与正常人之间HbA_(1c)、HbA_1、Gpp均值有非常显著性差别.患者空腹血糖均值与HbA_(1c)、HbA_1、Gpp均值之间均有极显著的相关性.患者HbA_(1c)与HbA_1之间相关系数有极显著意义.证明HbA_(1c)、HbA_1与Gpp均可作为糖尿病控制较准确的客观指标.作者在提高微柱法分离度的关键问题上作了改进,找出了恰当的洗脱液Ⅰ与Ⅱ的Na~+浓度,分别为0.020mol/L与0.070mol/L.分离HbA_(1a+b)与HbA_(1c)结果尚称满意,柱间CV分别为3.1％与2.2％.在降低洗脱液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中剧毒物质氰化钾的浓度问题上也作了研究,找出了较文献报道低2.5倍的氰化钾浓度,即由0.010mol/L降低到0.004mol/L.在果糖胺法中,采用5min与15min两次比色,用10％冰醋酸终止反应,提高了此法的精密度与重复性,批内CV为2.3％,批间CV为2.7％. 相似文献
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HPLC法测定Vc银翘片中Vc含量的方法 总被引：5，自引：0，他引：5
通过对Vc银翘片中Vc含量测定方法的研究,建立一种新型的HPLC测定方法.采用甲醇 醋酸铵(0.02mol/L) 醋酸(体积比67∶33∶1)为流动相,甲醇-醋酸钠(0.02mol/L) 醋酸(体积比70∶29∶1)的混合溶液溶解样品,KrosmasilC18(4.6mm×250mm,5μm)柱分离,249nm检测.该方法测定结果稳定,重现性好,可操作性强,明显提高了Vc的回收率,同时能将样品中的Vc及相关组分成功分离,有利于准确测定Vc的含量,与现行的滴定法相比,有很多优势. 相似文献
18.
本文采用高校液相测定了醋酸地塞米松片中醋酸地塞米松的含量,固定相为:安捷伦Cl8(4.6mm×250mm,5um),甲醇-四氢呋喃-0.075mol/L醋酸钠缓冲液(pH4.5)(30:10:60)为流动相,检测波长为240nm,流速1.0ml.min-1,柱温:30℃。醋酸地塞米松在2~30μg.ml-1范围内呈良好的线性关系。醋酸地塞米松的平均回收率为99.3%,RSD为0.82%(n=6);此方法简便、准确、重现性好,可用于醋酸地塞米松片中醋酸地塞米松的含量测定。 相似文献
19.
《黑龙江科技信息》2017,(19)
目的:建立葡萄糖酸亚铁口服溶液中5-羟甲基糠醛的含量测定方法。方法:高效液相色谱法,采用C18(250×4.6mm,5μm)色谱柱;以0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节p H值至4.5)-甲醇(60:40)为流动相;流速1.0m L·min-1;检测波长284nm。结果:在1.0191μg·m L-1~40.7630μg·m L-1浓度范围内5-羟甲基糠醛的峰面积和浓度具有良好的线性关系,R=1.00000;平均回收率为100.56%,RSD=0.79%(n=9)。结论:本方法准确、可靠、重复性好,适用于葡萄糖酸亚铁口服溶液的5-羟甲基糠醛的含量控制。 相似文献
20.
将乙烯拮抗剂硫代硫酸银络合物[Ag(S_2O_2)_2~(3-),Silver thiosulphate complex,STS]直接加到培养基中,以探讨STS在培养基中的稳定性及其对瓠瓜(Lagenaria siceraria Standl.var.hispidaHara)性别分化的效应.结果表明:STS在MS培养基中对光照(2400 lx)和高温(121℃,11.8×10~4Pa,15min的高压灭菌)的稳定性与其本身的浓度及其AgNO_3同Na_2S_2O_3的摩尔比有关.在光照条件下,较高浓度的STS(100～1000μmol/L)相对分解率较低(4.5％～7.0％).在高压灭菌条件下,以浓度较高的、AgNO_3同Na_2S_2O_3的摩尔比较低的STS较为相对稳定.在离体条件下,STS能有效地诱导瓠瓜的潜在雌花芽发育成为雄花.经高压灭菌后,STS仍然具有这种诱雄作用,但其作用强度则大大降低. 相似文献