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“深圳赛百诺是中国生物制药产业突破的特例，”深圳科兴生物副总经理何询说。在中国生物制药产业与美欧差距扩大的情况下，2004年10月深圳赛百诺“重组人p53腺病毒注射液”基因治疗药物生产基地开工建设。 相似文献
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2003年10月，又名“今又生”的重组人P53腺病毒注射液，成为世界上第一个获得正式批准的基因治疗药物、人们不禁要问：P53是一种怎样的基因?基因治疗，究竟离我们有多远? 相似文献
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厌氧真菌能够产生高比活力的纤维素酶,但由于对厌氧环境的生产条件要求严格,生长速度缓慢,并不适合规模生产。本研究将厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶基因af1与大肠杆菌表达载体pET-28a(+)连接,得到重组质粒pET-28a(+)-af1。以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,重组质粒转化后获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-af1。采用SDS-PAGE蛋白电泳对重组大肠杆菌的表达产物进行分析,在40 kDa附近得到与目的基因af1表达蛋白理论值相当的明显条带。AF1酶蛋白的最适pH为6.0,最适温度为45°C。重组大肠杆菌的摇瓶产酶试验结果显示:诱导培养18 h时,内切型-β-葡聚糖酶(CMC酶)活力可达410 U/mL。该项研究工作为进一步构建内切型-β-葡聚糖酶高产菌株奠定了良好的基础。 相似文献
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目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础.方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平.结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达. 相似文献
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《中国科技信息》2012,(24):29-32
肝胚瘤细胞株HepG2中HBx蛋白对SOCS3表达的影响及其机制The influence of Hepatitis B Virus X Protein on the expressionof SOCS3 protein and its mechanisms in HepG2 cells管世鹤[1]潘颖[1]杨凯[1]吴圆圆[1]杨东亮[2]目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein,HBx)对肝胚瘤细胞株HepG2表达信号抑制因子3(SOCS3)的影响及其机制.方法将表达HBx蛋白的重组质粒FL1-145HBx转染HepG2细胞,以不同浓度的SRC抑制剂PP2处理转染细胞,运用Westem blot和RT- 相似文献
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《科学中国人》2015,(26)
目的构建SLO原核表达质粒,重组蛋白的诱导表达并纯化。方法提取链霉菌溶血素O模板DNA,PCR法扩增slo基因。构建融合表达重组质粒p GEX-6p-1-slo和pet32a-tev-slo,将正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21和大肠杆菌BL21-DE3,使用异丙基硫代βD半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组融合蛋白。采用亲和层析纯化重组蛋白,切除标签后,再通过亲和层析纯化,获取SLO重组蛋白。结果 PCR扩增出slo基因,基因片段(1700 bp)与理论一致。经SDSPAGE,蛋白质印迹显示重组蛋白相对分子质量为55 k Da,与数据库中的相对分子质量结果相符。结论成功构建了slo原核表达质粒,表达并纯化了SLO重组蛋白。 相似文献
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应用犬肾传代细菌,通过人“Ｏ”型红细胞吸附和氯仿处理等方法,从美国犬四联弱毒疫苗中分离出一株腺病毒,经形态,理化及生物学特性等系统鉴定证明：该毒株是犬Ⅱ型腺病毒,命为为ＣＡＶ２－ＸＮ３株。 相似文献
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目的:扩增弓形虫SAG2基因,构建pGEX-4T-1-SAG2重组质粒,在大肠杆菌中表达。方法:设计并合成引物,经PCR法扩增SAG2基因序列,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-SAG2质粒,经酶切鉴定、测序,与pGEX-4T-1载体连接,构建pGEX-4T-1-SAG2质粒。将重组质粒转入大肠杆菌诱导表达,进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果:扩增出约561bp的SAG2基因序列,成功构建pGEX-4T-1-SAG2质粒,并在大肠杆菌中得到高效表达,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%。SDS-PAGE电泳显示pGEX-4T-1-SAG2的融合蛋白的分子量约为45kd。Western-blot显示融合蛋白有良好的抗原性。结论表达质粒在大肠杆菌中得到高效表达,为进一步研究弓形虫病的诊断做好准备。 相似文献
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图书情报工作中的信息重组 总被引：2，自引：1，他引：1
本文论述了图书情报工作中信息重组的必要性、重组类型以及影响因素。认为信息重组是图书情报系统的一种潜在功能。知识、信息的表达和转换就是对已有知识的重组,信息的重组。 相似文献
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流程重组的多维性:中国企业变革的特点 总被引：2，自引：0，他引：2
“流程重组”作为一种激进地改变企业、提高企业竞争力的方式得到社会的广泛关注。但是,从实施的效果以及人们对哈默思想的理解看,与哈默等的设想有较大的距离。流程重组这一出自美国的概念在与中国的企业管理实践相结合时有较多的不尽人意之处,根据我们对江苏省近十家企业和企业集团重组实践的考察,企业的变革与重组在中国企业中具有并不局限于“流程”的丰富内涵,将流程重组概念发展为包含制度、信息、知识等内容的多维重组过程将更能反映中国企业变革的特点。 相似文献
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应用犬肾传代细胞 (MDCK) ,通过人“O”型红细胞吸附和氯仿处理等方法 ,从美国犬四联弱毒疫苗中分离出一株腺病毒 ,经形态、理化及生物学特性等系统鉴定证明 :该毒株是犬Ⅱ型腺病毒 ,命名为CAV2 XN3 株。实验将该病毒复制成弱毒疫苗 ,免疫 8只 2月龄当地幼犬 ,经临床观察证明 ,试验犬未出现不良反应 ;免疫后 14天采血测定血清中和抗体效价达到 1∶12 8,免疫后 2 5天血清中和抗体效价达到 1∶2 5 6 ,免疫后 10个月降至 1∶32 ,但仍能耐受强毒攻击 ,而对照组 4只犬则发病死亡。表明该弱毒疫苗激发免疫快 ,免疫期长 ,安全有效。 相似文献
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使用X-treme GENE HP DNA和Ex Gen 500转染试剂分别转染经绿色荧光蛋白标记的重组质粒至人肝癌SMMC-7721细胞,培养48h后,通过计算发现随着转染试剂的增加,转染效率和细胞毒性都逐渐增加,X-treme GENE HP的转染效率高于Ex Gen500(P0.05);X-treme GENE HP的细胞毒性低于Ex Gen 500(P0.05);血清和抗生素对转染效率影响无显著性差异(P0.05)。X-treme GENE HP对SMMC-7721细胞有较高的转染效率和较小的细胞毒性,转染时使用正常培养基培养。 相似文献
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