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采用液氮研磨法、反复冻融法、反复冻融-溶菌酶法、溶菌酶法、超声波法、超声波-溶菌酶法对节旋藻TJCU-7的藻细胞进行破碎,用改进的CTAB法提取基因组DNA,通过凝胶电泳检测,核酸浓度、纯度测定及PCR扩增效果来评价各破壁方法的优劣。结果发现,6种方法对节旋藻均有较好的破壁效果:经反复冻融法、溶菌酶法及反复冻融-溶菌酶法破壁后所获得的DNA浓度(2 000 ng/μL)显著高于其他方法,其中液氮研磨法所得的DNA浓度最低(40 ng/μL)。除超声波法所得DNA的OD260/OD280值大于2.00,说明有部分RNA污染外,其余方法所得DNA的OD260/OD280的值均在1.90~2.05,纯度较高。经PCR扩增后均得到了2 kb的目的片段,可以满足基本的生物学实验要求。综合考虑,反复冻融法,溶菌酶法简单、快速,破壁效果好,是节旋藻DNA提取时的优先考虑方法。 相似文献
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利用CTAB法提取蝴蝶兰的基因组DNA 总被引：1，自引：0，他引：1
利用CTAB法对蝴蝶兰的根、叶、花等不同部位进行基因组DNA的提取，然后分别用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的质量，结果表明，3个部位都可以获得较完整的基因组DNA，电泳条带清晰，无拖尾现象．其中根部提取的DNA纯度最高，OD260／OD280为1．6545；其次为叶，OD260／OD280为1．5351；花的DNA纯度最低，仅为1．3820． 相似文献
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采用高盐低pH法、改良SDS法、CTAB法、改良CTAB法提取发根农杆菌ATCC11325感染蓼科多年生药用植物虎杖（Polygonum cuspidatum Sieb．et Zucc．）叶片产生毛状根的基因组DNA,并进行了电泳分析、含量检测及特异PCR扩增．结果表明：改良CTAB法解决了虎杖富合多酚、多糖等类物质难以提取高质量DNA的问题,提取的DNA质量较好,纯度较高,能满足进一步的实验要求． 相似文献
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采用改良的SDS法提取黄瓜种子基因组DNA,并以其为模板对影响RAPD扩增反应的主要因子采用单因素递进分析方法进行优化,建立了黄瓜种子基因组DNA最佳RAPD反应体系,即20 μl的反应体积中含有60ng模板,1.2U Taq DNA聚合酶,3.0 mmol/L MgCl2,0.20 mmol/L dNTP,1.40 μmol/L引物. 相似文献
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以三色堇叶片为材料,分别采用SDS方法和植物基因组DNA提取试剂盒法对三色堇叶片DNA进行提取,采用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的质量浓度和质量.结果表明:采用SDS方法提取的DNA质量浓度高,但纯度低,耗时长;试剂盒法获得的DNA纯度高,且该方法操作方便,耗时短,但费用较高.PCR扩增结果显示两种方法所提取的DNA均能满足基因扩增和分子标记检测的需要. 相似文献
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SDS、CTAB和PVP法提取香蕉基因组DNA的比较研究 总被引：4，自引：0，他引：4
文章报道了采用SDS法、CTAB法和PVP法提取的香蕉基因组DNA片段大小比较一致，都可直接用于RAPD分析，SDS法提取的DNA纯度较高，吸芽基因组DNA提取率略高于微叶，对相同clone不同单株间基因组DNA的RAPD分析结果并不表现出明显的多态性。 相似文献
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几种苎麻园土壤微生物总DNA提取方法比较 总被引：1，自引：0，他引：1
实验设计对比了苎麻园土壤微生物总DNA6种提取方法。方法Ⅰ采用裂解酶、蛋白酶K、SDS与CTAB处理;方法Ⅱ结合利用CTAB、SDS、LDS和BME;方法Ⅲ综合采用玻璃珠、CTAB和SDS法;方法IV结合利用SDS-GITC-PEG;方法V利用尿素、SDS、LDS和BME综合处理;方法VI则利用试剂盒处理土壤。6种方法都可以提取到23kb左右的DNA片段,经过TENP和PVPP方法预处理的土壤样品,能有效去除腐殖酸等污染物,且提取得到的土壤总DNA完整性好、纯度高,不需要纯化就可用于PCR扩增。但不同方法取得的DNA的片段长度、产量和纯度存在明显差异。通过比较,改进并建立了可用于宏基因组构建的高纯度、大片段DNA的方法。 相似文献
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文章初步探讨了用不同DNA提取方法,对盐土中微生物总DNA的提取效果.实验结果表明,由于盐土中微生物数量较少,溶菌酶-SDS-冻融裂解法、溶菌酶-SDS-蛋白酶K-冻融裂解法均无法提取到盐土中微生物的总DNA;变性剂-SDS-高盐法和试剂盒提取法能获得DNA,但效果不佳;只有用变性剂-SDS-高盐修改法能快速、有效地提取盐土中微生物的基因组DNA. 相似文献
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通过两种从大肠杆菌中提取重组质粒pRSETDNA不同方法的比较,寻找提取重组质粒pRSET DNA的切实可行的方法.将含有目的质粒的菌株分别采用SDS碱裂解法和煮沸法进行质粒DNA小量提取,采用DU800核酸蛋白分析仪测定质粒DNA的产量及纯度.结果SDS碱裂解法获得质粒DNA产量为5.61 μg/ml菌液,A260/280=1.95;煮沸法获得质粒DNA产量为4.36μg/ml菌液,A260/280=1.78.与煮沸法相比,SDS碱裂解法获得质粒产量更多,纯度更高,更适合分子生物学常规实验的要求. 相似文献
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韩颖 《内江师范学院学报》2008,23(2):51-54
采用改进的CTAB法,成功地提取了北野豌豆及其近缘种的基因组DNA,电泳结果显示DNA质量和产量均较高,并以此DNA为模板,对ISSR的反应条件进行了优化,最终确定ISSR的反应体系为：总体积10μl,包括10ng的DNA,1倍的反应缓冲液,1．5mmol·L^-1MgCl2,2×10^-4mmol·L^-1（引物6和引物8）或2×10^-3mmol·L^-1（引物5,10和12）引物,0．2mmol·L^-1dNTP混合物和1．0U的Taq DNA聚合酶．ISSR扩增程序为：先在94℃下变性3min,然后在92℃下变性30s,50℃（引物5,6,10,12）或55．2℃（引物8）下复性30s,72℃下延伸1min,反应30个循环,最后72℃延伸5min．并基于此反应条件,最终筛选出5条ISSR引物用于进一步的研究． 相似文献
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建立反相高效液相色谱法测定阿立哌唑血药质量浓度的方法,并研究其临床疗效及副作用的关系．采用Herpesil ODS C18柱（250rnm×4．0mm,5μm）,流动相为V（甲醇）：P（水）=85：15,流速1．0mL／min,检测波长254nm,测定阿立哌唑的线性范同为25～800ng／mL,r=0．99147,平均加样回收率97．66％．用PANSS量表和TESS量表评定药物疗效和副反应,阿立哌唑的血药质量浓度与临床疗效呈显著性相关,与副作用无相关性． 相似文献
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探索腐植酸钾浸种对提高作物生长的抗盐性及其在作物生长化学调控中的作用。采用不同浓度（0、300、400、500／xg／mL）的腐植酸钾浸种玉米,研究了在100mmol／LNaCl的盐胁迫环境下,三叶期玉米幼苗叶保护酶活性及丙二醛含量的变化。与对照相比,浸种玉米的超氧化物歧化酶活性增高,但无显著差异;浸种玉米的过氧化物酶活性增高,在4013·雌／mL时达极显著水平,在500μg／mL时达显著水平;浸种玉米的过氧化氢酶活性增高,在300、400μg/mL时分别达显著水平,在500μg／mL时达极显著水平;浸种玉米的丙二醛含量降低,在300—500μg／mL范围内达显著水平。腐植酸钾浸种玉米,可减轻玉米在盐胁迫下的膜脂过氧化程度,提高玉米抗盐性。 相似文献
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目的 研究贮藏期内不同温度下菠菜上的微生物生长趋势.方法 将用保鲜膜封装好的菠菜分别置于3℃、15℃、25℃、35℃四个温度下贮藏,定期对菌落总数进行测定.首先,使用修正的Compertz方程建立不同温度下微生物生长的初级模型,其次,结合Belehradek方程讨论微生物的μmax（最大比生长速率）和λ（延滞时间）与温度的关系,并建立微生物生长的二级模型和货架期模型.结果 研究认为,修正的Compertz方程能够较好地拟合不同温度下菠菜微生物生长的一级模型,R2均大于0.90;微生物的Nmax随着温度的变化波动不大,平均值为（9.4704±1.1472）lg（CFU/g）;μmax随着温度的上升而变大,λ随温度的增加而减小,二级模型为√μmax=0.0215×[T-（-26.5286）]、√1/λ=0.0226 × [T-（-34.0620）],R2分别为0.9967、0.9461.结论 建立了具有较高的拟合度的微生物生长的初级模型、二级模型,也确立了菠菜的微生物货架期模型. 相似文献
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对戴云山600 m常绿阔叶林（EBF）、1000 m针叶林（CF）、1400 m亚高山矮林（SDF）、1800 m高山草甸（AM）4种不同海拔森林类型土壤理化性质与酶活性进行研究。结果表明：4个不同海拔森林类型土壤理化性质和酶活性存在明显差异,5种土壤酶活性在不同海拔森林类型土壤剖面中均呈现自上而下递减的规律,磷酸单酯酶活性在4个不同森林类型间均呈显著差异;蔗糖酶、脲酶、过氧化酶活性在EBF、CF间呈显著差异,相关性分析可知,5种土壤酶与TN、HN、TP、AK、OM呈极显著或显著正相关,与土壤pH值呈极显著负相关,表明土壤酶活性在不同海拔森林类型土壤养分变化中发挥着重要作用。研究揭示了土壤酶活性与土壤理化性质在不同海拔森林类型之间的差异及其空间分布特点,分析了土壤酶与土壤理化性质的关系,为了解森林土壤肥力总体状况提供理论依据。 相似文献
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根的溢泌物与根际微生物关系的研究 总被引：7，自引：0，他引：7
焦海华 《洛阳师范学院学报》2003,22(2):88-90
从山西长治不同区域分布的松树、柏树、苹果树的根际及耕种 2 0年以上的耕地里 ,在不同的季节、不同深度采集土壤样品 .采用稀释混合平板法分离培养和活菌计数 ,研究了根际微生物种群与植物根溢泌活动之间的相互关系 .松树、柏树根际微生物种类和数量 ,在不同季节、不同土壤深度差别不显著 .苹果树根际、耕地土壤中微生物无论从种类和数量上 ,均与季节变化、土壤深度有相关性 相似文献
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黄土高原丘陵沟壑区露天煤矿复垦地生态修复的水土保持效应研究 总被引：2，自引：0，他引：2
采用美国通用水土流失方程（USLE）对研究区各个生态修复模式的土壤水力侵蚀情况进行分析,即应用USLE方程对不同土地利用类型的现实侵蚀量和潜在侵蚀量分别进行估算。研究表明,研究区不同生态修复模式下土壤保持功能为乔灌混交林（11731．364t／km^2．a）〉人工牧草（11641．637t／km^2．a）〉灌木（11331．044t／km^2．a）〉林地（11296．534t／km^2．a）〉荒草地（9709．049t／km^2．a）;进一步运用SPSS对研究区土壤侵蚀模数与植被覆盖度非线性模型进行预测,研究区土壤侵蚀模数与植被覆盖度之间的方程式为：Y=5773．04—1262．4Lnx。 相似文献
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本文分析了近年来不同版本中学教材中“铁生锈”课堂演示实验,并比较了改进实验,主要对电解质溶液种类、电解质溶液浓度、温度、介质环境进行了深入探究,缩短了演示实验反应的时间,提高了实验效果的重现性,并贯穿了中学化学教学中的其他相关知识点. 相似文献
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