MPG1基因驱动GFP基因在大丽轮枝菌中表达     

张斯  柳燕  徐婷婷  吕乐  竺锡武  陈集双 《科技通报》2015,(5)

为了探讨以MPG1基因作为启动子能否驱动GFP基因在大丽轮枝菌中表达,采用根癌农杆菌介导的真菌遗传转化方法,将含有MPG1-eGFP表达盒的pHMG载体转化入棉花大丽轮枝菌T-9中。经抗生素筛选后转化子约80个/106孢子,荧光显微镜观察转化子菌株孢子和菌丝在荧光显微镜下均发出绿色荧光,基因组DNA-PCR检测、GFP蛋白westernblot检测表明,GFP蛋白在大丽轮枝菌转化子中成功表达。结果表明,MPG1基因作为启动子成功驱动GFP基因在大丽轮枝菌中转录表达。  相似文献   

大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNALeu的相互作用头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组     

李勇  王恩多 《中国科学院研究生院学报》2003,20(1)

第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1 和tRNALeu2 ,研究tRNA与亮氨酰 tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高 1 0倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入 40个氨基酸残基的变种LeuRS A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1 和tRNA Leu2 接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS A识别的关键.　　第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因 1 0倍以上.研究了它的α 亚基的N 端变化(LAEP →MGIP )对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N 端亲和水解的酰化酶  相似文献   

大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNA^Leu的相互作用头孢菌素酰化酶的表达、翻译后加工和亚基重组     

李勇  王恩多 《中国科学院研究生院学报》2003,20(1):117-122

第一部分为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1和tRNALeu2接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶.  相似文献   

GUS基因和NPTⅡ基因表达的相关性及其在转基因棉花检测研究中的应用     

《中国科技信息》2009,(10)

利用农杆菌介导转化法,将含有35s启动子驱动NPTⅡ基因和Gus基因以及棉纤维特异表达启动子E6驱动目的基因FB的植物表达载体转入到常规棉花R15中．重点分析了Gus基因和NPTⅡ基因在愈伤诱导阶段．T0代及T1代转基因棉花中的表达情况综合两个基因的表达来进行转基因棉花的阳性鉴定．可以为转基因棉花后代的纯合选育提供双重保障7个转基因株系选育到T3代共获得株行51个．卡那霉素检测多数株行阳性率在90％以上．其中21个株行阳性率达100％.  相似文献   

医学     

《科学中国人》2015,(31)

<正>急性髓系白血病中频繁发生间充质转录因子基因FOXC1的脱抑制化经由电脑模拟计算和其他分析,研究者发现FOXC1基因在至少20%的急性髓系白血病(Acute Myeloid Leukemia.AML)病人中表达.而不出现在正常人的造血系统中。并且在AML中.FOXC1的表达几乎都伴随着H0XA/B基因基因座的表达。功能性实验表明,FOXC1能抑制单核细胞/巨噬细胞的分化并促进细胞克隆形成能力。在体内实验中,FOXC1与HOXA9一起能显著加速白血病症状。在小鼠白血病中鉴定出的FOXC1基因表达集合同时也在人类AML中高表达,  相似文献   

高盐低温胁迫下水稻转录因子基因表达谱分析     

朱素琴  季本华  陈名蔚  陈艳红  周蓉  梁建生 《科技通报》2010,26(6)

为探索水稻响应高盐低温逆境胁迫的分子调控机制,采用Affymetrix水稻表达谱芯片,分析研究了高盐低温胁迫下水稻转录因子基因的表达谱.检测到491个差异表达的水稻转录因子基因,属于56个转录因子家族.其中17个转录因子基因,高盐低温处理后表达均显著上调,4个转录因子基因,高盐低温下表达均显著下调,9个转录因子基因经高盐、低温处理后表达水平向相反方向变化.进一步采用实时荧光定量PCR,验证了6个转录因子基因在高盐低温胁迫条件下的差异表达变化,其结果和芯片杂交结果基本一致.  相似文献   

家蚕丝素基因研究进展     

陈华  朱良均  闵思佳 《科技通报》2003,19(3):260-263

3种丝素基因的全序列已被测定，其中重链基因的中心区域由12个具有多态性的重复区和11个保守性较强的无定形区组成．丝素基因的表达主要在转录水平受到调控，已分离到了9种反式作用因子．丝素基因存在4种变异系统：Nd、Nd(2)、Nd-s和Nd-s^D，Nd和Nd(2)能抑制重链基因的转录，Nd-s和Nd-s^D为轻链基因的等位基因．利用同源重组技术,GFP等外源基因已被插入到家蚕重、轻链基因中．  相似文献   

真核基因转录抑制调控机理及进展     

许守明  洪宪珍  王得利 《中国科技信息》2007,36(12):181-181,189

转录调控是分子生物学领域的研究热点。转录因子一般通过激活或者抑制启动子来调控基因的表达;转录抑制因子通过与特异蛋白因子或染色体部位结合来阻碍基因的活化,对转录进行负调控;而核心组蛋白的乙酰化/去乙酰化过程是调控基因活性的一个关键步骤,它在真核生物的基因转录调控中起到了很重要的作用。  相似文献   

氨基酰-tRNA合成酶及其与相关tRNA的相互作用研究   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

王恩多 《中国科学院院刊》2001,16(5):349-352

氨基酰tRNA合成酶是生物体蛋白质合成过程中的一类关键酶 ,对它的研究具有重要的生物学意义和应用前景。该项目系统研究了大肠杆菌亮氨酰 和精氨酰 tRNA合成酶及其与相关tR NA的相互作用。用酶和tRNA的基因克隆和高表达 ,tRNA体外转录 ,基因定点突变 ,酶片段的体外重组等手段研究了酶与tRNA的相互作用的结构基础 ,得到一系列重要结果。  相似文献   

人类疾病的基因治疗   总被引：1，自引：0，他引：1  

范慕贞 《百科知识》1994,(8):58-59

基因是细胞内遗传物质的功能单位。脱氧核酸(DNA)是基因的物质基础。DNA分子上排列着各种不同基因,构成人体基因组。它携带着细胞内的所有蛋白质的遗传信息,编码支配细胞生长、分化的一切指令。因此,在生命过程中它起着主宰的作用。遗传信息按分子生物学的中心法则传递和表达。即DNA的脱氧核苷酸序列忠实地被拷贝成相应的核苷酸序列信使RNA(mRNA)。这个过程叫做基因转录。然后,再以mRNA为模板翻译成具有相应氨基酸序列的蛋白质,此过程叫做基因翻译。上述转录和翻译过程就是所谓的基因表达。基因表达受多种因素调控,只有在适当的时间和部位表达适当量的蛋白质才能发挥其正常功能作用,  相似文献