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Myostatin基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
目的:构建人Myostatin基因的真核表达载体pVAC-Ms,并在真核细胞中进行表达,为后续研究Myostatin蛋白的检测方法、强力药物的筛选及废用性肌肉萎缩的治疗提供实验依据。方法:化学耦联方法合成Myostatin C-末端区(330bp)基因序列,利用PCR技术扩增5′端和3′端酶切位点为BamH I和EcoR I,然后克隆至真核表达载体pVAC1-cms,得到重组质粒pVAC-Ms。质粒纯化后采用脂质体介导转染CHO细胞,瞬时转染后收集CHO细胞,利用RT-PCR技术和细胞荧光免疫技术检测Myostatin在CHO细胞中的转录和蛋白表达。结果:酶切和测序结果表明,Myostatin真核表达载体pVAC-Ms构建成功,RT-PCR和细胞荧光免疫检测结果表明,瞬时转染的CHO细胞中Myostatin基因明显转录,蛋白明显表达。结论:实验成功构建了在真核细胞中能有效表达人Myostatin重组蛋白的真核表达载体,为运动员Myostatin蛋白表达的检测、强力药物筛选、训练监控及废用性肌肉萎缩治疗等方面的后续研究提供实验基础。 相似文献
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《西安体育学院学报》2017,(4)
目的探讨应用白介素-1受体拮抗蛋白(IL1RA)对早期创伤性关节炎软骨细胞代谢的影响,主要观察应用后相关细胞炎性因子及蛋白酶基因的表达变化。方法 44只健康成年新西兰大白兔,随机分为对照(假手术)组(CON组,n=4)、安慰剂组(PBS组,n=20)、IL1RA治疗组(IL1RA组,n=20)。其中PBS组及IL1RA组均接受关节内重物击打,造成创伤性关节炎模型。造模后1 h,CON组不接受任何治疗,PBS组及IL1RA组实验兔膝关节则分别给予0.5 m L无菌PBS和0.5 m L IL1RA-PBS关节腔注射。术后3 h及8 h采集关节液,检测IL-1β含量。术后8 h处死动物取软骨组织进行软骨细胞培养后,测定细胞活力及凋亡率,RT-PCR检测软骨组织中ADAMTs-4、ADAMTs-5、MMP-3、IL-1β及TNF-α的m RNA表达。结果术后3 h及8 h,PBS组关节液中IL-1β的含量均明显高于CON组(P<0.01)。然而,经IL1RA介入治疗后,IL-1β在术后各测试点的含量均明显低于PBS组(P<0.05)。与CON组相比,术后8h培养的PBS组软骨细胞活力明显降低(P<0.05),而IL1RA组软骨细胞活力与CON组相比无显著性差异,但明显高于PBS组。另一方面,与CON组及IL1RA组相比,PBS组的细胞凋亡率明显增高(P<0.05)。而IL1RA组与CON组相比,细胞凋亡率无明显差别(P>0.05)。RT-RCR结果显示,与CON组比较,PBS组所有目的基因m RNA的表达均明显增加(P<0.01)。然而,IL1RA组所有目的基因的表达与CON组相比无统计学差异,但明显低于PBS组(P<0.01)。结论实验结果表明创伤后关节炎早期应用IL1RA介入治疗可有效降低关节液细胞炎性因子的浓度,抑制细胞炎性因子对软骨细胞生长增殖的负性影响,降低细胞凋亡,且对于促进软骨细胞基质降解的细胞炎性因子及蛋白酶的表达显著下调,对PTOA病程发展具有抑制作用。 相似文献
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有氧运动中NADPH氧化酶介导产生的活性氧对大鼠神经胶质细胞活力的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
建立大鼠有氧运动模型,原代培养了有氧运动后大鼠神经胶质细胞,阐明有氧运动后类NADPH氧化酶介导产生的活性氧(ROS)对细胞正常生理功能的影响。通过实验发现,有氧运动后大鼠神经胶质细胞中O2.-和H2O2生成均明显增加,而人工饲喂NADPH氧化酶的抑制剂二联苯碘(diphenylene iodonium,DPI)或夹竹桃麻素(apocynin,APO)后,均明显地降低由运动引起的大鼠神经胶质细胞O2.-和H2O2生成量;细胞活性的测定显示,DPI、APO、超氧化物歧化酶 过氧化氢酶均能明显降低运动后大鼠神经胶质细胞活性。表明有氧运动中类NADPH氧化酶介导产生的ROS是大鼠神经胶质细胞生存所必需,过度进补抗氧化剂将干扰细胞的正常生理活动甚至导致细胞死亡。 相似文献
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采用点揉、点穴、膝关节摇法、膝关节屈伸等推拿手法,对实验兔骨关节炎实施手法,通过对膝关节活动度、髌韧带拉伸长度及强度的对照比较,证明推拿治疗能改善关节活动度,恢复韧带弹性。通过检测和对比软骨厚度以及IL-1、IL-6在软骨中的平均光密度表达,证实推拿可使炎性反应明显减轻,关节软骨缺失得到延缓。 相似文献
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目的:探讨H2O2对原代培养骨骼肌细胞存活状态的影响;探索H2O2在不同剂量及作用时间对线粒体生物发生相关因子的影响,确定其体外最适作用剂量和体外最适作用时间(可激发线粒体生物发生,又不至引发细胞死亡),从而了解以H2O2为主的ROS对线粒体生物发生相关因子的作用机制。方法:提取新生24h内乳鼠骨骼肌细胞进行原代培养,并用H2O2作为外源性ROS诱因,激发细胞线粒体生物发生。分别用MTT检测细胞活性、荧光定量(Realtime Quantitative)PCR方法检测线粒体生物发生相关因子PGC-1α、mt-TFA、mtTFB2、NRF-1 mRNA表达水平以及western-blotting检测磷酸化Akt水平。结果:荧光定量PCR检测结果表明,PGC-1αmRNA水平只在100μMH2O2作用3h后较空白对照组明显增加;mtTFA mRNA水平在作用1h、3h、6h后均较空白对照组有明显增加,在18h后又下降;mtTFB2 mRNA水平则在3h、6h、18h后均较空白对照组有明显增加;NRF-1 mRNA水平只在作用1h后较空白对照组有明显增加,其他各时间点都没有改变。磷酸化AKt Western-blotting结果表明,空白对照组有较低的AKt表达,1h、3h、6h、18h组均有表达,且以1h、6h、18h组水平较高。结论:ROS的适量和适时都决定着其是以线粒体生物发生信号分子为主导还是以凋亡信号分子为主导作用而控制着细胞的生长、增殖与抑制、凋亡;外源性H2O2作用实验证实PGC-1α可能同线粒体生物发生的早期事件无关;适量H2O2激活了PI3K/AKt/PKB信号系统,使AKt磷酸化,介导了线粒体生物发生作用,保护线粒体呼吸功能的正常进行。 相似文献
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腰椎滑膜嵌顿症,是运动员的腰部急性常见损伤,也是广大群众常见的急性损伤性腰痛疾患。伤后疼痛剧烈,患者腰部功能丧失。我们采用手法解除嵌顿引例,均收到手到病除的效果。现将病机、症状、诊断、治疗手法简介如下。[发病机制] 椎间关节关节囊的滑腹层,由于外力影响,如腰部骤然前屈或侧屈,加旋转动作,使一侧椎间关节间隙拉开,造成滑膜嵌入。再由于腰部突然伸直,使进入关节腔中之滑膜形成嵌顿状态。脊柱关节关节突在腰部为矢状位,前屈后伸幅度大,侧屈旋转幅度小,因此滑膜嵌顿多发于L_(3—4)、L_(4—5)、L_(5—S_1)。 相似文献
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运动对ICOS的诱导表达作用及其生物学功能研究 总被引：1，自引：0，他引：1
目的立足于运动训练对运动员免疫功能的影响,就运动对ICOS分子表达的诱导作用及其生物学功能做一探索性研究.方法随机抽取17～23岁运动员共35名为实验对象,建立人体运动免疫研究实验模型;运用密度梯度细胞分离法,获得运动员运动前、期间、运动后不同时段的外周血PBMC;运用细胞体外培养技术、MTT法和流式细胞术、RT-PCR技术,体外检测各时段T细胞活化增殖程度、T细胞亚群变化及T细胞表面ICOS及T细胞ICOSmRNA表达水平;将ICOS特异性配体GL-50与上调表达ICOS分子的T细胞体外共育,5天后ELISA法检测细胞培养液中IL-10水平,同时检测运动员运动前后血清IL-10、IL-2、IFN-γ水平.结果运动可激发T细胞活化增殖,导致T细胞亚群变化;运动可诱导活化T细胞上调表达ICOS和ICOS mRNA;ICOS/GL50共刺激信号可刺激T细胞合成分泌IL-10;持续4周运动训练后,运动员血浆IL-10水平显著提高,IL-2、IFN-γ水平明显下降.结论长期运动应激可诱导活化T细胞上调表达ICOS分子;ICOS分子具有加强T细胞合成分泌IL-10、诱导Th2细胞增殖分化的重要功能;ICOS/GL50共刺激信号诱导IL-10分泌、Th1/Th2失衡,是运动后机体对感染性疾病易感性增高的"运动性免疫抑制"现象的重要免疫学基础. 相似文献
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不同强度耐力训练后力竭运动大鼠肾细胞凋亡及影响机制的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
目的:研究两种不同强度耐力训练后力竭运动大鼠肾细胞凋亡的差别及其机制。方法:大鼠随机分为对照组(C组)、低强度和大强度耐力训练后力竭组(LE组、HE组),经5周以上耐力训练后进行一次力竭运动,24h后取材。透射电镜和原位末端标记法检测肾细胞凋亡,免疫组化法检测肾细胞Bcl-2和Bax蛋白表达,硝酸还原酶法检测肾组织NO生成,测定NOS活性。结果:与C组比较,HE组肾小管上皮细胞凋亡显著增加,LE组凋亡不明显;各组Bax蛋白表达差异不显著;LE组Bcl-2蛋白表达明显增高,NOS活性显著降低,而HE组无显著变化,NO浓度基础值最高。结论:低强度耐力训练能增高Bcl-2蛋白表达、降低NOS活性以稳定肾组织NO含量,控制力竭运动诱导的细胞凋亡;耐力训练可能对大强度力竭运动明显诱导肾细胞凋亡发挥作用,但不能起到完全控制效果。 相似文献
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目的:探讨大鼠经实验性水上漂浮、高强度运动后血清皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)以及白细胞介素1β、IL-6(IL-1β、IL-6)的变化及垂体ACTH阳性表达细胞的变化.方法:将大鼠随机分为水上漂浮组(A组)、水上漂浮并高强度运动组(B组)、对照组(C组),每组12只,均为10周龄雄性大鼠.A组在人工造浪水池中接受连续180min的水上漂浮,并加以猫恐吓;B组按A组给予如前180min水上漂浮后继续给予连续奔跑120min;C组除与A组、B组同时禁食、水外不给任何应激.实验结束后测定CORT、ACTH及IL-1β、6水平及行垂体ACTH阳性表达细胞的免疫组化分析.结果:与C组相比,A组CORT水平稍增高,但差异无统计学意义(P>0.05),而B组CORT的升高具有统计学意义(P<0.01);与A组相比,B组CORT亦升高(P<0.01).与C组相比,A组血清ACTH水平无改变(P>0.05),而B组ACTH降低,差异有统计学意义(P=0.33).与C组相比,A组IL-6升高(P=0.023),B组IL-1β、IL-6均升高(P=0.031,0.022).免疫组化染色示A、B组垂体ACTH表达阳性细胞数量皆减少(P皆<0.05),但A、B组间差异无统计学意义(P>0.05).结论:急性心理应激可激活下丘脑-垂体-肾上腺轴,并导致细胞因子IL-6血浓度增加,在心理应激基础上予以单次大强度运动可进一步增加大鼠应激反应的程度,致CORT以及细胞因子IL-1β、6血浓度进一步升高,而ACTH受抑,且垂体ACTH阳性细胞也相应减少. 相似文献
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目的:通过中小强度有氧运动和辛伐他汀药物干预,探讨AS血管炎性损伤的修复及机制。方法:应用ApoE基因敲除和高脂高胆固醇饲料诱发小鼠AS,分为动脉硬化组、运动组、用药组;ELISA测定血清炎性因子及激素水平;免疫组化法阳性标记TLR4、NF-κb、EGF、TGF-β;RT-PCR测定CRP、MCP-1 mRNA表达。结果:12周动脉硬化组ApoE基因敲除小鼠血管可见明显斑块组织;用药组内皮表层细胞肿胀呈泡沫样,运动组则未见以上组织改变;运动和用药组小鼠血清IL-6、TNF-a含量和血管组织TLR4、NF-κb、CRP、MCP-1表达均降低(P<0.05),而血清IL-10、ET1、AngⅡ和内皮细胞EGF、TGF-βmRNA表达均升高(P<0.05)。结论:有氧运动有效防治AS小鼠血管炎性损伤,其可能机制是介导了Toll样受体通路并恢复血管激素分泌与促进内皮细胞再生。 相似文献
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This study examined the effect of carbohydrate ingestion on metabolic and performance-related responses during and after a simulated 1h cycling time trial. Eight trained male cyclists (VO 2 peak = 66.5ml kg -1 min -1 ) rode their own bicycles mounted on a windload simulator to imitate real riding conditions. At a self-selected maximal pace, the cyclists performed two 1h rides (separated by 7 days) and were fed either an 8% carbohydrate or placebo solution. The beverages were administered 25 min before (4.5ml kg -1 ) and at the end (4.5ml kg -1 ) of the ride. With carbohydrate feeding, plasma glucose tended (P = 0.21) to rise before the time trial. Compared with rest, the plasma glucose concentration decreased significantly (P < 0.05) at the end of both rides, with no statistically significant difference being observed between treatments. Thereafter, plasma glucose increased significantly (P < 0.05) at 15 and 30 min into recovery, and was significantly higher at 30 min during the carbohydrate trial compared with the placebo trial. No significant changes in plasma free fatty acids were observed during the ride. However, a significant increase (P < 0.05) in free fatty acids was found at 15 and 30 min into recovery, with no difference between trials. Mean power output was significantly (P < 0.05) greater during the carbohydrate compared with the placebo trial (mean - S.E.: 277-3 and 269-3W, respectively). The greater distance covered in the carbohydrate compared with the placebo trial (41.5-1.06 and 41.0–1.06km, respectively; P < 0.05) was equivalent to a 44s improvement. We conclude that pre-exercise carbohydrate ingestion significantly increases endurance performance in trained cyclists during a 1h simulated time trial. Although the mechanism for this enhancement in performance with carbohydrate ingestion cannot be surmised from the present results, it could be related to a higher rate of carbohydrate oxidation, or to favourable effects of carbohydrate ingestion on the central component of fatigue. 相似文献
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Roy J. Shephard 《Journal of sports sciences》2013,31(7):603-620
The biology and medicine of rowing are briefly reviewed. Effort in a 2000 -m race is about 70% aerobic. Because the boat (and in some instances a cox) must be propelled, successful competitors are very tall, with a large lean mass and aerobic power. Large hearts may lead to erroneous diagnoses of a cardiomyopathy. Large respiratory minute volumes must be developed by chest muscles that are also involved in rowing. The vital capacity is typically large, and breathing becomes entrained. Expiration cannot be slowed relative to inspiration (as normally occurs at high rates of ventilation) and the limiting flow velocity may be reached, with the potential for airway collapse. Performance is strongly related to the power output at the ‘anaerobic threshold’, and lactate measures provide a guide to an appropriate intensity of endurance training. Peak blood lactate levels are higher in males (commonly 11–19 mmol·l -1 and occasionally as high as 25 mmol·l -1) than in females (9–11 mmol·l -1), probably because males have a greater muscle mass in relation to blood volume. The skeletal muscles are predominantly slow twitch in type, developing an unusual force and power at low contraction velocities. Many rowers have a suboptimal diet, eating excessive amounts of fat. Lightweight rowers also have problems of weight cycling. Aerobic power and muscle endurance often change by 10% over the season, but such fluctuations can be largely avoided by a well-designed winter training programme. Injuries include back and knee problems, tenosynovitis of the wrist and, since the introduction of large blades, fractures of the costae. 相似文献
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重新认识体育的社会关联 总被引：3，自引：1，他引：2
体育与政治之间存在一个悖论，体育的发展与经济实力之间没有直线相关，体育与教育部分重叠，体育与宗教最为近缘，体育可借用科学手段，体育的艺术禀性日益明显，体育与养生反映着两种人生观。 相似文献
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本文在专家访谈、问卷调查、数理统计和文献资料分析的基础上,探析了上海社区体育竞赛参与者的特点、参与者对社区体育赛事运作管理的看法等问题。在此基础上从引进社区体育赛事的志愿者、整合社区体育赛事的各种资源、开发社区体育竞赛的无形资产、组建非营利性的专业团队、规范社区体育赛事的服务管理等方面提出了进一步满足上海社区居民日益增长的体育竞赛参赛需求的对策与措施。 相似文献
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对全面把握游泳训练环节的探讨 总被引：4，自引：0，他引：4
从系统观点出发,结合训练实践,对全面把握游泳训练环节进行探讨。认为应强化非智力因素在运动员多年训练中的作用,在育材全过程中不断选材,从整体上把握动态训练的全过程,把培养高水平运动员的整个过程置于一个严格的科学控制之下。 相似文献
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影响和限制耐力性运动项目的成绩的生理因素是复杂的和多方面的,取决于训练的强度和运动成绩.大强度持续性运动可导致呼吸肌疲劳.运动性呼吸疲劳可能在决定运动耐量方面起到关键的作用：一方面通过直接影响运动肌力量的生成（外周疲劳）,另一方面,通过肢体用力自感不安反馈引起工作肌运动单位输出功率下降（中枢疲劳）.对呼吸肌进行训练,可能有助于提高耐力性项目的运动成绩. 相似文献
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Alan M. Nevill Roger L. Holder Andrew Bardsley Helen Calvert Stephen Jones 《Journal of sports sciences》2013,31(4):437-443
A regression analysis of competitors' tournament results in relation to their world rankings was proposed to identify the effect of home advantage in international ‘grand-slam’ tennis and ‘major’ golf tournaments. The results provided little evidence of home advantage in either the grand-slam tennis or the golf tournaments held in 1993. The only possible evidence of home advantage was found in the Wimbledon tennis and the US Open golf championships. Even these findings can be explained, at least partially, by (1) the availability of information concerning the low world rankings of the British tennis players competing at Wimbledon, and (2) selective entry, allowing only the world's top-ranked foreign golfers into the US open golf tournament. In both cases, the lower ranking home competitors have a greater opportunity to perform above their anticipated world rankings. Therefore, provided entry into tennis and golf tournaments is truly ‘open’ to both the host nation's representatives and foreign competitors alike, home advantage does not appear to be a major factor influencing the competitors' performance in such competitions. These findings may be explained by the relatively objective nature of the scoring systems used in tennis and golf, unlike the subjective influence of refereeing decisions on the results of team-games such as soccer. 相似文献
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结合欧洲足球技战术的发展特点,就鲁能泰山足球队的体能训练、技术训练、防守阵型、进攻方式、定位球、职业态度、球星培养等诸方面所存在的不足进行了分析,提出相应的改进意见。 相似文献