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1.
目的:评估干扰素α(IFN-α)和TT-1(一种蜂毒肽的类似物)联合用药的抗肿瘤效果,并初步研究联合用药的抗肿瘤及免疫调节机制。创新点:为了增强蜂毒肽的抗肿瘤效果,本课题组在其基础上进行改造,合成了一种新的化合物TT-1。该研究第一次将蜂毒肽类似物和免疫细胞因子IFN-α联合使用,并通过实验证实联合用药可以通过激活免疫调节来增强TT-1的抗肿瘤效果。方法:首先通过MTT实验验证TT-1对HepG-2/Huh7细胞的增殖抑制作用。接着建立HepG-2/Huh7小鼠移植瘤模型,考察TT-1+IFN-α的体内抗肿瘤效果;使用anti-asialo GM-1抗体消除自然杀伤(NK)细胞,验证NK细胞在联合用药中的关键作用。使用流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA)验证TT-1对HepG-2/Huh7细胞MHC I链相关分子A(MICA)表达的影响,并用实时聚合酶联反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)对其机制进行探究;通过细胞毒性实验考察TT-1+IFN-α是否可以增强NK细胞对HepG-2/Huh7细胞的特异性杀伤作用。最后使用免疫组化的方法考察TT-1+IFN-α联合用药对肿瘤组织中MICA和NKG2D的表达量的影响。结论:MTT实验表明TT-1可以在体外有效地抑制HepG-2/Huh7细胞的增殖。小鼠移植瘤模型实验结果显示TT-1+IFN-α联合用药比TT-1单独给药更能有效地抑制HepG-2/Huh7移植瘤的生长,但是在消除NK细胞之后该效应明显减弱,说明TT-1+IFN-α的抗肿瘤效应是通过NK细胞特异性介导的。TT-1不仅可以上调肿瘤细胞表面MICA的表达量,而且可以减少可溶性MICA的分泌;进一步研究表明,TT-1通过抑制去整合素金属蛋白酶10(ADAM 10)的表达来阻止MICA从肿瘤细胞表面脱落。细胞毒性实验表明,TT-1+IFN-α可以显著增强NK细胞对HepG-2/Huh7细胞的杀伤作用。免疫组化实验结果显示,TT-1+IFN-α联合用药可以明显增加肿瘤组织中肿瘤细胞表面MICA和NK细胞NKG2D的表达量。综上所述,TT-1+IFN-α联合用药可以通过增强MICA和NKG2D的相互作用达到显著的抗肿瘤效果。 相似文献
2.
目的:探索胆管癌来源外泌体(TEX)对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)抗肿瘤活性的影响,并初步探讨其作用机制。创新点:首次通过体外实验证明TEX可引起CIK抗肿瘤活性下降,且此作用与肿瘤坏死因子α(TNF-α)和穿孔素表达抑制相关。方法:采用超速离心法提取人胆管癌细胞(RBE)来源的外泌体,同时CIK通过人外周血培养获得。将TEX负载到CIK培养体系中作为TEX-CIK组,不加TEX的CIK作为N-CIK组。流式细胞仪检测两组CIK细胞表型变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组培养基上清液中TNF-α和穿孔素的浓度,CCK-8法检测CIK对RBE细胞的杀伤活性。结论:TEX能降低CIK细胞CD3~+、CD8~+、NK(CD56~+)以及CD3~+CD56~+比例,并且抑制TNF-α和穿孔素表达,从而降低CIK细胞的抗肿瘤效应。 相似文献
3.
恶性肿瘤的发生、发展与宿主的免疫检测功能密切相关.T淋巴细胞、NK细胞、IL-2及其受体在免疫调节中起重要作用.本文对36例鼻咽癌患者的T淋巴细胞亚群、NK细胞活性及sIL-2R进行了检测并结合文献进行了探讨. 相似文献
4.
为解决肿瘤个体化治疗中体内外模型差异的问题,明晰体外模型对药敏检测的影响。实验在体外建立肿瘤3D细胞模型,通过ATP生物荧光法(ATP-TCA)检测3D肿瘤细胞中ATP的含量,间接反映3D肿瘤细胞对化疗药物5-FU和紫杉醇的敏感性。同时,通过Live/Dead细胞成像实验进一步研究化疗药物对3D肿瘤细胞的杀伤作用。研究发现化疗药物5-FU和紫杉醇均可抑制HepG2和A549肿瘤3D细胞的生长,且紫杉醇对HepG2 3D细胞的抑制作用明显强于5-FU。药物敏感性评价结果显示,HepG2 3D细胞对化疗药物紫杉醇中度敏感,对5-FU不敏感。A549 3D细胞对紫杉醇和5-FU均中度敏感。Live/Dead细胞成像结果进一步证实了PTX对HepG2 3D细胞具有明显的毒性。本实验为体外药敏检测提供了新思路。 相似文献
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复方中药提高荷EAC鼠NK细胞功能介导抑瘤作用 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]探讨复方中药对EAC荷瘤小鼠的免疫功能的影响。[方法]用复方中药（FFZY）对EAC荷瘤小鼠灌胃10d，观察其肿瘤生长情况以及用乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞的活性。[结果]高、中和低浓度组NK细胞活性分别为（44．21±3．10）％、（51．09±4．94）％和（37．30±2．02）％，与空白对照组（31．26±2．79）％比较，NK细胞活性升高（P〈0．05），而阴性对照组（26．90±1．84）％NK细胞活性显著降低（P〈0．05）；高、中和低浓度组的肿瘤质量为（300．6±48．9）mg，（226．5±36．4）mg和（445．9±60．2）mg，与阴性对照组（661．5±102．8）mg比较，均能抑制肿瘤的生长（P〈0．05），其中以中浓度组效果最为明显（P〈0．05）。[结论]经过复方中药灌冒的EAC荷瘤小鼠NK细胞活件均升高．3种不同浓度的复方中药均使肿瘤生长减慢。 相似文献
6.
目的:研究新城疫病毒(NDV)感染对小鼠肉瘤S180细胞p53蛋白的表达及细胞周期的影响。方法:通过NDV体外感染小鼠肉瘤S180细胞,经倒置显微镜观察细胞形态变化,噻唑蓝(MTT)比色法检测小鼠肉瘤S180细胞的增殖状况;经流式细胞仪分析检测NDV体内感染后荷瘤鼠腹水中S180细胞分裂周期各时相的变化、细胞凋亡情况及细胞表面p53蛋白的表达情况。结果:NDV体内、外感染对小鼠肉瘤S180细胞的杀伤作用明显,NDV体内感染后荷瘤鼠腹水中S180细胞高表达p53蛋白,细胞凋亡率增加,G2/S期细胞减少,增殖指数(PI)降低,与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:NDV感染可增强小鼠肉瘤S180细胞p53蛋白的表达,影响其细胞周期,诱导其凋亡且有较强的杀瘤作用。 相似文献
7.
8.
目的 :研究新城疫病毒在体外抗胃癌细胞活性及其与细胞凋亡的关系。方法 :应用倒置显微镜观察细胞形态、MTT法测NDV在体外对BGC - 82 3的抑制和杀伤作用 ,同时用流式细胞术检测胃癌细胞凋亡情况及细胞分裂周期各时象的变化。结果 :NDV在体外可使BGC - 82 3胃癌细胞形成明显的细胞病变效应、细胞生长抑制及细胞凋亡 ,且细胞凋亡率与感染时间呈正相关。G2、S期细胞减少 ,增殖指数 (PI)降低 ,与阴性对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 :NDV具有显著的抗BGC - 82 3胃癌细胞活性。 相似文献
9.
夏杰张丹雷琴占玲王蓉 《黄冈职业技术学院学报》2017,(2):87-89
原发肿瘤通过释放肿瘤分泌因子(Tumor-derived secreted factors,TDSFs)在继发器官募集骨髓来源细胞(bone marrow-derived cells,BMDCs),创建一个适合转移肿瘤转移的转移前生态位(premetastatic niches,PMN),为肿瘤的后期转移做好前期准备。实体肿瘤常因为缺氧而导致不良预后。缺氧是促进PMN形成的重要因素。本文主要介绍了缺氧在PMN形成中的作用机制:缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIFs)依赖的LOX和LOX-like(LOXL)蛋白表达;缺氧肿瘤细胞释放TDSFs;NK细胞杀伤功能降低。 相似文献
10.
Kun YAO Xu-feng FU Xing DU Yan LI Shan-shan YANG Min YU Qing-hua CUI 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2018,(6)
目的:探究过氧化物酶体增生激活受体γ协同刺激因子1α(PGC-1α)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)在调控细胞周期中的相互关系。创新点:首次证明在血清饥饿时PGC-1α负调控Bcl-2,并且认为Bcl-2可能通过招募PGC-1α降低细胞中的活性氧自由基(ROS)以调节细胞周期。方法:用蛋白质印迹法(Western blotting)检测了接触抑制和血清饥饿处理的NIH3T3过表达Bcl-2的细胞中PGC-1α的表达,并且分别检测了用Bcl-2和PGC-1α的小干扰RNA(si RNA)降低U251细胞(内源性高表达Bcl-2和PGC-1α)中的Bcl-2和PGC-1α的表达,最后用免疫共(co-IP)检测了二者的关系。结论:本实验中用两种细胞同步化的方法(接触抑制和血清饥饿)处理了Bcl-2过表达的NIH3T3细胞时发现PGC-1α高表达,用Bcl-2的si RNA处理了U251细胞时发现PGC-1α的表达降低,但是血清饥饿处理了U251后发现Bcl-2升高而PGC-1α降低,而且PGC-1α被si RNA降低后Bcl-2反而上升,最后用Bcl-2抗体免疫共沉淀了PGC-1α蛋白,这些结果说明在血清饥饿时PGC-1α负调控Bcl-2行使调节细胞周期的功能。 相似文献
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瓜子金皂苷己对鱼藤酮损伤PC-12细胞的保护作用及其对CREB的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
目的：观察瓜子金皂苷己（polygalasaponin F,PS-F）对鱼藤酮损伤的PC-12细胞的保护作用及其对cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）表达的影响。方法：以鱼藤酮损伤的PC-12细胞为模型,通过倒置显微镜观察细胞形态,caspase 3活性检测试剂盒测定caspase 3活性,荧光素酶报告基因技术检测CREB表达的变化。结果：PC-12细胞在4μmol·L-1鱼藤酮损伤后,细胞出现萎缩变圆,折光率降低,caspase 3活性显著升高,呈现凋亡的现象。不同浓度（0.1,1.0,10.0μmol·L-1）瓜子金皂苷己能够剂量依赖性的减轻对细胞形态的影响,降低caspase 3活性。荧光素酶报告基因标记显示,瓜子金皂苷己能够增加报告基因CREB的表达。结论：瓜子金皂苷己能够抑制鱼藤酮诱导的PC-12细胞凋亡,其机制可能与增加CREB的表达有关。 相似文献
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Ying SONG Zhuo-chao WU Wei DING Yun BEI Zhi-yun LIN 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2018,(6)
目的:探讨线粒体内核转录因子(NF-κB)的表达与脂多糖(LPS)诱导损伤后神经细胞的凋亡之间的关系。创新点:(1)LPS诱导后,线粒体中NF-κB的增加导致细胞凋亡;(2)腺嘌呤核苷酸转位酶1(ANT1)活性决定线粒体中NF-κB的水平。方法:通过MTT和Hoechst 33342染色来测定药物对PC12细胞的作用;用电子显微镜和罗丹明123(rhodamine 123)检测线粒体的形态和功能;通过酶联免疫吸附测定(ELISA)测量ANT1、脂质过氧化物和抗过氧化物酶的活性;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测NF-κB的相对表达水平。结论:(1)在LPS诱导的神经元细胞损伤后的细胞凋亡期间,NF-κB通过摄取ANT1在线粒体中被激活;(2)神经生长因子(NGF)不仅降低NF-κB活性,还降低ANT1活性,进而使得线粒体中NF-κB的表达水平下降,并抑制线粒体介导的细胞凋亡。 相似文献
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目的:探讨阿霉素对人胃癌细胞的杀伤作用及致GSTπ表达的变化。方法:利用人胃癌BGC-823细胞株,CO2培养箱进行培养过程中,加入阿霉素注射液继续培养5h或10h。然后用HE和免疫组化染色。光镜下观察并进行图象分析。结果:实验组BGC-823细胞变形,GSTπ表达位置和灰度有明显变化。结论:阿霉素作用5h可对胃癌细胞有杀伤作用,使胃癌细胞形态和GST基因表达有明显变化。 相似文献
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目的:观察表达不同接头(Linker)长度的巨噬细胞源趋化因子(MDC)与CVB3VP1融合基因疫苗的免疫效果.方法:将6～8周龄雄性BALB/C小鼠随机分为A～D 4组,分别肌肉注射pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-L10-VP1、和pcDNA3/MDC-L19-VP1,每次接种100μg/只,4周注射一次,共3次,第3次免疫后3周,每组取3只小鼠,制备脾细胞,用CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;每组取3只小鼠以3LD50CVB3病毒攻击,第7天处死,取心脏,制备石蜡切片,观察各组小鼠心肌病理学改变;每组取8只小鼠用5LD50的CVB3腹腔内攻击,观察并记录小鼠死亡情况至感染后的第21天.结果:第3次免疫后,D组中小鼠脾淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性显著高于其它各组(P<0.01);以5LD50CVB3感染小鼠后,D组小鼠存活率最高;以3LD50CVB3病毒攻击后,D组小鼠心肌病理改变最轻.结论:融合基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1能诱导小鼠对CVB3VP1产生较强的特异性免疫应答,提高小鼠的生存率. 相似文献
16.
顺铂是目前治疗癌症最有效的药物之一,测定细胞内顺铂的含量对于了解细胞摄取顺铂和顺铂发挥药效有重要作用．本研究通过MTT法检测了顺铂杀伤K562细胞的有效浓度,建立并利用高效液相色谱法（HPLC）检测了K562细胞对顺铂的摄入．结果表明K562细胞经10μg/mL顺铂处理12h后,细胞活性显著下降;细胞外有36．75％顺铂进入胞内．实验数据显示,顺铂对K562细胞的杀伤与其在胞内的累积相关． 相似文献
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通过饮用一定时间东亚钳蝎高粱酒，探讨对小鼠免疫功能的影响.对雄性昆明小白鼠连续灌胃蝎子酒(40 g/kg)35天，通过注射绵羊红细胞，进行迟发型变态反应，检测相应免疫指标.结果显示，东亚钳蝎高粱酒组与对照和高粱酒组比较，东亚钳蝎高粱酒组左脚趾的厚度变化较小，血清溶血素水平明显升高，抗体生成数量提高，脏器比重增大，NK细胞活性明显提高，T细胞数量增多.环磷酰胺组能够提高NK细胞活性，但减少T细胞转化率.半浓度东亚钳蝎高粱酒组比单纯环磷酰胺组的免疫功能强大.显示蝎子酒能够有效提高小鼠免疫功能，增强免疫系统对肿瘤细胞的免疫力. 相似文献
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19.
赵俊丽 《南京晓庄学院学报》2011,(6)
该实验主要研究球毛壳菌素F对聚肌苷酸胞苷酸Poly（I：C）诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264．7 TNF-α表达水平的影响．采用不同浓度的Poly（I：C）（50μg·mL-1、100μg·mL-1和200μg·mL-1）和球毛壳菌素F（2μg·mL-1）对RAW264．7进行处理,运用流式细胞术检测细胞内TNF-α的表达水平．结果表明,各浓度的Poly（I：C）与对照组相比均能极显著提高RAW264．7的TNF-α水平（P〈0．001）,并且具有浓度依赖性;球毛壳菌素F能够极显著地降低Poly（I：C）诱导的细胞TNF．O／水平（P〈0．01）．结论,球毛壳菌素F可能是通过降低炎症因子TNF-α的分泌而达到抗炎作用的． 相似文献
20.
赵俊丽 《南京晓庄学院学报》2011,(6):69-72
该实验主要研究球毛壳菌素F对聚肌苷酸胞苷酸Poly（I：C）诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264．7 TNF-α表达水平的影响．采用不同浓度的Poly（I：C）（50μg·mL-1、100μg·mL-1和200μg·mL-1）和球毛壳菌素F（2μg·mL-1）对RAW264．7进行处理,运用流式细胞术检测细胞内TNF-α的表达水平．结果表明,各浓度的Poly（I：C）与对照组相比均能极显著提高RAW264．7的TNF-α水平（P〈0．001）,并且具有浓度依赖性;球毛壳菌素F能够极显著地降低Poly（I：C）诱导的细胞TNF．O／水平（P〈0．01）．结论,球毛壳菌素F可能是通过降低炎症因子TNF-α的分泌而达到抗炎作用的． 相似文献