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邱悦 王洪阳 潘华晔 关静 严磊 范明杰 周辉 周煊皓 吴楷文 贾则晓 庄倩倩 雷昭莹 李梦瑶 丁雪 林爱福 付勇 张冬 王秋菊 严庆丰 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2023,(2):172-195
听神经病谱系障碍（ANSD）属于感音神经性耳聋,其特征为内毛细胞和/或听觉神经元的功能异常,但外毛细胞的功能正常。在听力障碍患者中,听神经病谱系障碍的发病率高达15%。我们前期通过突变筛查、生物信息学分析和蛋白表达等检测,在ANSD家系和某些散发病例中发现了凋亡诱导因子1(AIFM1)基因的几种点突变。为阐明AIFM1突变体的致病机制,本文使用CRISPR/Cas9系统构建了凋亡诱导因子（AIF）蛋白敲除的细胞系,及其稳定转染野生型和突变型AIF蛋白（p.T260A、p.R422W和p.R451Q）的细胞系,并且分析了AIF蛋白结构、AIF与辅酶的亲和力及细胞凋亡等情况。结果显示,上述AIF突变体可导致AIF蛋白二聚体形成障碍,损害AIF蛋白的生理功能。突变型AIF蛋白的还原速率显著低于野生型AIF蛋白。且在AIF突变型细胞系中,AIF蛋白的二聚体含量仅为AIF野生型细胞系的34.5%～49.7%,导致非caspase依赖性细胞凋亡。AIF突变型细胞系中凋亡细胞的平均百分比为12.3%～17.9%,显著高于对照组的6.9%～7.4%。特别是,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）处理显著提高... 相似文献
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