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1.
目的:研究不同浓度的异亮氨酸对大鼠空肠形态和抗菌肽表达的影响;方法:选用40只健康断奶SD大鼠,随机分为四组,分别饲喂含有不同浓度异亮氨酸的饲粮(基础日粮+0%、0.5%、1.0%或1.5%异亮氨酸),试验期为14 d.HE染色观察空肠形态变化,通过荧光定量PCR测定空肠中抗菌肽的表达水平.结果:1)对照组大鼠空肠绒毛整齐,黏膜上皮界限清晰,隐窝较浅,0.5%和1.0%异亮氨酸组大鼠空肠绒毛较对照组排列整齐,绒毛较高,隐窝较浅;与0%、0.5%和1.0%异亮氨酸组相比,1.5%异亮氨酸组大鼠绒毛高度较低,隐窝深度增加.2)与对照组相比,0.5%、1.0%和1.5%异亮氨酸均在不同程度上显著提高了空肠防御素rBD -1的表达,其中0.5%异亮氨酸组大鼠空肠防御素rBD -1表达增加了2.3倍,1.0%异亮氨酸组rBD -1表达量增加了13.1倍,1.5%异亮氨酸组rBD -1表达量增加了14.2倍.结论:添加异亮氨酸可显著增加大鼠空肠防御素基因的表达,适量的异亮氨酸对空肠黏膜形态具有改善作用,过量异亮氨酸可能破坏空肠黏膜形态.  相似文献   
2.
目的:通过改进大鼠睾丸支持细胞的分离方法,获得高纯度支持细胞。方法:选用18~22日龄雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,去除睾丸被膜、剪碎组织块,采用0.25%胰酶和0.1%Ⅳ型胶原酶单次消化,分别在37℃水浴震荡消化15min、10min,经100目细胞筛过滤收集细胞,置于37℃、5%CO2培养箱中进行培养,24h后大多数细胞完全贴壁,观察细胞生长,待长满培养瓶80%进行传代培养。显微观察不同时间段、不同代睾丸支持细胞的形态,采用免疫荧光方法对睾丸支持细胞进行鉴定。结果:显微观察可见分离培养的支持细胞胞质呈不规则的多处突起,细胞核呈圆形或椭圆形,细胞之间交织成网状;免疫荧光Vimentin特异性表达鉴定显示,所分离培养的细胞为睾丸支持细胞,经显微镜下计数其纯度达95%以上。结论:缩短两步酶消化时间,培养24h后用预冷磷酸盐缓冲溶液(PBS)洗换培养液,连续传代培养至第三代,此方法简化了分离培养支持细胞步骤,同时提高了支持细胞的纯度和细胞数量。  相似文献   
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