例析限制酶切割难题现象     

魏威 《中学生物教学》2011,(3):31-32

<正>近年来,选择合适限制酶对目的基因和质粒进行切割似乎成为高考的一个热点,如江苏、天津等地的高考试题中,多次涉及限制酶切割目的基因和质粒的问题。由于考生对限制酶识别序列及切割点产生的黏性末端认识不清,导致该类试题时常成为难题。这类试题考查的能力主要包括以下几个方面。  相似文献   

解读浙江选考题中的农杆菌转化法     

严灵剑  周旖旎 《生物学教学》2021,(2):68-69

本文从农杆菌Ti质粒的介绍、重组质粒导入农杆菌的方法、农杆菌侵染植物细胞机理和转化法的影响因素4个角度,深入解读了近几年浙江选考题中涉及的农杆菌转化法。  相似文献   

DNA免疫的研究进展     

字应伟 《思茅师范高等专科学校学报》2003,19(3):1-3

综述了DNA免疫的产生与发展历史及增强DNA免疫的多种途径和方法。  相似文献   

高温抗药性细菌的质粒检查     

杨荣英 《九江师专学报》1992,11(5):35-37

从堆肥和污泥中分离得到一批高温抗药性细菌，经琼脂凝胶电泳检查，发现其中-菌株T703-S1有质粒存在。  相似文献   

植物肿瘤与Ti质粒     

李人圭 《生物学教学》1992,(5):2-5

  相似文献   

质粒DNA提取及电泳检测实验改革     

《实验技术与管理》2017,(3):35-38

为进一步增强学科间的交叉与渗透,提高学生灵活运用多学科知识与方法的能力,对质粒DNA提取及电泳检测实验进行改革。在改进经典碱裂解法提取质粒DNA、琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA的基础上,新增试剂盒方法提取质粒DNA、超微量分光光度计检测质粒DNA以及快速单酶切鉴定质粒DNA等实验内容。改革后的实验不仅促进经典与现代技术、方法的有机结合,而且增强学科间的相互融合,取得了良好的教学效果。  相似文献   

小量提取质粒DNA的简易方法     

郭晓丽 《衡水学院学报》2007,9(1):16-17

碱裂解法是目前最为广泛应用的质粒DNA的提取方法,本人利用0.9%NaC l溶液代替常规方法中的溶液Ⅰ,并缩短了一些步骤的反应时间,既达到了快速、简便提取质粒DNA的目的,又可以满足分子生物学后续实验的要求.  相似文献   

用十二烷基硫酸钠消除枯草芽孢杆菌中的质粒   总被引：3，自引：0，他引：3  

娄恺  班睿  赵学明 《天津大学学报(英文版)》2002,8(3):148-151

为获得宿主菌 ,研究了十二烷基硫酸钠 (SDS)对枯草芽孢杆菌中质粒的消除 .将过夜培养的枯草芽孢杆菌2 4/pMX45接种于含SDS( 0— 0 .0 0 8% )的LB培养基中 ,当SDS浓度 (w /v)大于或等于 0 .0 0 6 %时 ,菌体不能生长 .SDS的亚致死浓度为 0 .0 0 5 % ,其致死率达 99% .菌液稀释后涂LB平板 ,再随机挑选单菌落至抗性平板 ,检测由质粒编码的红霉素抗性是否丢失 .氯化铯 溴化乙锭梯度离心及质粒DNA的电泳图像证实了 2 4/pMX45的衍生菌株A7中的质粒已完全被消除 .A7延迟期较短 ,并且细胞浓度高于 2 4/pMX45 .用SDS处理 8h后 ,2 4/pMX45的遗传标记开始丢失 ,消除率持续增高至 2 2h ,随之消除质粒的菌体量保持恒定 .在未经SDS处理的对照实验中 ,相同条件下培养 2 4h及 48h后 ,没有发现质粒自然丢失的现象 ,因此SDS能消除枯草芽孢杆菌中的质粒  相似文献   

应用显微注射法建立免疫耐受转基因小鼠模型的研究初探     

刘昌峨 《农业教育研究》2004,(1):56-61

本论文用质粒载体PBC1-CD152转化大肠杆菌DH5a，以Amp(50mg／m1)筛选阳性单个菌落，LB培养基大量培养，按照质粒小量提取试剂盒使用方法抽提质粒，AVAⅠ、HindⅢ酶切和PCR扩增检测。可育雌鼠注射PMSG与HCG超排卵，输卵管内收集，移植受体母鼠输卵管腹壶部。结果表明：AVAⅠ酶切产物有一条为2．0kb的片段，证明是目的基因的启动子，从而证明质粒上含有我们所需的目的基因片段。HindⅢ酶切后出现一条带，与质粒的大小相符。共处理十批小鼠100只，有70只为可用供体，处理有效率为。70％，共捡胚1425枚，只均捡卵20．36枚。共处理受体小鼠十批40只，每只植入胚胎20枚，共出生小鼠274只，出生率为34．25％。本次实验成功扩增了免疫耐受诱导基因皮肤靶向表达载体PBC1-CD152，并以小鼠为动物模型，建立了完善的显微注射法转基因技术流程。  相似文献   

DHA-1型β-内酰胺酶基因克隆及其结构     

陆玮新  魏泽庆  俞云松 《湖州师范学院学报》2007,29(1):99-103

为了克隆多重耐药肺炎克雷伯菌质粒介导的DHA-1型β-内酰胺酶并探测其序列的结构特征,抽提接合菌的质粒,用限制性内切酶HindIII消化,酶切粘末端用Taq酶补平并在末端加单个的脱氧腺苷(A),与pGEM-TEasy载体进行T-A克隆.在含氨苄西林和头孢西丁的平板上筛选重组菌,抽提重组质粒,酶切分析,克隆片段用步移法测序.通过以上方法,克隆筛选到含5.2kb插入片段的重组质粒pT948,插入片段测序发现其含有一个DHA-1基因和一个ampR基因,依次在DHA-1结构基因的侧翼发现一个插入序列IS26.因此,可以认为成功克隆了质粒介导的DHA-1基因,并在其相邻序列中存在插入序列IS26.  相似文献