细胞癌细胞系的建立与生物学特性的关联研究     

袁方王国利王艳吴涛徐佳 《科学中国人》2017,(7Z):63-63

目的以原代培养的喉鳞状细胞癌组织细胞为例,观测细胞癌细胞系的生物学特性。方法通过组织块培养法,体外原代培养喉鳞状细胞癌组织细胞,细胞传代超过25次时,观察细胞的样态、细胞角蛋白的组织化学染色、检验细胞增值周期、培养法检验支原体、聚合酶链反应法(PCR法)鉴别细胞种类、STR-短串联重复序列基因分型。结果新建立一株喉鳞状细胞癌细胞系,定名为TR-LCC-1,其大多数形态为多边形细胞,铺路石样变异、叠层生长,除了形态区别于其他细胞外,其体积也比较大。细胞角蛋白的组织化学染色呈阳性。繁衍30代之后,细胞群体倍增时间提高到201.2小时。对细胞间期进行检验,发现DNA合成前期(G1期)占51.71%,DNA合成期(S期)占44.56%,DNA合成后期(G2期)占2.28%。培养法检验支原体,未发现污染。聚合酶链反应法(PCR法)鉴别TR-LCC-1种类属于人来源细胞。对STR-短串联重复序列进行检验,发现P26与P6一致,异于已知细胞的短串联重复序列。结论人来源喉鳞状细胞癌的细胞系TRLCC-1,可以作为样本以研究喉鳞状细胞癌的特性。  相似文献   

小鼠超高硫角蛋白基因启动子的分子克隆及序列分析     

郭旭东  侯冬霞  毛舒燕  旭日干 《科技通报》2007,23(4):479-482,486

根据小鼠超高硫角蛋白（UHS）基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物,以小鼠全血提取的总DNA为模板,PCR扩增出688bp的特异性片段,连接到pMD19T载体中获得该片段克隆p19TU。经过快速提取质粒法筛选、限制性内切酶分析证明该克隆就是UHS基因5’端的调控区序列。序列分析结果也表明该克隆片段与原基因调控序列相比具有很高的一致性。研究结果为今后制备转基因克隆动物、在毛囊细胞中特异性表达绒毛生长调控基因奠定了基础。  相似文献   

幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建   总被引：2，自引：0，他引：2  

姜云水  方平楚  付亚萍  朱诚 《科技通报》2004,20(3):189-193

目的　构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法　采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3′端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBI A1300的表达框架内.结果　PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBI A1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论　成功构建CTB和cagA融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础.  相似文献   

生物量高的富锌酵母的开发应用     

《中国科技信息》2015,(2):3

<正>采用自然筛选、单倍体分离、诱变、原生质体融合技术选育到生物量高的富锌酵母菌,在含适量无机锌的培养基中培养,能获得生物量高、酵母细胞有机锌含量高的富锌酵母(酵母细胞有机锌含量≥15mg/g干细胞)。此项目目前处于中试阶段。锌是人和动物维持生命和发育的必需营养物质,是生物体内必需的微量元素之一。缺锌会影响生物体DNA复制及蛋白质合成,严重影响皮肤、骨骼及其它器官的正常发育。儿童生长期、妇女妊娠、哺乳期、外伤、反复出血等都易引起缺锌症状和免疫功能下降。我国学龄前儿童普遍存在缺锌现象。服用无机锌盐虽然有一定作用,但是吸收利用率低,常有肠胃不适等反应,严重者会引起肠出血。富锌酵母能将无机状态的锌转化成有机状态的锌,可以提高锌的利用率。  相似文献