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大黄鱼基因组DNA的提取及其RAPD分析条件的探索 总被引:9,自引:0,他引:9
通过实验筛选出一种快速、简便提取大黄鱼基因组 DNA的方法 .以该法提取的大黄鱼基因组 DNA为模板 ,对大黄鱼 RAPD分析中的 DNA模板浓度、镁离子浓度、d NTPs浓度、引物浓度和 Taq酶浓度进行了研究 ,初步确定了适于大黄鱼 RAPD分析的最佳反应体系 :2 5μL反应体系中 ,含模板 DNA2 5 ng,1 0× PCR缓冲液 2 .5μL,d NTPs1 0 0μmol/L,Mg Cl2 2 .5 mmol/L,引物 0 .2μmol/L,Taq DNA聚合酶 1 .0 μmol/min. 相似文献
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以西藏栽培的油菜为材料,采用不同的药品、不同的配方、不同的水浴时间、不同的离心速度等关键的操作程序,筛选出一种提取油菜总DNA效果较佳的方法。此方法提取的DNA纯化后经电泳、紫外吸收光谱检测证明为高分子量、高纯度的DNA,可用于一般的生物化学和分子遗传学的研究。 相似文献
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采用溶剂浸提法提取玉米胚芽油中α-生育酚,研究了提取的工艺条件。在单因素试验的基础上,通过正交试验考察了浸提温度、浸提时间、料液比等因素对实验的影响。结果表明:料液比为1∶4,浸提温度为70℃,浸提时间为120min时,提取效果最好,提取出的α-生育酚浓度为73.83μg/mL,酸价为3.08mg KOH/g。 相似文献
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利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系.多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花多重PCR反应进行优化,建立了扩增效率较高的中棉41的六重PCR反应体系,优化后的体系为HotstarTaq DNA聚合酶用量为1.25 U/50 μL,镁离子的终浓度为3.5 mM,dNTP的终浓度为400 μM,BSA(10mg/mL)的加入量为2μL,选取58℃为反应扩增的退火温度.利用优化的多重PCR体系特异性地检测到转基因棉花中棉41中的外源基因启动子CaMV 35S、终止子TNOS、报告基因NPTII和抗虫基因CrylAc. 相似文献
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目的克隆小鼠内皮抑素(Endostatin)编码区cDNA序列及测序鉴定并构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因表达载体.方法从小鼠肝细胞提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增获得全长Endostatin基因,测序并利用基因重组技术构建pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒.结果分光光度计测定50倍稀释的总RNA抽提产物,A260=0.834,A280=0.407,A260A280=2.049,总RNA浓度为1.668g/L.EndostatincDNA的RT-PCR产物与载体pMD18T连接并经测序证实Endostatin序列与文献报道完全一致,并构建了含Egr-1启动子的IFNY和Endostain双基因共表达质粒pEgY-IFN(Y)-Endostatin.结论成功克隆小鼠Endostatin基因,构建了pEgr-IFN(Y)-Endostatin双基因共表达质粒. 相似文献
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绞股蓝(Fiveleaf Gynostemma Herb)主要有效成分为绞股蓝皂甙,绞股蓝皂甙的化学成分均为四环三萜达玛烷型结构,具有多种药用功能,是一种十分优良的功能性食品原料。本文研究了微波对绞股蓝皂甙提取率的影响。结果表明,绞股蓝皂甙提取率在采用微波助提时比直接水提法有明显的提高,其最佳工艺条件为:微波功率350W,辅助提取时间10min;水浴提取时间90min,水浴提取温度80℃,料液比1:30,溶液pH10。 相似文献
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[目的]建立流式细胞术分析肿瘤细胞内阿霉素分布的方法,并研究低浓度五味子乙素对K562细胞内化阿霉素的影响。[方法]体外培养猪内皮细胞(pEC),以20μmol/L阿霉素处理2、4和6小时;或加入不同浓度阿霉素(0、10、20、40、80和100μmol/L)处理4小时。培养K562细胞,以5μmol/L阿霉素处理2、4和6小时;或加入不同浓度阿霉素(0、2.5、5、10和20μmol/L)处理4小时。采用不同浓度(0、25、50和100μmol/L)五味子乙素(Sch B)与阿霉素联合处理K562细胞4小时。收集细胞,采用流式细胞术分析阿霉素的特异荧光。[结果]固定浓度处理pEC(20μmol/L)和K562(5μmol/L)后检测,发现细胞内荧光强度随时间延长而增加,两种细胞4小时组荧光强度分别达到6小时组的96.93%和95.23%/。在直方图上,阴性和阳性细胞群界限分明。阿霉素(2.5、5和10μmol/L)单独处理细胞的荧光强度分别为26.78±3.34、64.70±6.24和118.35±9.67;添加25μmol/L Sch B实验后荧光强度增加到43.45±4.25、103.74±7.36和146.69±8.32,Sch B显著增加了K562细胞内阿霉素的分布(p<0.05)。[结论]建立的方案可快速测定细胞内的阿霉素分布;低浓度Sch B促进肿瘤细胞内化阿霉素。 相似文献
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针对草珊瑚(三明)中反丁烯二酸的提取工艺的研究,采用超声波法进行优选,用液相色谱法(测量条件:Agilent 1200C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,比例为(2:98),流速为1.0mL/min,柱温30℃,检测波长208nm,出峰时间为1.471min)测定不同条件下样品的吸收峰,以吸收峰大小为指标定性分析从而确立单因素设计正交实验,通过正交实验研究5因素(溶剂浓度、pH、超声波功率、超声波温度、料液比)对草珊瑚中反丁烯二酸的提取效果的影响。通过正交实验最终确立了最优提取工艺:溶剂浓度70%;pH=4;超声波功率50w;超声温度50℃;料液比1:35,提取时间为40min。通过该实验确立最优工艺提取效果好,简便易行。 相似文献
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目的分析西藏地区藏族2型糖尿病患者伴发血脂代谢异常情况,探讨血脂异常对糖尿病患者引起血管并发症方面的临床意义。对象2006年9月至2008年9月在本院住院的藏族2型糖尿病患者112例。方法所有患者根据有无合并血管病变分为两组,两组的血脂检测情况进行对比,同时与154例健康体检者进行比较。结果T2DM患者较对照组血脂显著异常,伴有血管合并症的T2DM患者较无血管合并症的T2DM患者血脂异常情况更明显。 相似文献
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目的为调查研究林芝地区工布江达县猪旋毛虫发病现状、感染率、流行动态、流行病学特点。方法应用购自河南百奥生物工程有限公司的猪用旋毛虫快速诊断试纸条,对工布江达县3个点(措高乡、株拉乡、个体养殖基地)200头猪进行血清学检测。结果工布江达县猪旋毛虫血清学阳性率为零。结论调查表明全县范围内经过一年两次的驱虫,工布江达县猪旋毛虫病的防治总体取得了显著成效。 相似文献
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秦书生 《科学.经济.社会》2004,22(4):59-61
技术创新型企业具有开放性、非平衡性、非线性、涨落性,是一个自组织系统,技术创新型企业具有自主性、自适应、自催化、自调控等自组织特征。技术创新型企业的自组织运行需要一定的社会环境。 相似文献
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西藏的民俗文化博大精深,怎样使旅游者在较短的时间内了解体验,是西藏旅游开发要考虑的问题。本文将在对拉萨桑木民俗村个案的调研基础上,对其存在的问题进行了解析,提出了对拉萨民俗村旅游资源开发的对策。 相似文献
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为了查明莲花山水质的水文地质,化学成分特征和应用价值,先后对清心泉,灵龟吐液进行6次观察和2次水质分析,初步证实:两口井水质清沏明亮,口感好,富含偏硅酸和钠离子,现已测定的各项指标均达以国家饮用矿泉水标准,是一种饮用天然偏硅酸矿泉水。 相似文献
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本文根据西藏地区1971—2000年的汛期逐日降水资料,分析汛期极值降水日数、一日最大降水量、极值降水指数、极值降水量等极值降水统计特征时空分布规律,得出了一些有意义的结论。 相似文献
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研究拉萨SOS儿童村儿童的体格状况和生长发育情况。调查结果发现儿童的身高、体重、胸围和坐高的发育符合一般的生长发育规律,随着年龄的增大而增加。与1982年拉萨市城区儿童比较,7-14岁的儿童在身高、体重、胸围和坐高各方面大多数都有不同程度的增长,增长值最高的年龄组男孩子为12和14岁组,女孩为10、11和14岁组。但总体情况不容乐观,与全国其他城市同等年龄儿童比较差距甚大,这与高原缺氧、儿童缺乏体育锻炼和饮食结构的不合理等有关。建议所有教育工作者、医疗卫生工作者和家长,加强学习,提高认识。 相似文献
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周赟 《中国科学院研究生院学报》2007,24(6):725-728
设K为代数闭域k的有限生成扩域.C:f(x)=ayn为K上曲线,其中f是k上至少有3个单零点的多项式且n>3是正整数,n不是域k的特征的倍数,再设a■Kn,那么曲线C不能定义在k上,即曲线C:(x)=ayn不会k(a)同构于一条k上的曲线. 相似文献