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采用高盐低pH法、改良SDS法、CTAB法、改良CTAB法提取发根农杆菌ATCC11325感染蓼科多年生药用植物虎(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)叶片产生毛状根的基因组DNA,并进行了电泳分析、含量检测及特异PCR扩增.结果表明:改良CTAB法解决了虎杖富含多酚、多糖等类物质难以提取高质量DNA的问题,提取的DNA质量较好,纯度较高,能满足进一步的实验要求. 相似文献
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采用五种方法分别提取欧洲白桦干叶总DNA,进行ISSR-PCR反应,结果表明:CTAB法(方案Ⅱ)提取的干叶总DNA是最佳的PCR扩增模板,ISSR-PCR电泳谱带不仅清晰而且重复性好。 相似文献
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分别采用酚一氯仿法和改进的盐析法对藏獒血液基因组DNA进行了比较提取．并以提取的基因组DNA为模板进行了RAPD-PCR扩增．结果表明．酚-氯仿法提取的藏獒血液基因组DNA在浓度和纯度上均显著的高于改进的盐析法（P〈0．05）,但两种方法所提取的藏獒基因组DNA都可用于RAPD分析． 相似文献
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费燕秋;胡恩香 《玉溪师范学院学报》2013,(8):64-67
运用CTAB法成功提取和检测出滇龙胆根中的基因组DNA,该方法试验成本低、步骤简单、易于操作,且提取的基因组DNA纯度较高,其中的少量杂质则可以通过酚氯仿除去,因此是适合滇龙胆基因组提取的一种有效方法. 相似文献
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采用FTA滤膜从豆制品中直接提取模板DNA,根据蜡样芽孢杆菌的hblA基因设计一对特异性引物进行PCR,并对反应条件进行优化.结果表明该引物能特异性扩增出338 bp的目的条带;不增菌的情况下,PCR检测蜡样芽孢杆菌的灵敏度是102CFU/mL,检测时间为4h. 相似文献
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采用高盐法、硅珠法、改进的经典酚抽提法三种方法提取人血凝块DNA,通过紫外分光光度仪及琼脂糖凝胶电泳测定DNA的纯度和含量.实验结果表明,硅珠法提取时间快,所提取的DNA含量高;经典酚抽提法操作过程简单,但用有机溶剂提取,污染比较严重;高盐法提取要用大量的血凝块,且提取的DNA含量很不稳定.因此,硅珠法是提取人血凝块DNA的一种比较好的方法. 相似文献
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聚合酶链式反应(PCR)在生命科学研究及诸多相关领域已经得到了广泛应用.充分利用等离子体干法刻蚀和各向异性湿法腐蚀的优点,先干法刻蚀,然后进行湿法腐蚀,可以制作出图形准确、底部致密平整、表面光滑、线条较直的PCR生物芯片微反应腔.而通过分析优化加热器材料和温度传感器的形状及尺寸,则可以满足DNA扩增反应对温度均匀性的要求.总体来看,PCR-DNA微阵列杂交集成的生物芯片在某种程度上是信息生物芯片(informalion-bio-chip)和功能生物芯片(function-biochip)的有机集成,但还不够完善,真正意义上的生物微系统应是功能生物芯片与信息生物芯片的进一步组合的产物. 相似文献
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利用单链DNA连接酶可以连接单链DNA的性质将小片段DNA自连成环,随后利用phi29 DNA聚合酶进行恒温滚环复制,将扩增产物进行酶切,得到扩增后的小片段DNA.实验结果表明,单链DNA连接酶能有效地将30bp的小片段DNA自连成环,以phi29 DNA聚合酶扩增出大于10kb的DNA片段,产物经酶切后可进行第二轮扩增,并证明其成环方式为自成环.该方法能有效扩增小片段DNA. 相似文献
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中国西南地区汉族运动员ACTN3基因多态性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
研究对象是西南地区的成年人179名(汉族),其中专业运动员89人(举重23人,跳水29人,水球37人),优秀运动员(健将级)35人.元创提取受检者口腔黏膜基因组DNA,PCR扩增、电泳后,用凝胶成像系统分析ACTN3基因的多态性.结果:1.汉族普通人群组ACTN3基因型频率分别为:RR型0.3444、RX型0.5000、XX型0.1556,经Hardy-Weinberg平衡检验,达到遗传平衡(x2=0.1232,P=0.7256),提示所选人群的资料对总人群具有代表性.2.运动员的ACTN3基因型频率分别为:举重运动员RR型0.2609、RX型0.6522、XX型0.087,跳水运动员RR型0.3448、RX型0.5517、XX型0.1034,水球运动员RR型0.4595、BX型0.324、XX型0.2162;差异具有统计意义(P<0.05).优秀举重运动员中没有XX型,优秀跳水运动员中XX型占4.55%,而优秀水球运动员中XX型占11.11%,提示ACTN3蛋白的存在或缺乏与中国运动员不同运动技能的发展有一定关系.结论:ACTN3基因多态性分析对中国优秀运动员的选拔和培养有一定参考价值. 相似文献
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崔雨荣 《内蒙古师范大学学报(教育科学版)》1998,(4)
遗传学认为,DNA是人体性状及遗传变异的物质基础,它是遗传信息的携带者.DNA决定着我们的肤色、性别、身高、健康状况等个体特征.每个人的DNA都是不完全一样的.在法医学上,往往需要鉴别现场留下的物证是否属于犯罪嫌疑人.传统的方法主要是通过指纹、脚印、唇纹、化学物质等物证进行核对,这在一些情况下能起到作用.然而,有时候犯罪分子相当狡猾,或者现场被破坏的很严重,根本找不到上述痕迹.但是在理论上,只要犯罪分子在现场留下血渍、精斑、头发、阴毛、唾液等,通过分析其中的DNA,仍可查获真凶.另外,也可通过分析在现场找到的死者的残留物(如毛发、牙齿、骨骼等)中所含的DNA,来验明他们的真实身份.以前由于这些物证中DNA的含量甚微,再加上无法排除在分析时受到的干扰,DNA分析还或多或少是一种幻想.直到1985年,诺贝尔奖获得者Kary mullis发明了聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR).再加上1988年Saiki对PCR的重大改进,才使DNA分析在法医学领域的应用取得了惊人的突破.所谓PCR,就是通过特定的DNA序列作为引物,在酶的作用下,经过几十次循环,使目的DNA得以快速复制、扩增,从而得到足以进行检测和分析的目的DNA片段.目的DNA(或称模板DNA)就好象是“轮子”,引物好象有汽车的“方向”,酶好象是“(?)力 相似文献
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从保存于贵州师范大学生科院动物标本室的小麂陈旧皮张中提取DNA。利用线粒体DNA细胞色素b通用引物通过PCR扩增,获得小麂江口亚种（Munuacus reevesi Jiangkouensis subsp．nov．）和小麂指名亚种（Muntiacus reevesireevesi）线粒体DNA细胞色素b基因的部分序列,对二者进行序列比对,计算序列差异,并且用最大简约（MP）和贝叶斯（BI）方法构建系统进化树,结果不能确定江口小麂是小麂的新亚种。 相似文献
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目的：基于全基因组关联分析(GWAS)筛选抗阻训练后等速蹬踏伸肌力训练效果相关的遗传标记,分析遗传标记的可能生物学作用,并建立训练效果预测模型,为个性化健身指导方案的制定提供参考。方法：193名健康成年人完成12周抗阻训练,干预前后测试表型指标(等速蹬踏伸肌力、肌肉厚度、肌肉质量)。采集静脉血并提取DNA,通过Infinium Chinese Genotyping Array v1.0芯片进行全基因组基因分型,PLINK1.9进行全基因组关联分析。采用Lasso回归降维变量,采用Logistic回归、Nomogram列线图和逐步线性回归建立等速蹬踏伸肌力训练效果预测模型。采用HaploReg v4.2、SNPnexus工具对筛选出的遗传标记进行生物信息学分析。结果：1)12周抗阻训练干预后,受试者等速蹬踏伸肌力整体显著增加(Δ=18.02%,p<0.01,ES=0.32),变化范围-58.48%～109.45%。2)rs1419957、rs12326802、rs8010482等19个SNPs与12周抗阻训练后等速蹬踏伸肌力变化百分比显著关联(p<1×10-5 相似文献
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多重PCR技术在植物学研究中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
多重PCR是近几年新兴的一项分子生物学技术,能够同时扩增不同片段.具有高特异性、高灵敏度、高效率、低成本的特点,有普通PCR方法不可比拟的优势.简述了多重PCR技术在植物学研究中的应用现状,分析了影响其扩增效果的因素,并介绍了多重PCR的应用前景. 相似文献
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DNA扩增和DNA琼脂糖凝胶电泳实验首次推广到中学课程教学中。由于中学课时有限、班级人数多、试剂微量、试剂价格较高等诸多实际情况的制约,教学实验组织、指导和安排显得更为重要。在川布兰公司的大力支持下,2009年我校9个班近400个学生顺利完成了此项实验。每班40人共分8个小组,先做琼脂糖凝胶电泳实验(用上一个班所扩增的样品),再做DNA片段的PCR扩增实验,最后观察核酸条带。扩增前模板质粒由学生加入,在实验准备和安排上,尽量给每一个学生操作的机会。此次实验所用试剂盒为川布兰公司提供,总计费用878元。 相似文献
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本文以玉米为实验材料,将其DNA提取后,以特异性引物对常用于控制转基因表达的椰菜花病毒35S启动子进行PCR扩增,并以电泳分析或导流杂交检测是否阳性反应来鉴定材料是否进行基因改造,以此综合实验设计落实学生对分子生物实验基本技术的掌握。 相似文献
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目的：研究单磷酸腺苷激活的蛋白激酶α2亚基(PRKAA2)基因区的单核苷酸多态性(SNP)对高强度间歇训练(HIIT)干预后心肺耐力及糖脂代谢水平的影响,筛选HIIT干预效果敏感的候选基因标记。方法：对259名普通大学生进行为期12周的HIIT干预训练(3次/周),测定干预前后心肺功能以及糖脂代谢指标。提取受试者基因组DNA进行基因分型,Plink软件分析干预前后指标变化值与基因型之间的关联。对多位点相关联的表型,进行多基因遗传易感性评分(GPS),分析GPS与表型之间的相关性;分析多位点可能形成的单体型与指标变化量的关联性。全基因组关联分析(GWAS)平台检索有关联性多态位点的特征,3D SNP在线软件预测位点可能的生物学功能。结果：1)PRKAA2基因区rs706468与HIIT训练后最大摄氧量(■)、肺通气量(VE)变化之间显著相关(P<0.05),AA纯合子为优势基因型;rs3738565与HIIT训练后低密度脂蛋白(LDL)变化之间显著相关(P<0.05),G等位基因为优势基因型;rs17848596与HIIT训练后肺通气量变化之间显著相关(P<0.05),... 相似文献
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《沈阳大学学报（自然科学版）》2015,(2)
利用COⅠ的通用引物,采用PCR法对黑带食蚜蝇(Episyrphus balteatus)线粒体DNA序列进行扩增、测序及比对;4个不同地区的种群分析结果表明:1共获得1041个bp的DNA序列,A、T、G、C的比例分别为40.2%、30.1%、13.1%、16.6%,表现出明显的A+T偏倚性;2经过与GENEBANK已知序列比对,该片断位于线粒体的COⅠ~tRNALEU~COⅡ区域;3共检测到8处(N=20)碱基变异,已经产生了遗传差异,形成1个共有单倍型、7个特有单倍型;4NETWORK分析表明,已经产生明显的遗传分化. 相似文献