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1.
朱国际 《河北北方学院学报(医学版)》2010,27(5)
目的:研究慢病毒载体介导的RNA干扰对有TLR2 或者TLR4表达的小鼠来源的细胞株抑制干扰效率.方法:根据GeneBank小鼠的TLR2 或者TLR4基因mRNA的已知序列,在http://www.ambion.com/techlib/misc/siRNA_finder.htmL,寻找符合特征的靶序列.编码GeneBank模板的体外合成,收获病毒,侵染靶细胞,检测干扰效率.结果:检测表明干扰效果明显,达到80%以上.结论:慢病毒载体介导的RNA干扰是一种高效的基因沉默手段,可以对小鼠TLR基因功能进行长期的研究,检测有关蛋白基因的表达,揭示TLR在当中的作用. 相似文献
2.
目的：探讨复方丹参片早期干预对APP/PS1转基因小鼠学习记忆的影响及作用机制。方法：4月龄野生型小鼠和APP/PS1转基因小鼠分别灌胃给予溶剂或药物8周后,采用新物体识别实验和跳台实验评价复方丹参片对小鼠行为学表现的影响;应用ELISA检测小鼠海马β淀粉样蛋白（β-amyloid protein,Aβ）Aβ40、Aβ42的含量;采用Real time PCR和Western blot分别检测胰岛素分解酶（insulin degrading enzyme,IDE）/脑啡肽酶（neprilysin,NEP）m RNA和蛋白水平的变化。结果：新物体识别实验结果显示,复方丹参片720 mg·kg-1显著性增加APP/PS1转基因小鼠对新物体的识别指数。跳台实验结果显示,复方丹参片720、360 mg·kg-1显著性减少APP/PS1转基因小鼠学习次数,此外,复方丹参片720 mg·kg-1明显增加小鼠在平台的停留时间。ELISA结果显示,复方丹参片720、360 mg·kg-1显著性降低APP/PS1转基因小鼠海马Aβ40、Aβ42水平。Real-time PCR结果显示,复方丹参片720 mg·kg-1显著性上调APP/PS1转基因小鼠海马IDE和NEP m RNA的表达。Western blot结果显示,复方丹参片720 mg·kg-1显著性增加小鼠海马IDE蛋白表达。结论：复方丹参片可改善APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力,可能与减少海马Aβ水平和增加IDE的表达有关。 相似文献
3.
《莆田学院学报》2019,(2):16-20
观察Bmi-1基因沉默对A549细胞体外迁移和体内转移的影响。设计针对Bmi-1的小干扰RNA(siRNA)序列作为靶序列构建重组逆转录病毒siRNA表达载体并将其转染入肺腺癌A549细胞;应用RT-PCR和Western Blot方法检测对Bmi-1基因的沉默效果;应用划痕修复和Transwell方法检测Bmi-1-siRNA对A549细胞体外迁移的影响;通过裸鼠尾输入各组细胞,观察Bmi-1-siRNA对A549细胞在裸鼠体内转移能力的影响。结果显示:沉默Bmi-1基因的表达能够抑制A549细胞的体内外迁移能力,同时降低VEGF的分泌。Bmi-1-siRNA能抑制肺腺癌A549细胞的转移能力,VEGF可能参与其中。 相似文献
4.
《莆田学院学报》2015,(5):11-15
研究Foxp3在三株人肺癌细胞系A549、NCI-H209和95-D中的表达情况及其对肺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。实时荧光定量RT-PCR和Western-blot方法检测Foxp3在三株肺癌细胞系中的m RNA和蛋白水平;构建Foxp3干扰RNA,并瞬时转染A549细胞;MTS细胞增殖实验、细胞侵袭及划痕实验研究Foxp3对A549细胞体外增殖、侵袭以及转移能力的影响。结果:在三株肺癌细胞系中,相对于正常肺上皮细胞,Foxp3的m RNA和蛋白水平均呈高表达,其中在A549细胞中表达水平最高。细胞免疫荧光检测发现Foxp3主要定位于肺癌的细胞质中。瞬转Foxp3干扰RNA至A549细胞,可以明显促进肺癌细胞的侵袭和转移,但是对肺癌细胞的增殖无显著影响。此外,还发现干扰Foxp3表达可以显著上调MMP-9和u PA的表达水平。结果表明,Foxp3在肺癌细胞中呈高表达,其在肺癌中可能发挥抑癌作用。 相似文献
5.
Peng-yan QIAO Fang-fang LI Li-min DONG Tao XU Qiu-fei XIE 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2014,15(4):382-392
研究目的：本研究应用海藻酸钠-壳聚糖微囊保护成骨细胞,接种到β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥（β-TCP/CPC）浆料中,使β-TCP/CPC骨修复材料具有一定的细胞活性,同时提高固化后材料的孔隙率和孔径,以最终实现提高β-TCP/CPC骨水泥的降解速度,加快成骨和骨修复。创新要点：本研究首次应用海藻酸钠-壳聚糖微胶囊包封成骨细胞与CPC浆料复合,复合后实现自动细胞释放,释放出的细胞具有良好的生物学活性。研究方法：（1）高压静电成囊法制备载小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1）的海藻酸钙和海藻酸钠-壳聚糖微胶囊;（2）微囊化MC3T3-E1细胞,进行体外培养,使用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞活性,并用钙黄绿素-AM（Calcein-AM）和碘化丙啶（PI）进行活死细胞双重染色;（3）微囊化MC3T3-E1细胞与β-TCP/CPC浆料复合培养后,激光共聚焦扫描显微镜和环境扫描电子显微镜观测细胞在材料上的释放、粘附,CCK-8法检测材料上细胞的活力,碱性磷酸酶（ALP）检测观察细胞的分化状况,茜素红染色观察释放细胞的矿化能力。重要结论：海藻酸钠-壳聚糖微胶囊可作为可注射磷酸钙骨水泥内部接种成骨细胞并实现细胞释放的良好载体,释放出的成骨细胞具有良好的生物学活性。 相似文献
6.
对虾白斑综合症病毒（WSSV）编码与核酸合成代谢相关的核糖核苷酸还原酶（Ribonucleotide Reductases,RR）,与病毒DNA的复制有关．利用克隆技术将RR基因克隆到L4440载体,构建体内合成dsRNA的大肠杆菌HTn5工程菌．诱导该工程菌合成了RR基因的特异双链RNA（RR—dsRNA）和非特异双链RNA（gfP—dsRNA）,分别与WSSV混合共注射凡纳滨对虾,在感染72h后用病毒检测试剂盒提取DNA模板用于荧光定量PCR分析,结果显示RR—dsRNA能有效抑制WSSV病毒粒子的增值． 相似文献
7.
目的研究阻断CD86协同刺激分子对自然流产模型孕鼠母胎界面TGF-β1和Caspase-3的表达及妊娠结局的影响.方法实验组于妊娠第4.5d腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单抗,对照组注射大鼠同型IgG2b.于妊娠第13.5d计算胚胎吸收率,用免疫组化测定TGF-β1和Caspase-3的表达,并进行图像分析检测免疫组化染色灰度值（A）.结果①实验组的胚胎吸收率显著低于对照组（P〈0.05）②实验组中TGF-β1蛋白的灰度值明显低于对照组（P〈0.05）,实验组中Caspase-3蛋白的灰度值明显高于对照组（P〈0.05）.结论妊娠早期阻断CD86可使母胎界面中的TGF-β1和Caspase-3分别通过各自不同的途径来发挥免疫耐受作用并且使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平. 相似文献
8.
目的：观察姜黄素提取物体外对流感病毒H1N1、H3N2的抑制作用。方法：用狗肾细胞（MDCK）观察姜黄素体外对A型流感病毒H1N1亚型、A型流感病毒H3N2亚型病毒的直接杀灭作用。结果：姜黄素最大无毒浓度为12．5g／L,对H1N1有效抑制浓度为6．25g／L,对H3N2有效抑制浓度为1．56g／L。结论：姜黄素提取物确有明显的抗H1N1、H3N2复制作用。 相似文献
9.
目的：观察不同剂量头孢曲松钠对雄性小鼠精子的影响,探索头孢曲松钠对雄性小鼠生殖细胞的影响.方法：取44只健康成年雄性小白鼠随机分为对照组、实验A组、实验B组、实验C组,每组11只进行实验.实验A、B、C组分别注射头孢曲松钠16.5mg/Kg.d、33mg/Kg.d、66mg/Kg.d,对照组腹腔注射等量生理盐水.连续注射7天,于首次注射第28天脱臼处死小鼠,观察小鼠精子的活率、畸形率、精子膜低渗肿胀率（HOS法）.结果：各实验组小鼠精子活率低于对照组（p〈0.05）,畸形率极高于对照组（p〈0.01）,实验组随头孢曲松钠剂量的增加其精子膜完整性呈下降趋势且与对照组相比极差异极显著（p〈0.01）.结论：头孢曲松钠对雄性小鼠的精子有不良的影响. 相似文献
10.
RNAi的研究及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
RNA干扰（RNA interference,RNAi）是由双链RNA（double-stranded RNA,dsRNA）引发的转录后基因沉默机制．RNAi可以调节和关闭基因的表达,进而调控细胞的各种高级生命活动,是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制．目前RNAi的研究取得了很大进展,有可能为肿瘤基因治疗提供新策略． 相似文献
11.
目的：探讨前期研究筛选出的丹参七种水溶性有效成分最优配伍组合样品A2、B4、C11对脑缺血再灌注（ischemia reperfusion）小鼠学习记忆的保护作用。方法：采用改进的Himori法暂时性阻断两侧颈总动脉制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型,应用水迷宫实验,观察配伍组合样品对脑缺血再灌注小鼠记忆功能的保护作用,检测小鼠断头耐缺氧存活时间,脑组织中超氧化物歧化酶（superoxi dedismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、乙酰胆碱酯酶（aeetyleholine esterase,ACHE）活力及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。免疫组织化学方法检测小鼠海马神经元凋亡相关天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（cysteine-asparate protease-3,caspase-3）和神经生长因子（nerve growth factor,NGF）的表达。结果：丹参7种水溶性有效成分配伍组合样品B4、C1l可明显改善小鼠脑缺血再灌注所致的记忆障碍,增强耐缺氧能力,提高脑内SOD,CAT活性,降低AChE活性和MDA含量;抑制凋亡蛋白caspase．3表达,上调NGF表达。其中以B4（2．8μm01·L-1）、C11（30．0iμmol·L-1）组作用最为明显（P〈0．01）,A2各个剂量组效果不显著（P〉0．05）。结论：丹参7种水溶性有效成分配伍组合样品B4、C11对脑缺血再灌注损伤小鼠记忆功能有保护作用,其机制可能通过提高清除脑内自由基能力,抑制小鼠神经细胞凋亡,促进神经再生,来减轻脑缺血再灌注引起的脑组织损伤。 相似文献
12.
IMP3（胰岛素生长因子Ⅱ的mRNA的结合蛋白3）是一个新发现的癌胚胎的RNA结合蛋白,研究发现其参与细胞生长和细胞迁移在胚胎发育的早期阶段．该研究利用实时定量逆转录PCR对IMP3在乳腺癌的诊断和治疗中的应用潜力进行了研究和评估．检测了不同类型乳腺癌样本中IMP3的表达情况,定量PCR结果分析中应用2也小。方法进行了归一化比较．研究结果表明,IMP3基因表达与乳腺癌病人肿瘤的大小及淋巴转移存在明显的相关性（P〈0．01）．不同的临床阶段和病理分期与IMP3的表达水平之间也存在一定的相关性,表明差异不显著（P〉0．05）．该研究表明IMP3作为一种新的肿瘤相关因子,其表达水平与乳腺癌也存在一定的相关性,显示了其作为一种潜在的肿瘤标志物的可能性． 相似文献
13.
根据电场能促进骨细胞生长这一生物学特点,设计一种新型的既能填充骨缺损又能刺激骨细胞形成的仿生人工骨材料,从众多的压电陶瓷中选取BaTiO3、从活性生物材料中选取Ca3（PO4）2为主要原料,辅以助熔剂、成孔剂等添加剂,合成压电相与磷酸三钙复合型生物陶瓷人工骨（BTTCP）,确定合适的制备工艺,并用XRD、SEM、EPMA等现代测试手段对其组成、性能及微观结构的关系进行探讨和分析,为骨缺损的修复探索一条新途径. 相似文献
14.
根据已发表的序列，通过PCR技术克隆了一系列构建烟草叶绿体多顺反子表达载体所需的元件：质体核搪体（16S）RNA操纵元启动子（Prrn）、质体面A基因3’端（psbA3’）、山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因（BADH）、烟草叶绿体高频同源重组片段（psaA／psbC，大小3463bp）、甘露聚糖酶基因（man）、绿荧光蛋白基因（gfp）。构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM7（-psaA-Prrn-SD-man-SD-gfp-SD-BADH-PSBA3’-PSBC-）。并在大肠杆菌中通过平板定性分析等方法对所构建载体上的表达盒进行了功能鉴定。 相似文献
15.
西江流域有机氯农药含量组成特征及年通量 总被引：1，自引：0，他引：1
刘艳霖 《深圳信息职业技术学院学报》2008,6(4):76-80
用固相萃取和气相色谱法对西江（珠江的主干）进行了为期1a的水相和颗粒相中17种有机氯农药（OCPs）测定。结果表明,水相OCPs的含量范围在2．28～10．21ng／L之间,颗粒物是OCPs的含量变化在20．29-58．74ng／g之间,经过分析得出西江水体中,有机氯农药主要以水相为主,颗粒物中农药所占比例远小于水相中。就OCPs来讲,研究区水质符合国家I类水标准。其来源方面地表径流对此有很大的贡献。西江中六六六类、DDT类和总OCPs的年通量为272．3,164．6,1245．3kg。 相似文献
16.
曲静 《邢台职业技术学院学报》2011,28(6):10-12
迁移（transfer）是行为主义心理学上的术语,是指对A任务的学习会影响到对B任务学习的结果。在语言学研究领域中,语言迁移（language transfer）是描述二语学习过程中母语对二语学习产生影响的术语。迁移可以有正迁移（facilitation）和负迁移（interference）。母语迁移既体现在对二语输入的理解过程中,又体现在二语输出的产生过程中。本文根据录音材料分析了英语学习者口语表达中母语负迁移引起的其中介语（interlanguage）中各种错误。尝试着提出正确对待母语负迁移的方法。 相似文献
17.
目的:观察表达不同接头(Linker)长度的巨噬细胞源趋化因子(MDC)与CVB3VP1融合基因疫苗的免疫效果.方法:将6～8周龄雄性BALB/C小鼠随机分为A～D 4组,分别肌肉注射pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-L10-VP1、和pcDNA3/MDC-L19-VP1,每次接种100μg/只,4周注射一次,共3次,第3次免疫后3周,每组取3只小鼠,制备脾细胞,用CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;每组取3只小鼠以3LD50CVB3病毒攻击,第7天处死,取心脏,制备石蜡切片,观察各组小鼠心肌病理学改变;每组取8只小鼠用5LD50的CVB3腹腔内攻击,观察并记录小鼠死亡情况至感染后的第21天.结果:第3次免疫后,D组中小鼠脾淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性显著高于其它各组(P<0.01);以5LD50CVB3感染小鼠后,D组小鼠存活率最高;以3LD50CVB3病毒攻击后,D组小鼠心肌病理改变最轻.结论:融合基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1能诱导小鼠对CVB3VP1产生较强的特异性免疫应答,提高小鼠的生存率. 相似文献
18.
目的观察补肾中药骨灵片对去卵巢大鼠腰椎的骨形态计量学及生物力学影响,进一步探讨骨灵片治疗骨质疏松症的机理。方法选择3月龄SD大鼠36只,分为空白对照组(即假手术组,A组)、去卵巢组(B组)、骨灵片低(C组)、中(D组)、高剂量组(E组)、雌激素组(F组),每组各6只。分别给予生理盐水、骨灵片高、中、低剂量、雌激素灌饲3个月。取第3腰椎包埋切片,检测骨形态计量学参数的改变。结果与去卵巢组,骨灵片各剂量组尤其是中、高剂量组在骨小梁面积百分数、厚度、数量上显著升高,骨小梁分离度、骨形成率、骨矿化沉积率、每毫米破骨细胞数显著下降。结论补肾中药骨灵片具有促进骨形成和抑制骨吸收的作用,使骨结构得到改善。 相似文献
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目的从昆明鼠睾丸中克隆Bmi1基因,构建真核表达载体,并转染支持细胞,以便用作培养精原干细胞（SSCs）的滋养层.方法以5日龄昆明鼠为材料,提取小鼠睾丸组织中总RNA后,以RT-PCR技术克隆小鼠睾丸Bmi1基因,构建真核表达载体,并转染TM4细胞（睾丸支持细胞株）,在转染后40 h进行免疫荧光鉴定.结果成功克隆小鼠睾丸Bmi1基因的cDNA,测序正确;免疫荧光细胞染色显示,转染后的支持细胞中有Bmi1蛋白表达.结论本研究为以转染了Bmi1基因的支持细胞作饲养层培养SSCs奠定了基础. 相似文献