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相似文献
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1.
高质量的基因组DNA是进行分子生物学实验的前提。为此,本研究通过从动植物组织和细胞中分别提取DNA,探索了一种通用的基因组DNA的提取方法。本方法所提取到的DNA纯度高、适合后续PCR扩增。  相似文献   

2.
浙江省12个主栽茭白品种亲缘关系的RAPD分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
采用RAPD技术构建了12个浙江主栽茭白品种的RAPD指纹图谱。利用河姆渡双季茭作为模板从50个随机引物中筛选出稳定且多态性高的7个引物用于茭白DNA的PCR扩增,共产生45条DNA片段,平均每个引物的扩增带为6.4条,其中15条扩增带具有遗传多样性。约占总DNA片段的33.3%。利用相似性聚类分析对PCR扩增产物进行二态性数据分析,结果表明,在相似系数2.1处可以将12个茭白品种分为5个聚类群,其中9个浙江本地品种间的遗传距离较近。初步结果也表明,单季茭与双季茭间的遗传差异比同一类型中茭白品种间的差异显著。  相似文献   

3.
PCR技术快速鉴别牛、羊、猪皮革的初步探讨   总被引:1,自引:0,他引:1  
提取牛、羊、猪3种动物皮革组织中的DNA,设计了3对特异性引物,PCR扩增,初步建立了这4种动物皮革成分的鉴定方法。DNA的提取的质量及其后的PCR鉴定依赖于皮革的加工程度,如何从皮革成品中提取有效的核酸信息需进一步研究。  相似文献   

4.
本实验分别采用酚———氯仿抽提法、快速抽提法、胍盐酸提取法和天为时代试剂盒法对蒙古马血样进行基因组DNA的提取,再利用琼脂糖凝胶电泳技术、紫外分光光度计和PCR扩增技术,对提取得到的DNA纯度、浓度及实用性进行检测,从而选择一种高效、快速、经济的从蒙古马血液中提取基因组DNA的方法。  相似文献   

5.
DNA条形码技术是一种新型的生物身份识别系统,能够利用鉴别物种内的一段标准的、具有足够变异性、并相对较短且易扩增的DNA片段对生物物种实现快速的自动鉴定。本研究首先采用试剂盒提取法从17个贝母种79个样品中提取了基因组DNA,并进行了纯度与浓度鉴定;然后采用ITS1、ITS2序列引物进行PCR扩增和产物测序,最后进行序列比对,以明确DNA条形码序列ITS1和ITS2在浙贝母种质资源中的鉴定效果。结果发现,浙贝母地方种间的ITS序列差异不大,ITS序列对浙贝母种内分辨率过于低下。由此表明DNA条形码ITS1、ITS2序列并不太适合用作浙贝母的DNA条形码技术。  相似文献   

6.
大黄鱼基因组DNA的提取及其RAPD分析条件的探索   总被引:9,自引:0,他引:9  
通过实验筛选出一种快速、简便提取大黄鱼基因组 DNA的方法 .以该法提取的大黄鱼基因组 DNA为模板 ,对大黄鱼 RAPD分析中的 DNA模板浓度、镁离子浓度、d NTPs浓度、引物浓度和 Taq酶浓度进行了研究 ,初步确定了适于大黄鱼 RAPD分析的最佳反应体系 :2 5μL反应体系中 ,含模板 DNA2 5 ng,1 0× PCR缓冲液 2 .5μL,d NTPs1 0 0μmol/L,Mg Cl2 2 .5 mmol/L,引物 0 .2μmol/L,Taq DNA聚合酶 1 .0 μmol/min.  相似文献   

7.
本文对污泥干化芦苇床中芦苇内生菌总DNA的提取方法进行了研究,实验经过摸索后采用Soil DNA Kit提取基因组DNA对不同来源的芦苇内生菌群总DNA进行提取。利用PCR技术对不同来源的总DNA的提取方法进行了对比分析。以期应用分子生物学技术研究和评价芦苇共生菌群改变,从而为改善芦苇床工艺设计提供生物学证据。  相似文献   

8.
对采自广西、云南、江西、湖北4省共11份葛根种质资源进行了ISSR多态性及聚类分析。结果表明,从90个ISSR引物中筛选出12个引物,共扩增到98条带,平均每个引物可扩增5.67条多态性DNA片段,其中多态性带有68条,多态性比率为69.39%,遗传相似性系数范围为0.65-1.00。经UPCMA聚类分析,将11份葛根资源分为2个大组,4个亚组。11份葛根材料的遗传相似性较高,可为葛根种质鉴别、选育及合理利用提供参考。  相似文献   

9.
利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对14个枣Ziziphus jujuba 品种和1个野生种——泰山酸枣Z.spinosus的遗传变异进行了研究。从120个10-碱基随机引物中筛选出37个多态性引物用于正式扩增,共扩增出429条DNA带,其中多态性带214条,占49.88%。根据DNA扩增结果计算了品种及类型间遗传距离,并用UPGMA构建了聚类树状图。分析结果表明:龙爪枣 Z.jujuba var.tortuosa、葫芦枣 Z. jujuba var.lageniformis、无核枣 Z.jujuba var.anucleatus 等几个变种内的遗传距离大于变种间遗传距离,认为枣的变种划分是不自然的,宜并入其原变种;枣种下不宜设变种,对枣种下的众多品种,应根据品种间的遗传关系,直接划分品种群。  相似文献   

10.
1993年凯利·穆利斯因为发明PCR技术而荣登诺贝尔颁奖台。什么是PCR?它是指“DNA聚合酶链式反应”(polymerase chain reaction, PCR), 其原理是:在存在DNA模板、引物、dNTP、适当缓冲液的反应混合物中,在热稳定DNA聚合酶的催化下,对一对寡核苷酸引物所界定的DNA片段进行扩增。说得简单些,就是一种DNA分子的特异扩增技术,即将微量的特异DNA分子进行成倍扩增。PCR技术最大的优点在于它能  相似文献   

11.
利用10对AFLP引物,对43份来自西藏地区部分野生类型油菜种质基因组DNA进行扩增,共得到276条清晰的谱带,其中214条呈多态性,多态性位点比率为77.5%,平均每对AFLP引物得到21.2条多态性带。通过NTSYS软件聚类分析,可将供试材料分为两大类群,并把西藏各地方来源及类型不明确的野生类型油菜划分到相应的类群中,从而对这些材料进行初步的鉴定,以充分利用野生类型油菜丰富的遗传资源,培育优良的油菜新品种。  相似文献   

12.
目的:建立简便、快捷、稳定可靠的鉴定小鼠基因型方法,维护动物伦理福利。方法:基因敲除小鼠后代鉴定时,分别从鼠尾,鼠耳,趾甲三个部位提取DNA,通过优化DNA提取技术,经分光光度计检测,PCR扩增等技术,比较分析DNA纯度、提取时间,及基因型鉴定结果。结果:取组织提取DNA,经分光光度计检测,发现DNA浓度尾尖最高,耳尖次之,趾甲浓度最低,但是纯度最好。经PCR扩增技术发现不同基因型的不同部位提取DNA鉴定结果一致。结论:剪趾甲提取DNA操作方法相对于其他常规方法,操作简单,耗时最短,基因型鉴定结果可靠,对小鼠本身伤害更小,可用于规模化的小鼠基因型鉴定实验中。  相似文献   

13.
大学学报     
《中国科技信息》2011,(2):10-14
槟榔基因组DNA提取及ISSR反应体系的优化Extraction of Genomic DNA of Areca catechu L.and Optimization of Its ISSR-PCR System摘要以槟榔为试验材料,用改良的CTAB法提取基因组DNA,并设置不同梯度分别对每个PCR反应因子做了相应的试验.结果表明:  相似文献   

14.
本文对原种猪场3头无血缘关系的台系杜洛克种公猪前腔静脉采血,以ACD抗凝,采用4种不同方法(苯酚-氯仿法、改良CTAB法、试剂盒法、Chelex-100法)对采取的猪血基因组DNA进行提取,并以所提取的基因组DNA为模板,采用紫外分光光度计对其进行浓度和纯度的定量检测;采用琼脂糖凝胶电泳法对其进行定性检测;并对RAPD反应体系进行优化设计,用优化后的RAPD体系进行PCR扩增。  相似文献   

15.
用PCR技术筛选小分子DNA重组菌落的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
为解决小分子DNA与质粒载体连接,转化入大肠杆菌后,蓝白斑不能很好鉴别非重组菌落与重组菌落的问题,本实验拟建立用PCR技术快速筛选小分子DNA重组菌落的方法,并对比研究特异引物扩增和通用引物扩增的可靠性。  相似文献   

16.
从满江红Azolla Lam.萍-藻共生体中提取DNA进行的RAPD系统分析通常忽视了满江红样品的异质性。本研究通过获得无藻的满江红,比较有藻萍、无藻萍和离体藻之间的RAPD指纹图谱。发现从有藻萍中提取DNA的扩增反应来源于萍藻双方DNA的共同影响。依引物和植物样本的不同,共生双方对扩增产物的贡献结果不同,说明了用无藻萍进行RAPD检测的重要性。对满江红三膘组5个种的11个无藻萍样本进行了RAPD分析,由9个引物产生的127个DNA多态片段用于计算样本间的Jaccard相似系数和UPGMA树状聚类图。结果  相似文献   

17.
本研究根据马、驴线粒体DNA中的保守区段设计了一对引物,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)采取马、驴、牛、羊、猪、鸡、兔、鹿、火鸡等实验材料进行扩增,可以专一地扩增出马、驴源性成分的DNA片段,再经限制性内切酶Sau 3A和Alu Ⅰ的酶切鉴定可以区分马源性成分和驴源性成分,PCR扩增产物的测序结果验证了酶切鉴定结果的正确性.引物灵敏度测试结果表明该方法的检测低限均达0.3%,该对引物可以成为检测马、驴源性成分高效准确的检测工具.  相似文献   

18.
郭旭东  侯冬霞  毛舒燕  旭日干 《科技通报》2007,23(4):479-482,486
根据小鼠超高硫角蛋白(UHS)基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物,以小鼠全血提取的总DNA为模板,PCR扩增出688bp的特异性片段,连接到pMD19T载体中获得该片段克隆p19TU。经过快速提取质粒法筛选、限制性内切酶分析证明该克隆就是UHS基因5’端的调控区序列。序列分析结果也表明该克隆片段与原基因调控序列相比具有很高的一致性。研究结果为今后制备转基因克隆动物、在毛囊细胞中特异性表达绒毛生长调控基因奠定了基础。  相似文献   

19.
朱华  杜沛霖  周雨晴  邹登峰 《大众科技》2013,(6):165-166,61
目的:建立广西产地钱(Marchantia polymorpha L.)拳卷地钱(Marchantia convoluta gao et chang.)和粗裂地钱(Marchantia paleacea Bertol.)的分子鉴别方法。方法:利用RAPD(random amplified polymorphic DNA)技术。结果:采用改良的CTAB法提取地钱、拳卷地钱、粗裂地钱3种植物的总DNA均适用于22引物对供试材料DNA进行随机扩增,共扩增出145条谱带,多态性条带128条,占扩增总条带的88.3%,平均多态性百分率为89.8%;三种地钱遗传距离为0.3713-0.4107、Nei′s遗传一致度为0.5893-0.6287。结论:RAPD技术对广西产地钱、拳卷地钱、粗裂地钱进行分子鉴定是有效的。RAPD分析。  相似文献   

20.
本研究根据马、驴线粒体DNA中的保守区段设计了一对引物,通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)采取马、驴、牛、羊、猪、鸡、兔、鹿、火鸡等实验材料进行扩增,可以专一地扩增出马、驴源性成分的DNA片段,再经限制性内切酶Sau3A和Alu I的酶切鉴定可以区分马源性成分和驴源性成分,PCR扩增产物的测序结果验证了酶切鉴定结果的正确性。引物灵敏度测试结果表明该方法的检测低限均达0.3%,该对引物可以成为检测马、驴源性成分高效准确的检测工具。  相似文献   

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