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限制性片段长度多态性（RFLP）、随机扩增多态性（RAPD）、扩增片段多态性（AFLP）和微卫星（SSR）等DNA分子标记技术被广泛地应用于生物学各领域,为濒危物种、珍稀物种的保护提供分子水平上的理论依据。本文重点论述了DNA分子标记在动物保护生物学中,如遗传多样性的检测、分析群体遗传结构、确定分类地位、探讨物种的系统发生关系、亲子鉴定等方面的应用。 相似文献
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分子生物学技术在苔藓植物系统分类研究中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
经典苔藓植物系统分类研究在科属划分、系统位置等方面存在较大争议,分子生物学技术应用于苔藓植物系统分类研究是对经典分类研究的重要补充。应用在苔藓系统分类研究中的分子生物学技术主要包括DNA序列分析技术随机扩增多态性DNA（RAPD）、限翩性片段长度多态性（RFLP）技术和同工酶分析技术等。基于分子生物学技术的苔藓分子系统学与经典分类学相结合,将为苔藓植物系统演化、科属地位划分、物种鉴定等研究提供更多的可靠证据。 相似文献
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作者利用PCR技术进行了南方鲇（Silurus meridionalis）和鲇（Silurus asotus）五个地理种群线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）限制性片段长度多态性（RFLP）研究。这五个地理种群是长江上游支流（四川境内的雅砻江、岷江、宜宾、贵州遵义的乌江）和长江中游支流沅江上游的渎阳河。选用10种限制性内切酶水解,只有HaeⅢ产生了限制性片段长度多态性。结果发现：南方鲇在野生种群和养殖品种间有分子遗传标记;鲇在长江上游支流各野生种群和长江中游支流溴阳河种群间有分子遗传标记;但在该基因片段上没有鉴别南方鲇和鲇的分子遗传标记。 相似文献
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真菌的分子生物学鉴定方法 总被引：1，自引：0，他引：1
真菌的分子生物学鉴定的方法及原理,真菌DNA碱基组成的分类鉴定、DNA分子杂交、真菌mtDNA限制性片段长度分态性的分析以及随即扩增多态性DNA分析。 相似文献
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为了规范管理涉及动物的经济活动,打击违法犯罪行为,保护野生动物资源,在规范管理和保护执法的过程中,必然要对涉及到的动物进行物种鉴定．文中介绍了动物物种鉴定常用的形态鉴定法、显微镜镜检法、理化检验法、蛋白质分析法乖免疫学鉴定法等5种非DNA方法及其在实践中的使用概况,并分别对每种方法在鉴定中的应用进行了评价．在此基础上认为一类方法解决所有动物物种鉴定问题是不可能的,最后提出鉴定方法的方便、快捷,鉴定成本的低廉,多学科的交叉以及与计算机技术的联合是动物物种鉴定的发展方向． 相似文献
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阚劲松 《合肥联合大学学报》2003,13(4):93-98
应用PCR技术，从大肠杆菌中分别扩增出16S、23S核糖体RNA基因(rDNA)，以［a-^32P]bATP经缺口平移法标记rDNA后作为广谱探针。选用BamhI、EcoRI、HindⅢ等不同限制酶，对肠杆菌科细菌及一起沙门氏菌食物中毒暴发分离株进行染色体DNA酶切。凝胶电泳分离各片段后，通过Southern杂交。获得各菌株rDNA指纹图。每个细菌都可以从rDNA的限制性片段长度多态性(RFLP)得到鉴定。rDNA指纹图显示出种特异性。明确地区分出引起食物中毒的可疑传染源。该法特异性强、重复性好，既可用于细菌的分类鉴定。也可作为分子流行病学调查的工具。 相似文献
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DNA分子标记技术及其原理 总被引：10，自引：0，他引：10
综述几种DNA分子标记技术：RFLP是用限制性内切酶切割不同个体基因组DNA后，含同源序列的醇切片段在长度上的差异，可靠性较高、但操作烦琐，信息含量低；染色体原位杂交是利用特异性核酸片段作探针，直接同染色体DNA片段杂交，在染色体上显示特异DNA，准确、直观，但技术非常复杂；PCR是模仿DNA在生物体内的自然复制过程来扩增DNA片段，安全性好，快速易行；RAPD是以人工合成的碱基顺序随机排列的寡核苷酸单链为引物，对所研究的基因组DNA进行PCR扩增，产生多态性的RAPD片段，可以检测多个基因位点，但不能识别杂合子位点；AFLP指纹技术是在RFLP与RAPD两种指纹技术基础上建立和发展起来的，有较高的稳定性，但对基因组纯度和反应条件要求较高；DNA芯片技术是一种以杂交测序基本理论为基础的新型生物技术，用于测序、基因表达、疾病诊断等，但造价、探针的密度与纯度还有待完善；小卫星DNA一般与RFLP技术结合以获得小卫星DNA指纹图谱，信息含量高，但它在染色体上分布不均匀；微卫星DNA既可用作探针获得指纹图谱，也可通过PCR方法进行微卫星位点多态性分析，但工作量大；ISSR即内部简单重复序列，也是一种新兴的分子标记技术，具有很好的稳定性和多态性。 相似文献
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DNA条形码技术是一种分类方法,它利用一个短的DNA片段做标记,以帮助确定某一物种。线粒体COⅠ基因的序列作为DNA条形码在大部分动物中是十分有效的。对于植物,人们正在测试叶绿体DNA中rbcL和matK基因等组合作为DNA条形码的有效性。DNA条形码作为生物＂种水平＂鉴定的工具,是传统物种鉴定的补充。 相似文献
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利用PCR-RFLP技术对30只草地藏系绵羊的cyp19基因第9内含子和启动子2进行多态性分析,结果表明:对第9内含子-547-773这一区域扩增获得的目标片段,经限制性内切酶HaeⅢ酶切后出现两种基因型:CC和CG,基因型频率分别为0.533、0.467,处于Hardy-wei 平衡状态;而对启动子2序列-683-1199这一区域扩增所获的目标片段,经限制性内切酶DraI酶切后未出现多态. 相似文献
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目的是建立一种简便、快捷的脆性X染色体综合征的临床检测方法.在常规PCR的基础上,采用热启动法,同时加入PCR增强剂Btaine、DMSO,对20例表型正常人群外周血样本进行FMR1基因（CGG）n重复序列检测.结果表明,改良后的FMR1基因PCR扩增技术能够高效扩增CG富集区,采用该方法我们检测了20例外周血样本均获得目标片段,PCR扩增产物片段长度400～500bp（相当于n=20～53）.因此,该方法简便、快速、经济而且重复性好,可用于群体普查和门诊快速筛查脆性X染色体综合征. 相似文献
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山西果蝇物种调查报告 总被引：1，自引：0，他引：1
果蝇是四大模式动物之一,在山西还没有果蝇物种的记录。作者于2006—2007在山西的历山、运城,临汾、晋中对果蝇科的物种进行采集,用外形特征和外生殖器解剖特征相结合的方法进行鉴定。共报道了山西果蝇科、果蝇属与花果蝇属15种。 相似文献
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Gabriel PEREZ Valentina VERDEJO Clarissa GONDIM-PORTO Julieta ORLANDO Margarita CARU 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2014,15(11):966-978
研究目的：开发具有种属特异性序列特征性扩增区域（SCAR）标记物来监测哈茨木霉在其入侵的试验菌群中的定殖和生长,为哈茨木霉应用于生物防治等生态和生物技术中提供支撑。
创新要点：多种木霉属真菌能与各种微观和宏观的生物有机体建立相互作用。利用这些相互作用,木霉可做为原生种群的入侵物种而用于生物防治。本文通过使用试验菌群为研究模型,利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术和序列特征性扩增区域（SCAR）标记物来监测菌群中哈茨木霉的生长状态。
研究方法：利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术,从16个10聚体引物进行多态性筛选,其中1个引物扩增出对应哈茨木霉的条带。对该条带进行克隆测序,并设计5个20-23聚体引物。成功利用引物对2F2／2R2和2F2／2R3278分别特异性地扩增出哈茨木霉BpTloa菌株278bp和448bp的DNA片段。同时,用这两个引物对14个哈茨木霉菌株和几种不同的真菌菌株进行特异性对照试验,也只成功扩增出哈茨木霉菌株。此外,使用真菌DNA混合物和试验真菌群的DNA为模板,采用实时聚合酶链式反应（PCR）对引物对2F2／2R2进行评估。当仅使用100份SCAR标记物或哈茨木霉仅占整个菌群的0．1％时,仍能检测出哈茨木霉。
重要结论：本研究所建立的SCAR分子标记能有效监测菌群中的哈茨木霉的定殖和生长,具有较高特异性、灵敏度和准确度。 相似文献
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探讨CTLA-4基因多态性与肺结核易感相关性,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析病例组和对照组中CTLA4基因功能性多态位点（＋49A/G、-1661A/G、-1772T/C）;研究结果显示CTLA-4能下调免疫应答,抑制T淋巴细胞活化;CLTA-4具有基因多态性,影响mRNA转录的稳定性;CTLA-4基因的功能和表达对由T细胞介导的肺结核免疫有重要影响;揭示了结核病易感相关性的分子基础,找到有效控制肺结核的方法。 相似文献
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目的：用PCR-RFLP技术,对慢性牙周炎患者龈下菌斑中厌氧菌进行分型.为建立更为合理的分型方法提供依据.方法：选取符合标准的慢性牙周炎患者,提取其龈下菌斑.厌氧条件下分离培养,获得厌氧菌菌株,在血平板培养基培养观察菌落的形态,通过染色观察菌株形态学特征,提取各菌株DNA,利用细菌16sDNA通用引物进行PCR扩增,以限制性内切酶MSP I对分离的22株厌氧菌的PCR扩增产物进行RFLP分型分析.结果：慢性牙周炎患者龈下菌斑中厌氧菌分为二大类.结论：采用PCR-RFLP用于厌氧菌的分型研究较为可靠,对于确定有争议菌种的分类具有重要的意义. 相似文献
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目的：探讨β-细胞腺苷三磷酸一敏感性钾通道（potassium inwardly—rectifying channel,subfamilyl,member 11,KCNJ11）基因E23K多态性与湖北汉族人群2型糖尿病的相关性。方法：采用同胞对（家系内对照）和随机病例一对照两种实验设计,利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术分析湖北地区443例样本KCNJ11基因E23K多态性。并测定身高、体重、腰围、臀围、血压和空腹血糖等生理生化指标。结果：随机病例一对照实验设计中,病例组与对照组的基因型频率与等位基因频率有显著性差异（P〈0．05或P〈0.01）。结论：在湖北汉族人群中,2型糖尿病的发生发展与KCNJ11基因E23K多态性相关联,KCNJ11基因是湖北汉族人的一个2型糖尿病易感基因。 相似文献
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几种苎麻园土壤微生物总DNA提取方法比较 总被引：1，自引：0，他引：1
实验设计对比了苎麻园土壤微生物总DNA6种提取方法。方法Ⅰ采用裂解酶、蛋白酶K、SDS与CTAB处理;方法Ⅱ结合利用CTAB、SDS、LDS和BME;方法Ⅲ综合采用玻璃珠、CTAB和SDS法;方法IV结合利用SDS-GITC-PEG;方法V利用尿素、SDS、LDS和BME综合处理;方法VI则利用试剂盒处理土壤。6种方法都可以提取到23kb左右的DNA片段,经过TENP和PVPP方法预处理的土壤样品,能有效去除腐殖酸等污染物,且提取得到的土壤总DNA完整性好、纯度高,不需要纯化就可用于PCR扩增。但不同方法取得的DNA的片段长度、产量和纯度存在明显差异。通过比较,改进并建立了可用于宏基因组构建的高纯度、大片段DNA的方法。 相似文献
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郭东升 《河南科技学院学报》2007,35(2):21-24
综述了性别决定的生物学机制和性别决定基因（SRY）的定位、结构、功能、表达特异性及其作用的分子机制,在此基础上阐述了SRY在奶牛精子性别控制与胚胎性别鉴定中的应用,着重介绍了用于胚胎鉴定的PCR扩增法和DNA探针法。 相似文献