静脉注射用人SARS特异性免疫球蛋白的研制     

张战洪计灵  张信郭采平  李昆成张剑平李冲之  杨海峰丁玉江 黄肖武 《深圳特区科技》2005,(11):164-170

目的：研究适合的蛋白纯化和病毒灭活工艺，制备静脉注射用人SARS特异性免疫球蛋白。方法：采用低温乙醇和离子交换层析相结合的工艺进行分离纯化，在分离纯化过程中对血浆进行S／D病毒灭活，对原液进行纳米膜过滤去除病毒。对产品的SARS抗体效价、灭活剂残余含量进行检测，对血浆S／D病毒灭活工艺进行验证。结果：产品的各项质量指标符合静脉注射要求，产品中SARS抗体效价经ELISA法检测为1：83，产品中灭活剂TNBP和Triton-X100的残余含量均〈5．0ug／ml。病毒灭活方法经验证可以有效灭活指示病毒。结论：本蛋白纯化工艺可操作性强、产品质量稳定，为从突发病毒性疾病患者康复期血浆中小规模提取特异性免疫球蛋白提供了一种适合的方法。  相似文献   

不同灭菌方式对病毒灭活血浆制品质量的影响研究     

《黑龙江科技信息》2017,(1)

目的:探讨亚甲蓝光化学法与巴斯德液态湿热法不同灭菌方式对病毒灭活血浆制品质量的影响。方法:随机抽取我市中心血站无偿献血血液标本10份分离新鲜血浆后,分别采用亚甲蓝光化学法与巴斯德液态湿热法对其进行病毒灭活,对病毒灭活后血浆中的纤维蛋白原、总蛋白和凝血因子Ⅷ的含量进行检测。结果:经亚甲蓝光化学法进行病毒灭活后血浆中纤维蛋白原、总蛋白和凝血因子Ⅷ的含量均显著高于巴斯德液态湿热法,差异具有统计学意义(p0.05)。结论:亚甲蓝光化学法灭活病毒的血浆,对血浆成分的影响较小。  相似文献   

抗哈氏弧菌卵黄抗体不同提取方法比较研究     

胡伟丽  闫茂仓  谢起浪  陈少波  艾为明 《科技通报》2011,27(4)

比较了苯酚法、冷乙醇法、硫酸铵法和辛酸-硫酸铵法4种方法分离提取抗哈氏弧菌卵黄抗体的效果.通过紫外分光光度计法测定蛋白质含量、SDS-PAGE电泳检测抗体纯度、间接ELISA检测抗体效价.结果显示,辛酸-硫酸铵方法比单独使用硫酸铵方法得到的鸡卵黄抗体IgY纯度高、而效价一样.实验优化了卵黄抗体的分离纯化技术,得到纯度高、特异性强的IgY.  相似文献   

人抗凝血酶Ⅲ生产工艺中的病毒灭活/去除效果的研究     

孙科  丁显平 《黑龙江科技信息》2018,(25)

目的:对人抗凝血酶Ⅲ(Human AntithrombinⅢ,ATⅢ)生产工艺的病毒灭活/去除效果进行研究。方法:选取PRV、SV、EMCV和MVM作为指示病毒,考察了S/D处理法、冻干干热法和纳米膜过滤工艺的病毒灭活/去除能力。结果 S/D处理法灭活PRV达到5.250 Lg TCID50/ml,灭活SV达到5.544 Lg PFU/ml;冻干干热法灭活PRV达到4.750 Lg TCID50/ml,灭活EMCV达到6.000 Lg TCID50/ml,灭活SV达到7.760 Lg PFU/ml;纳米膜过滤法去除MVM达到5.375 Lg TCID50/ml。所有的指示病毒均能被有效地灭活/去除。结论:上述方法均能安全有效地灭活/去除人抗凝血酶Ⅲ中的病毒。  相似文献   

SARS研究重大进展：空气中病毒可被收集检测     

《科技广场》2003,(5):11-11

空气中的SARS病毒可以被高效收集检测。记者从东南大学吴健雄实验室获悉,该校SARS病毒课题研究获得重大进展,他们最新研制的“空气中SARS病毒快速收集装置”,每分钟可对3升空气中的病毒进行收集。通过对于蛋白颗粒和灭活的病毒颗粒进行测试,其收集率可达90％以上。该研究成果对于空气中SARS冠状病毒的快速原位检测具有十  相似文献   

马传染性贫血病毒gp90蛋白的表达及其在诊断中的潜在应用     

陈新江  毛洁  孟庆来  张晓燕  张耀洲 《科技通报》2009,25(3)

以质粒pVRCSV1.0-syn-gp90,利用PCR扩增马传染性贫血病毒外膜蛋白基因(gp90),构建了原核表达质粒pET-28a(+)-gp90,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并纯化该重组蛋白,ELISA和Westem blot证明马的阳性血清可以识别该重组蛋白.以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,测定的效价为1:13,000.  相似文献   

美国红鱼免疫球蛋白的分离纯化   总被引：1，自引：0，他引：1  

罗轻蕾  闫茂仓  陈少波  谢起浪  单乐州  朱进  艾为明 《科技通报》2010,26(4):623-627

对灿烂弧菌灭活疫苗接种后的美国红鱼提取血清,采用硫酸铵沉淀和SephadexG-200凝胶层析结合的方法分离纯化出美国红鱼血清免疫球蛋白,并且通过SDS-PAGE对纯化蛋白的部分特性进行分析。结果表明,通过硫酸铵沉淀法可以沉淀血清中大部分的蛋白,电泳条带比较丰富,但仍然含有较多的杂蛋白,经过SephadexG-200凝胶柱层析方法分离,获得纯度较高的免疫球蛋白,经β—巯基乙醇处理后解离形成重链和轻链两个亚单位,分子量分别为69.2 kDa,29.5 kDa,表明美国红鱼血清IgM的分子量与硬骨鱼IgM的分子量范围（H链60~81kDa,L链20-30kDa）是一致。  相似文献   

克百威单克隆抗体的制备及鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱江  陆贻通 《科技通报》2005,21(5):536-540,544

本试验以人工合成的克百威免疫原免疫BALB／CF1小鼠,采用杂交瘤技术制备了5株能稳定分泌抗克百威单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用培养扩增后的各建株细胞诱导小鼠生长腹水．腹水效价达10^-6～10^-7。琼脂双扩试验表明各单抗蛋白均为IgG,抗体蛋白均为IgG2a亚类。用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体腹水,并测定抗体蛋白含量为3～8mg／mL;用SDS—PAGE进行纯度鉴定,电泳图谱均显示了IgG抗体及其重链和轻链条带,分离的抗体纯度在90％以上。对纯化的单抗5E2进一步做交叉反应试验,与其他氨基甲酸酯类杀虫剂残杀威、速灭威、灭多威、甲奈威、异丙威、仲丁威的交叉反应率分别为7．2％、4．5％、2．8％、7．9％、9．5％、8．9％,结果表明单抗5E2有较好的特异性。  相似文献   

猪血浆中凝血酶、免疫球蛋白等功能蛋白的联合提取   总被引：1，自引：0，他引：1  

李敏康  钱冬明  宋宏新 《中国科学院研究生院学报》2007,24(3):357-361

实验对猪血浆中白蛋白、免疫球蛋白、纤维蛋白原及凝血酶等功能蛋白进行了联合提取。通过对各步骤中蛋白的检测确立了一套有效的联合提取方法：将柠檬酸钠抗凝的血浆经冻融处理,离心得到纤维蛋白原沉淀，上清通过吸附法提取凝血酶后再经盐析法分离提取白蛋白及免疫球蛋白。1L血浆可同时提得白蛋白31.41g、免疫球蛋白13.86g、凝血酶粗品0.22g（比活力为38.5U/mg）、纤维蛋白原为2.67g。  相似文献   

SARS流行与非流行期间东门市场从业人员SARS冠状病毒血清流行病学研究     

何雅青  刘小立  刘建军  杨洪  赵锦  房师松  刘涛  何建凡  周丽  程小雯  石向东  黄达娜  庄志雄  Zhuang Zhixiong 《深圳特区科技》2005,(Z1):160-163

目的对SARS流行与非流行期间深圳东门市场从业人员SARS冠状病毒血清流行病学研究.方法于2003年5月和2005年1月对东门市场从业人员,用ELISA法或免疫荧光法检测SARS冠状病毒IgG和IgM抗体.结果2003年东门市场从业人员SARS冠状病毒IgG阳性率为6.16%(88/1429),2005年IgG阳性率为1.5%(7/466),SARS流行期抗体的阳性率显著高于非流行期;2003年和2005年野生动物档、三乌档和屠宰档三类人员的SARS-CoV IgG抗体水平显著高于其他五类人员,但2003年这三类高危人群SARS-CoV IgG抗体的阳性率显著高于2005年;且SARS-CoV IgG抗体可以维持1年零8个月的时间;2003年东门市场从业人员中SARS冠状病毒IgM抗体阳性率为0.69%,其中一例SARS确诊病例SARS冠状病毒IgM和IgG抗体均为阳性,2005年SARS-CoVIgM抗体均为阴性,结论2005年东门市场从业人员未出现新近SARS病毒感染者.2003年SARS流行期间,东门市场存在SARS病毒感染者和隐性感染者,且与野生动物密切接触人员为SARS冠状病毒感染的高危人群,支持SARS病毒来源于动物的推测.  相似文献