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hCLP46是从MDS-AML的CD34＋细胞cDNA文库中筛选出的一个新的基因，为了进一步对该基因进行功能、性质研究，本实验利用RT-PCR技术对该基因进行了组织特异性表达检测，并将该基因构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中，转染U937细胞，发现过量表达该基因的U937细胞能够抑制TGF-对p15基因的上调。此外，利用生物信息学手段对该基因进行序列分析，得到其启动子区存在一个典型的“CpG island”。提示该基因有可能参与甲基化调节途径。通过本文的研究，为进一步研究该基因的作用机制打下基础。 相似文献
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幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建 总被引：2，自引：0，他引：2
目的 构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法 采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3′端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBI A1300的表达框架内.结果 PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBI A1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论 成功构建CTB和cagA融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础. 相似文献
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从斜纹夜蛾核多角体病毒（Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPV）日本株（C3）基因组中克隆了ie0基因。核苷酸序列分析表明,该克隆片断涵盖了864 bp的读码框及5′端启动子区475 bp和3′端终止区90 bp的序列。氨基酸序列分析显示,在SpltMNPV IE0蛋白N-端23～47位以及111～126位富含酸性氨基酸和疏水性氨基酸残基,C′端第225～271位具有典型的CX2CX14CCX4CX2CX15CX2C双锌指基序,该结构在所比较的9个昆虫杆状病毒IE0蛋白中是十分保守的。联配分析表明,SpltMNPV日本株（C3）的核苷酸序列和氨基酸序列与其他9种核多角体病毒的同源性有较大差异。以ie0基因为基础绘制的杆状病毒分子进化树将家蚕核多角体病毒（Bombyx mori Nu-cleopolyhedrovirus,BmNPV）与苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒（Autographa californica multicapcid nucle-opolyhedrovirus,AcMNPV）归到同一分枝,这与以p10、gp37和egt基因为基础绘制的杆状病毒分子进化树结果一致。并进行了大肠杆菌表达和Western Blotting分析。 相似文献
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利用同源克隆的方法,从商陆中克隆得到扩展蛋白基因的全长cDNA序列,命名为PaEXP1(GenBank 登录号为GQ851947).PaEXP1长1128bp,含有759bp的完整开放阅读框,编码252个氨基酸,分子量27.1kD,等电点8.55.PaEXP1氨基酸序列N端含有8个半胱氨酸残基,1个组氨酸(His-Phe-Asp,HFD)域,C末端存在4个保守的色氨酸残基,具有扩展蛋白的典型结构.系统进化树分析表明,PaEXP1属于扩展蛋白的α-扩展蛋白家族.Real time-PCR结果表明,PaEXP1主要在根中表达,低温、盐、重金属和渗透胁迫均强烈地抑制其基因的表达.酵母转化实验表明,转PaEXP1可以提高酵母的平均直径,说明PaEXP1参与细胞壁的松弛扩展和细胞的增大过程. 相似文献
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在美国男性中,前列腺癌是最常诊断和位列第二致死率的肿瘤,一生患癌的危险概率约为1/6。前列腺组织是由胚胎泌尿生殖窦（urogenital sinus, UGS）发展形成的一个导管-腺上皮结构,这种导管-腺上皮结构是由高柱状的分泌性的腺细胞和扁平的基底细胞组成,这两种细胞分别表达特异性的细胞角蛋白（cytokeratin, CK）和生物学标记。在大量的前列腺癌研究中发现许多癌基因和抑癌基因存在突变,但是它们在前列腺癌发生和发展中的作用机制还不明确。目前,尚缺乏对正常人前列腺上皮组织如何转变为前列腺癌的分子机制的深入研究。人前列腺癌体外和体内模型的综合应用有助于研究前列腺癌的形成和分子、细胞生物学特征,目前迫切需要建立一些新的来源于手术新鲜组织标本并能表现不同的肿瘤生物学特性的永生化细胞系作为转化医学研究新的实验工具。 相似文献
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《科技风》2020,(15)
目的:人原代脐静脉内皮细胞(Huv ECs)通过氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导从而建立体外氧化应激损伤模型,观测NF-κB1基因启动子区-94号位点ATTG插入/缺失(rs28362491,-94ins/del ATTG)对细胞凋亡的影响。方法:检测ox-LDL对细胞活性影响的适宜时间及浓度,并通过ox-LDL诱导HUVECs建立氧化应激损伤模型,通过Western blot法分别检测空白对照组及oxLDL诱导组NFKB1不同基因型的细胞凋亡情况。结果:MTT结果显示:Huv ECs通过100umol/L ox-LDL诱导12h细胞活力即可显著降低; Western blot检测结果显示:ox-LDL可诱导Huv ECs发生细胞凋亡,且DD型凋亡水平较II型显著增高。结论:ox-LDL诱导HUVECs可促使细胞发生凋亡,且NFKB1不同基因型中细胞凋亡水平具有显著差异。 相似文献
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环境激素壬基酚对家蚕生殖发育的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
壬基酚(NP)是一种新确认的环境激素(EH)。为探讨EH对鳞翅目昆虫的性激素作用,用添加NP的人工饲料饲养家蚕,调查NP对生殖发育的影响。结果显示,刚孵化家蚕幼虫添毒72 h和120 h的LC50分别为1.1392、1.0695 mmol/kg。添毒NP1.000 mmol/kg以上浓度,家蚕在幼虫期死亡而不能完成世代。从生殖腺系数看,0.500 mmol/kg以下浓度的NP,对家蚕幼虫和蛹的睾丸生长无不良影响(P>0.05);大于0.250 mmol/kg的NP,能显著抑制雄蛾的睾丸生长(P<0.05);小于0.500 mmol/kg的NP,5龄幼虫和24 h龄蛹精细胞数量显著增加(P<0.05);高于0.125 mmol/kg的NP,168h龄蛹和24h龄蛾的精子数量显著少于对照(P<0.01)。高于0.125 mmol/kg的NP,5龄幼虫和蛹的卵细胞生长和发育被抑制(P<0.05),雌蛾造卵数和产出卵数减少(P<0.05),受精率降低(P<0.05)。NP通过抑制家蚕生殖腺的生长和生殖细胞的发育表现雌激素效应。 相似文献
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桑蚕来源致病性微孢子虫的分类学地位 总被引：3，自引：0，他引：3
综述了桑蚕来源微孢子虫微粒子虫属,具褶孢虫属,泰罗汉孢虫属,变形孢虫属和内网虫属对桑蚕的病原性以及这些微孢子虫的分类学特征和地位。 相似文献
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家蚕雌蛾体中微量元素和脂肪酸的分析 总被引：1，自引：0，他引：1
分析了家蚕雌蛾体中微量元素和脂肪酸的含量,并对其质量进行了评价.家蚕雌蛾体富含微量元素,检测的10种常见微量元素的加和量和人体必需宏量元素含量分别为27339.30 mg/kg和26900.00 mg/kg,其中人体需要量较大的4种微量元素(锌、铁、铜和锰)含量高于重要中药资源昆虫芫菁科昆虫蛾体中的含量.并且适合于人体日需要量.家蚕雌蛾体含有丰富的不饱和脂肪酸,其中必需的n-3系列多不饱和脂肪酸亚麻酸含量最高(39.88%),是鸡蛋的40倍和牛奶的38倍,并高于亚油酸含量6.5倍.研究结果显示,家蚕雌蛾是开发保健食品和医药品的优质原料. 相似文献
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BackgroundMolecular brain therapies require the development of molecular switches to control gene expression in a limited and regulated manner in time and space. Light-switchable gene systems allow precise control of gene expression with an enhanced spatio-temporal resolution compared to chemical inducers. In this work, we adapted the existing light-switchable Light-On system into a lentiviral platform, which consists of two modules: (i) one for the expression of the blue light-switchable trans-activator GAVPO and (ii) a second module containing an inducible-UAS promoter (UAS) modulated by a light-activated GAVPO.ResultsIn the HEK293-T cell line transfected with this lentiviral plasmids system, the expression of the reporter mCherry increased between 4 to 5 fold after light induction. A time expression analysis after light induction during 24 h revealed that mRNA levels continuously increased up to 9 h, while protein levels increased throughout the experiment. Finally, transduction of cultured rat hippocampal neurons with this dual Light-On lentiviral system showed that CDNF, a potential therapeutic trophic factor, was induced only in cells exposed to blue light.ConclusionsIn conclusion, the optimized lentiviral platform of the Light-On system provides an efficient way to control gene expression in neurons, suggesting that this platform could potentially be used in biomedical and neuroscience research, and eventually in brain therapies for neurodegenerative diseases.How to cite: Zárate RV, Arancibia D, Fernández A, et al. Optimization of the Light-On system in a lentiviral platform to a light-controlled expression of genes in neurons. Electron J Biotechnol 2021;51. https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2021.03.006 相似文献
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BackgroundPiercing/sucking insect pests in the order Hemiptera causes substantial crop losses by removing photoassimilates and transmitting viruses to their host plants. Cloning and heterologous expression of plant-derived insect resistance genes is a promising approach to control aphids and other sap-sucking insect pests. While expression from the constitutive 35S promoter provides broad protection, the phloem-specific rolC promoter provides better defense against sap sucking insects. The selection of plant-derived insect resistance genes for expression in crop species will minimize bio-safety concerns.ResultsPinellia ternata leaf agglutinin gene (pta), encodes an insecticidal lectin, was isolated and cloned under the 35S and rolC promoters in the pGA482 plant transformation vector for Agrobacterium-mediated tobacco transformation. Integration and expression of the transgene was validated by Southern blotting and qRT-PCR, respectively. Insect bioassays data of transgenic tobacco plants showed that expression of pta under rolC promoter caused 100% aphid mortality and reduced aphid fecundity up to 70% in transgenic tobacco line LRP-9. These results highlight the better effectivity of pta under rolC promoter to control phloem feeders, aphids.ConclusionsThese findings suggested the potential of PTA against aphids and other sap sucking insect pests. Evaluation of gene in tobacco under two different promoters; 35S constitutive promoter and rolC phloem-specific promoter could be successfully use for other crop plants particularly in cotton. Development of transgenic cotton plants using plant-derived insecticidal, PTA, would be key step towards commercialization of environmentally safe insect-resistant crops.How to citeUmer N, Naqvi RZ, Rauf I, et al. Expression of Pinellia ternata leaf agglutinin under rolC promoter confers resistance against a phytophagous sap sucking aphid, Myzus persicae. Electron J Biotechnol 2020;47. https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2020.07.004. 相似文献