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为研究斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura muhicapsid nucleopolyhedrovirus.SpltMNPV)侵染规律,根据SphMNPV中国株(G2)ORF135基因序列设计引物,经PCR扩增,从SpltMNPV日本株(B)基因组中克隆了pif-2基因。核苷酸序列分析表明,该基因是甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)pif-2的同源物,读码框含1278bp,编码425个氨基酸的蛋白质,推定分子量为48.6kD。与其他杆状病毒的同源物比对显示.SpltMNPV-JP-B PIF-2蛋白中14个Cys残基高度保守。联配分析表明,SphMNPV-JP-B pif-2的核苷酸序列与其他13种核型多角体病毒的同源性有较大差异。将pif-2克隆至原核表达载体pET32a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中获得了融合表达,SDS-PAGE分析表明在约69kD处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。 相似文献
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