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USP11通过去泛素化p53调控p53稳定性 总被引：2，自引：0，他引：2
Jia-ying KE ;Cong-jie DAI ;Wen-lin WU ;Jin-hua GAO ;Ai-juan XIA ;Guang-ping LIU ;Kao-sheng LV ;Chun-lin WU 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2014,15(12):1032-1038
研究目的：深入研究p53的泛素化及稳定性的调控。创新要点：发现一个新的调控p53去泛素化的酶USPll,它可以通过与p53的结合去泛素化并稳定p53,从而揭示了一个新的p53去泛素化调控的机制。研究方法：通过免疫共沉淀发现p53可以与USP11结合（图1a）,通过泛素化检测试验发现USPI1可以去泛素化p53（图3a和3b）,最后通过逆转录．聚合酶链式反应（RT—PCR）试验发现在DNA损伤后,USP11对p53转录活性的提高是非常重要的。 相似文献
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p53 是一种肿瘤抑制基因,它的突变与50 %的人类肿瘤发生有关。p73 基因编码的蛋白质,无论在结构上,还是在功能及调节上均与p53 蛋白相似,且与肿瘤的发生密切相关,本文对此方面的研究结果进行了比较,并对p73 能否作为候选抑癌基因进行了讨论. 相似文献
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目的:研究缺血对左室心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响,探讨心肌细胞凋亡的分子机制。方法:采用结扎冠脉左前降支(LAD)法制作大鼠心肌缺血模型;运用DNA琼脂糖凝胶电泳技术鉴定基因组DNA的断裂情况;使用Northern Blot检测缺血心肌细胞p53、c-myc及bcl-2的表达活性。结果;a.缺血能够诱导左室心肌细胞凋亡;b.缺血明显上调p53基因的转录;c.缺血的左室心肌细胞c-myc mRNA含量显著增加;d.缺血减弱了bcl-2基因的转录。结论:内源性促凋亡基因p53、c-myc及抗凋亡基因bcl-2表达活性的改变介导了缺血诱导的心肌细胞凋亡,凋亡是心肌缺血时心肌细胞缺失的一个重要原因。 相似文献
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目的:究动脉粥样硬化对SMC凋亡及凋亡相关基因表达的影响,探讨凋亡的分子机制及晚期AS斑块破裂之原因。方法:采用高维生素D3 高脂肪高胆固醇饲料喂养法建立大鼠AS的模型;运用DNA琼脂糖凝胶电泳法鉴定基因组DNA的断裂情况;使用Northern Blot检测P53、c-myc及bcl-2基因的表达活性。结果:a.AS斑块中SMC的DNA片断在电泳中呈特征性梯状分布;b.AS斑块中P53及C-myc基因转录明显增强;c.AS斑块中SMC的bcl-2mRNA含量显著下降。提示1.AS斑块中存在凋亡的SMC,P53及C-myc表达的增强和bcl-2的表达下调介导了这一过程;2.SMC的凋亡可能是晚期AS斑块玻裂的重要原因。 相似文献
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Ghanshyam Swarup 《Resonance》1998,3(10):70-78
Modification of proteins by phosphorylation is the major general mechanism by which many cellular functions in eukaryotic
cells such as cell division, malignant transformation, differentiation, signal transduction etc. are controlled by external
physiological stimuli. At the molecular level protein phosphorylation-dephosphorylation can alter various properties of the
substrate molecules such as enzymatic activity, sub-Cellular location, ligand binding, interaction with other proteins, DNA
binding and some other functional properties. The changes in molecular properties of proteins brought about by protein phosphorylation
play a critical role in regulating various cellular functions. 相似文献
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黑斑蛙Sox基因的PCR-SSCP分析 总被引：1，自引：0，他引：1
Sox基因家族是一类高度保守的基因家族,具有一个保守基序HMG-box,可以与DNA序列特异性结合,促进基因的特异转录,从而在胚胎发育及性别分化中起着重要作用。本文采用简并PCR方法,扩增并克隆了黑斑蛙的Sox基因保守区,获得长约220bp的片段;结合SSCP分析技术,在阳性克隆中筛选出六个不同的Sox基因。本研究为Sox家族成员的分类及分子进化的研究提供了资料。 相似文献
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采用S-P免疫组织化学的方法,配对检测了37例大肠癌组织及同一病人的正常粘膜上皮中p53蛋白的表达情况。结果表明,p53蛋白表达阳性19例,阴性18例,阳性率为51.4％,而配对的大肠正常粘膜检测结果均呈p53阴性;p53蛋白表达与病人性别、年龄、Dukes分期等因素无明显相关性,而与淋巴结转移、浸润深度和不同分化程度等存在明显相关性。提示p53蛋白的检测可以作为大肠癌病人病情诊断和预后分析的辅助手段。 相似文献
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INTRODUCTION Colorectal cancer is the most common cancer ofthe Western world and accounts for approx.Elevenpercent of all cancer deaths in the United States.Aswith other malignancies,colorectal adenocarcinomais thought to develop through the accumulation ofgenetic alterations that inhibit cell growth.Two of theoncogenes that have been implicated in this processare bcl-2and p53,the products of which are involvedin apoptosis,cell proliferation and tumor develop-ment(Garewal et al.,1996).S… 相似文献
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目的:研究新城疫病毒(NDV)感染对小鼠肉瘤S180细胞p53蛋白的表达及细胞周期的影响。方法:通过NDV体外感染小鼠肉瘤S180细胞,经倒置显微镜观察细胞形态变化,噻唑蓝(MTT)比色法检测小鼠肉瘤S180细胞的增殖状况;经流式细胞仪分析检测NDV体内感染后荷瘤鼠腹水中S180细胞分裂周期各时相的变化、细胞凋亡情况及细胞表面p53蛋白的表达情况。结果:NDV体内、外感染对小鼠肉瘤S180细胞的杀伤作用明显,NDV体内感染后荷瘤鼠腹水中S180细胞高表达p53蛋白,细胞凋亡率增加,G2/S期细胞减少,增殖指数(PI)降低,与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:NDV感染可增强小鼠肉瘤S180细胞p53蛋白的表达,影响其细胞周期,诱导其凋亡且有较强的杀瘤作用。 相似文献
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采用免疫组化技术和PCR-SSCP技术对高、中、低分化大肠腺癌、癌旁粘膜、正常粘膜及大肠腺瘤型息肉的P21、P53蛋白表达和K-ras基因、p53基因突变进行了检测,检测结果高、中、低分化大肠腺癌、癌旁粘膜、正常粘膜和大肠腺瘤型息肉六组P21蛋白表达阳性率分别为57.5％、62.5％、75％、13.3％、6.7％、50％,p53蛋白表达阳性率分别为30％、37.5％、50％、4.4％、22％、33.3％,K-ras基因突变率分别为32.5％、37.5％、62.5％、2.2％、0％、16.7％,p53基因突变率分别为22.5％、25％、37.5％、0％、0％、0％.结果表明大肠腺癌P21、P53蛋白表达比大肠腺瘤增多,但增加不显著(P>0.05), 二组均比癌旁粘膜和正常粘膜P21、P53蛋白表达阳性率高(P<0.01);大肠腺癌K-ras基因和p53基因突变率比大肠腺瘤、癌旁粘膜和正常粘膜组显著增加(P<0.01);高、中、低分化大肠癌各组中,随恶性程度增加,P21、P53蛋白表达增加,K-ras基因和p53基因突变率增加,但均不显著(P>0.05).说明K-ras基因、p53基因突变及其蛋白表达产物P21、P53在细胞癌变、癌细胞恶性表型维持中起重要作用。 相似文献
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Yili FENG Sicheng LIU Ruodan CHEN Anyong XIE 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2021,22(1):73-86
The clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9(Cas9)is widely used for targeted genomic and epigenomic modifications and imaging in cells and organisms,and holds tremendous promise in clinical applications.The efficiency and accuracy of the technology are partly determined by the target binding affinity and residence time of Cas9-single-guide RNA(sgRNA)at a given site.However,little attention has been paid to the effect of target binding affinity and residence duration on the repair of Cas9-induced DNA double-strand breaks(DSBs).We propose that the choice of DSB repair pathway may be altered by variation in the binding affinity and residence duration of Cas9-sgRNA at the cleaved target,contributing to significantly heterogeneous mutations in CRISPR/Cas9 genome editing.Here,we discuss the effect of Cas9-sgRNA target binding and residence on the choice of DSB repair pathway in CRISPR/Cas9 genome editing,and the opportunity this presents to optimize Cas9-based technology. 相似文献
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Bao-zhong Zhang Xin Zhang Xiao-ping An Duo-liang Ran Yu-sen Zhou Jun Lu Yi-gang Tong 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2009,10(6):479-482
Site-directed mutagenesis (SDM) has been a very important method to probe the function-structure relationship of proteins. In this study, we introduced an easy-to-use, polymerase chain reaction (PCR)-based SDM method for double-stranded plasmid DNA, with a designed restriction site to ensure simple and efficient mutant screening. The DNA sequence to be mutated was first translated into amino acid sequence and then the amino acid sequence was reversely translated into DNA sequence with degenerate codons, resulting in a large number of sequences with silent mutations, which contained various restriction endonuclease (RE) sites. Certain mutated sequence with an appropriate RE site was selected as the target DNA sequence for designing a pair of mutation primers to amplify the full-length plasmid via inverse PCR. The amplified product was 5'-phosphorylated, circularized, and transformed into an Escherichia coli host. The transformants were screened by digesting with the designed RE. This protocol uses only one pair of primers and only one PCR is conducted, without the need for hybridization with hazardous isotope for mutant screening or subcloning step. 相似文献
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目的 :探讨p5 3蛋白在食管癌组织发生中表达的意义。方法 :应用免疫组织化学技术检测 72例食管鳞状上皮癌 ,19例增生鳞状上皮及 17例正常食道鳞状上皮中 p5 3蛋白的表达。结果 :p5 3在食管癌组织中的阳性率为 4 7.95 % (35 / 72 ) ,在增生鳞状上皮中的阳性率为 36 .84 % (7/ 19) ,在正常食道鳞状上皮中的阳性率为 5 .88% (1/ 17) ,正常组与增生组和癌变组比较均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。p5 3蛋白与癌的分化程度、淋巴结有无转移和浸润深度等指标均无明显关系。结论 :p5 3蛋白与食管癌的发生、发展有关。 相似文献
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慕博华 《泰州职业技术学院学报》2002,2(3):46-49
目的 探讨c erbB 2、p53和nm2 3蛋白在乳腺癌组织中的表达与乳腺癌临床病理参数、雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)的关系。方法 应用免疫组化ABC法对 5 5例乳腺癌组织中的c erbB 2、p53和nm2 3蛋白表达进行检测。结果 5 5例乳腺癌中c erbB 2、p53及nm2 3的阳性率分别为 49 1 % (2 7/5 5 )、47 3 % (2 6 /5 5 )和 49 1 % (2 7/5 5 ) ,c erbB 2和p53蛋白在乳腺癌中的阳性率与肿瘤病理分级及淋巴结转移有显著意义 (P <0 0 5 ) ,与雌孕激素受体状况呈负相关 (P <0 0 1 )。nm2 3蛋白在乳腺癌中的阳性率与肿瘤病理分级、淋巴结转移有密切的关系 (p <0 0 5 ) ,与雌孕激素受体状呈正相关 (p <0 0 1 )。 70 9% (3 9/5 5 )肿瘤有上述蛋白的异常表达 ,其中 49 1 % (2 7/5 5 )的肿瘤同时有多个蛋白异常表达。结论 肿瘤的多因素分析比单因素分析更有价值 ,癌基因c erbB 2、nm2 3和抑癌基因p53蛋白的表达异常及协同作用在乳腺癌的发生发展中起重要使用 相似文献
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以戴维森、塞尔、克里普克和杜米特为代表的后期语言分析哲学用数理逻辑的方法研究日常语言,既重视逻辑分析又重视概念分析。基于后期语言分析哲学的隐喻研究发现,意义辨明论、指称、言语行为理论和概念图式对隐喻的判断、源域和目标域以及概念隐喻的理解与认知都起着重要作用。 相似文献
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目前,人们研究肿瘤的热点已经从癌基因转到抑癌基因,在已发现的数个抑癌基因中,p53、Fas、p16、Fhit、nm23、BLCAP与宫颈癌的关系密切,也是宫颈癌研究的热点.p53和p16基因通过调控细胞周期来抑制细胞增殖;Fas通过与其配体FasL或其单克隆抗体结合后,诱导Fas所在细胞凋亡;Fhit通过诱导细胞凋亡、细胞周期阻滞发挥着抑制肿瘤细胞增殖的作用;nm23则是通过改变nm23基因的编码产物二磷酸核苷酸激酶(NDPK)从而引起NTP产生不足,参与浸润、转移过程;BLCAP是一个新近发现的宫颈癌相关抑癌基因,其功能及性质尚不大清楚. 相似文献