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第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNALeu1和tRNALeu2接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶. 相似文献
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为了研究甘草提取物的不同馏分对变形链球菌浮游细胞代谢活性、生物被膜形成以及产酸性的体外抑制作用,通过MTT法分析了甘草提取物的不同馏分对变形链球菌浮游细胞代谢活性的影响,采用结晶紫染色法定量检测药物处理后变形链球菌生物被膜形成的情况,糖酵解pH值下降实验用于测定甘草提取物的不同馏分对变形链球菌产酸性的影响.结果表明,8... 相似文献
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利用同源克隆的方法,从商陆中克隆得到扩展蛋白基因的全长cDNA序列,命名为PaEXP1(GenBank 登录号为GQ851947).PaEXP1长1128bp,含有759bp的完整开放阅读框,编码252个氨基酸,分子量27.1kD,等电点8.55.PaEXP1氨基酸序列N端含有8个半胱氨酸残基,1个组氨酸(His-Phe-Asp,HFD)域,C末端存在4个保守的色氨酸残基,具有扩展蛋白的典型结构.系统进化树分析表明,PaEXP1属于扩展蛋白的α-扩展蛋白家族.Real time-PCR结果表明,PaEXP1主要在根中表达,低温、盐、重金属和渗透胁迫均强烈地抑制其基因的表达.酵母转化实验表明,转PaEXP1可以提高酵母的平均直径,说明PaEXP1参与细胞壁的松弛扩展和细胞的增大过程. 相似文献
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以赤子爱胜蚓(Eiseniafetida)为供试动物,通过微粒体提取、孵育和HPLC测定等系列条件的摸索,建立了测定其微粒体7-乙氧基-3-异吩(噁)唑酮-脱乙基酶(EROD)活性的高效液相色谱(HPLC)法.结果表明,以赤子爱胜蚓整体为材料,采用差速离心法获取微粒体进行体外孵育,反应液采用C18反相柱分离,在激发波长... 相似文献
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包括有机氧化还原和过渡金属催化循环的金属氧化还原催化已发展成为活化惰性C—H键制备C—C和C-杂原子键的有力手段。使用密度泛函理论方法,详细探究三重激发态二芳基酮和镍络合物双催化实现四氢呋喃(THF)与芳基溴化物和烷基溴化物之间的sp3 C—H芳基化和烷基化的反应机理。研究表明整个反应包含THF自由基的产生、镍催化下产物的形成和镍催化剂再生3个过程。计算发现,THF自由基由三重态酮抽取THF中的氢原子生成;镍催化循环中的活性催化剂不是实验使用的原始催化剂,而是与实验体系中添加的配体进行交换后形成的镍催化剂;碳酸钠在镍催化剂再生中起重要作用。类似的反应机理对于烷基化反应同样适用。 相似文献
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D-氨基酸在食品中广泛存在。研究D-氨基酸诱导的酿酒酵母细胞内的活性氧的累积及其生物损伤。实验结果显示D-氨基酸抑制细胞生长,引起细胞内H2O2含量的升高,导致细胞内过氧化氢酶和过氧化物酶的活性增强。该结果表明H2O2是D-氨基酸诱导产生的活性氧的主要类型,氧化损伤是D-氨基酸对酿酒细胞毒性的主要机制。 相似文献
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利用酶动力学方法测定了50%乙醇红茶萃取物和其主要活性成分茶黄素对存在于动物中的I型脂肪酸合酶的酮酰还原催化中心(KR)和存在于细菌中的II型脂肪酸合酶的酮酰还原酶(FabG)的抑制能力和抑制特征。这两个抑制剂对KR和FabG均有强的可逆抑制和不可逆抑制能力,是KR和FabG的底物NADPH的竞争性抑制剂,并且NADPH可以显著降低它们不可逆失活KR和FabG的速率,表明这两个抑制剂可能作用于两种酮酰还原酶的NADPH结合位点。两个抑制剂对KR和FabG的抑制特征基本一致,表明两种不同进化程度的酮酰还原酶的活性部位很相似。序列同源性分析表明它们有一段同源性很高的序列,可能与活性部位组成有关。因此,通过对FabG的研究能够了解KR活性部位的空间结构。由于抑制能力强和来源丰富,这两个抑制剂具有较高的应用潜力。 相似文献
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构成天然蛋白质的氨基酸为L构型,D构型氨基酸虽然不是构成蛋白质的基本结构单元,但许多植物、微生物甚至在人体中都有D-氨基酸的存在.DNA聚合酶链式反应广泛发生在生物体内及PCR实验中,首次探究手性氨基酸及其与金属离子协同条件下对Taq-DNA聚合酶催化下的DNA链式聚合反应的影响情况,为进一步研究手性氨基酸及金属离子对... 相似文献
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孙中华 《胜利油田职工大学学报》2005,19(3)
微生物法制备丙烯酰胺是以丙烯腈水合酶为催化剂,采用丙烯腈催化水合法制备丙烯酰胺的单体工艺。通过对不同生产条件下的比较,探讨了催化水合反应温度、反应液pH值、反应液中丙烯腈浓度、丙烯酰胺浓度等对丙烯腈水合酶催化活性的影响,找到了最佳的反应条件,为工业化生产创造了理论依据。 相似文献
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利用黑曲霉Aspergillus niger S菌株, 通过液体发酵的方法, 得到了一种可同时高效水解大豆异黄酮糖苷成大豆异黄酮,水解白藜芦醇苷成白藜芦醇的糖基水解酶.该酶经硫酸铵分级沉淀、离子交换层析及分子排阻色谱纯化得单一条带, 经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶的表观分子量约为165ku 1u=1.660540×10-27kg。 ,比通常所报道的传统β-葡糖苷酶都大,该酶的最适反应温度为50℃; 最适pH值为5~10. 相似文献
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该试验采用单因素分析方法研究了提取大豆蛋白质工艺中酸沉pH值对提取率及得率的简单效应,旨在为改进大豆蛋白质提取工艺提供参考.结果表明：（1）在料水比1∶10、酸沉pH值4.3、离心速度4000r.min-1、碱溶pH值9.5、碱溶时间为45min的条件下,平均蛋白质提取率最高为66.79%.在pH值4.2~4.7之间,酸沉pH值对蛋白质提取率的简单效应为-0.84%.（2）同样条件下,平均蛋白质得率最高为29.85%,酸沉pH值对蛋白质得率的简单效应为-0.374%.（3）在不考虑其它因素时,为了取得酸沉pH值的最大简单效应,宜选择4.3作为酸沉pH值参数. 相似文献
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研究薏仁对细胞色素P4501A1酶活性的影响,为探讨其代谢机制及药用作用提供依据。昆明种小鼠各40只,按18．2g／kg·d^-1灌胃给药,生理盐水对照给药,分别在3周、6周和9周后采用分光光度法测定小鼠肝微粒体CYPlAl的活性。结果是薏仁能降低CYPlAl酶活性,且呈时间依赖性,抑制率在6．35％-46．50％之间;并对CYPlAl酶活性的抑制不存在性别差异。结论是薏仁可明显降低CYPlAl酶活性,且无性别差异。 相似文献
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生活污水中约 80% 的氨氮来自尿液,收集尿液并脱氮处理可极大减轻生活污水处理负荷.本实验用Ti/RuO2-TiO2 电极作为阳极,不锈钢板作为阴极,在有机玻璃电解槽中研究考察电流密度(20~100 mA/cm2)、储存尿液初始 pH(9~12) 以及 NaCl 投加量(4~16 g/L) 对储存尿液(250 mL)的脱氮效果.结果表明,最佳脱氮工艺参数为:电流密度 80 mA/cm2, 初始 pH 在 11 左右,NaCl 投加量为 8 g/L,电解时间达到 270 min.在此最优化条件下,氨氮和总氮的去除率分别是91.83%和88.34%;处理 1 L 尿液消耗 0.311 kW·h 电能.可见,该方法具有快速、低能耗、高效优点,在源分离尿液氮处理方面具有应用前景. 相似文献
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沈荣 《安徽职业技术学院学报》2003,2(1):13-18
在表面活性剂溶液中 ,活性剂分子长碳链相互缠绕折叠形成若干微电场 ,带异性电荷的染料分子被吸附 ,使溶液吸收光谱红移。本研究利用微相吸附—光谱修正 (MPASC)技术以十二烷基苯磺酸钠(SDBS)与染料夜蓝 (NB)结合反应为例研究表面活性剂在微量分析中的增效机理 ,结果表明二者的作用实质上是表面活性剂缠绕大分子内微电场对NB的Langmuir单分子层吸附。本报告测定了SDBS与NB结合产物性质 ,如结合比、单体摩尔吸光系数值等 ,而且定量分析了实际样品中的阴离子表面活性剂 ,回收率 97.9% ,RSD <3.1%。 相似文献
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采用水热法合成纳米CeO2线,使用透射电子显微镜、X射线衍射仪和拉曼光谱仪对其进行表征。使用傅里叶变换红外光谱仪和紫外可见分光光度计对DNA与纳米CeO2线的相互作用进行分析,然后采用紫外可见分光光度法研究DNA对纳米CeO2线类氧化酶活性的影响,并对体系进行pH影响以及特异性实验研究。结果表明,DNA抑制纳米CeO2线的类氧化酶活性,这种抑制作用具有特异性。此工作将使纳米CeO2得到进一步的实际应用。 相似文献
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祁超 《中国科学院大学学报》2004,21(3):345-351
经4步分离纯化的Apocynaceae植物培养细胞尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)的比活为2049Umg,与细胞粗提液相比,活力提高97倍,活力回收率为21%,可直接用于尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)的合成,并且储存稳定性很好。UGPase的最适pH值为72,UGPase的最适温度为37℃左右。Mg2+是UGPase发挥活力所必需的。高浓度UTP和Glc6P均能抑制UGPase的活力。 相似文献
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翟秀荣 《济宁师范专科学校学报》2013,(6):29-31,35
制备了甲苯胺蓝（TBO）功能化的有序介孔碳（OMC）／离子液体（IL）凝胶（gel）纳米复合物．将TBO—OMC／ILgel修饰玻碳（GC）电极,然后进行电聚合,制备聚TBO（PTBO）-OMC／ILgel／GC电极．扫描电镜表征显示PTBO—OMC／ILgel复合物表面形貌均一、规则．最后探讨了pH值在4．0-9．0范围内,对PTBO—OMC／ILgel／GC电极电化学性质的影响．实验结果表明,随着溶液pH值的增大,PTBO的氧化峰和还原峰的峰电位均向负的方向移动．当pH〈7．0时,每改变1个pH值,E1/2改变76mV．然而当pH〉7．0时,每改变1个pH值,E1/2改变39mV．这是由于PTBO在酸性溶液中的电化学反应为有两个质子参与的过程,而在碱性溶液中为只有一个质子参与的过程． 相似文献
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摘要：目的：探讨有氧运动对APP/PS1/tau小鼠清醒状态海马CA1区theta时段gamma节律的影响以及对睡眠状态海马CA1区SWR时段低频gamma节律的影响。方法：清洁级6月龄APP/PS1/tau小鼠随机分为(AS) 、运动组(AE),C57BL/6J对照组小鼠随机分为(CS)、运动组(CE),AE组和CE组进行12周跑台运动,5 d/周,60 min/d,前 10 min运动负荷为12 m/min,后 50 min为15 m/min,跑台坡度为 0°。八臂迷宫检测小鼠行为学变化;多通道在体记录技术记录海马CA1区清醒状态和睡眠状态的神经电信号,MATLAB提取清醒状态theta时间段和睡眠状态的SWR时间段,多窗谱估计法进行时频分析和功率谱密度分析。结果：12周有氧运动可明显改善AS组的工作记忆和参考记忆,增加清醒状态海马CA1区theta时段的gamma能量和睡眠状态CA1区SWR时段的低频gamma能量。结论：有氧运动可改善AD模型神经网络状态,提高海马CA1区theta时段gamma能量和SWR时段低频gamma能量是其整体行为学改善的神经网络机制之一。 相似文献
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为探索K+、H+与肌肉疲劳和肌电变化的关系，检测了同一批受试者200W和120W蹬功率车至疲劳前和运动后即刻、5min，10min、20min时，血K+、血PH值以及活动肌和非活动肌定量负荷等长收缩10s的EMG。结果表明，两次运动后血K+和AM－MPF、明显改变（P＜0．001），二者高度负相关，并在20min时基本恢复。200W运动后20min内血PH值一直明显低于安静值（P＜0．001），但在120W运动后无变化，并与肌电无相关关系。120W运动后20min内的IM－IEMG明显低于安静值（P＜0．05）。结果表明，细胞外高K+是肌肉疲劳和AM－MPF下降的主要因素之一，并可能也是IM-IEMG下降的原因之一。H+不是疲劳形成的主在原因，并对肌电无直接影响。 相似文献