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相似文献
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1.
第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNALeu1和tRNALeu2接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶.  相似文献   

2.
珠蛋白是组成血红蛋白亚基的肽链.人类珠蛋白可分为两类,即α类和β类.α和β类又分别有2种和5种不同的珠蛋白.它们由各自的基因所编码.珠蛋白基因是典型的真核基因.它们分别位于第11号和第16号染色体上.这些基因在细胞分化的过程中通过脱甲基化作用,使基因的启动子等调控序列与特定的蛋白因子作用而使基因活化,转录合成相应的珠蛋白.  相似文献   

3.
在核酸组分中,除常见的腺苷酸,鸟苷酸,胞苷酸及尿苷酸(RNA中)和脱氧腺苷酸,脱氧鸟苷酸,脱氧胞苷酸及脱氧胸苷酸(DNA中)外,近年来发现了多种类型的稀有核苷酸.它们一般含量很少或极少,修饰基团有简有繁,在核酸分子中出现的频率有高有低(从百分之几到百万分之几).对于多种生物核酸的研究表明,稀有核苷酸广泛的存在于生物界,它对核酸生物功能的表达显示出异常重要的作用.因此,稀有核苷酸的存在已引起不少生物化学和遗传学家的高度重视,对于它的研究也愈来愈深入.  相似文献   

4.
体外定向进化技术是蛋白质分子改造最为有效的策略.主要是通过对蛋白质编码基因进行易错PCR、DNA改组、体外随机引发重组和交错延伸等方法进行随机突变、重组并通过高通量筛选方法选择期望突变体.该技术不仅具有重要的应用价值.而且有助于蛋白质结构与功能的研究.  相似文献   

5.
转基因沉默分为两种水平:第一种是转录水平上的基因沉默,发生原因主要是位置效应、异染色质化以及甲基化;第二种是转录后水平上的基因沉默,发生原因是通过对靶标RNA进行特异性降解而使基因失活,并就此研究提出RNA阈值模型、异常RAN模型、分子间(内)配对模型与RNA干涉模型来解释这种现象产生的机制.  相似文献   

6.
核仁小分子RNA(snoRNA)是一类广泛分布于真核生物细胞核仁的小分子非编码RNA.近年来随着RNA组学的迅速发展,发现了一些特异性表达的snoRNA.研究表明其除在转录和转录后加工中起重要作用外,还与遗传疾病和多种身体机能有关.主要阐述了最新发现的脑特异性表达的snoRNA的功能.  相似文献   

7.
RNA干涉(RNAinterference,RNAi)是生物体内的一种通过双链RNA(dsRNA)来抵抗病毒入侵和抑制转座子活动的自然机制,它是转录后水平基因沉默(PTGS)的一种。RNAi的分子机制可分为三个阶段siRNA形成阶段、扩增阶段和效应阶段。RNAi作为基因沉默的有效工具,已被广泛应用于功能基因组学研究、基因治疗和新药的研究与开发等方面。  相似文献   

8.
MicroRNAs(miRNAs)是一类高度保守的、非编码的小分子RNA。miRNAs能在转录后水平调控基因表达,参与骨骼肌增殖、分化和再生。运动诱导骨骼肌生理性适应机制涉及多种信号转导途径,取决于训练量、强度、训练的频率和蛋白的半衰期。并且这些适应性的特征表现和运动方式有关。但这些生理性适应性变化和确切机制并不清楚,存在非常复杂的基因调控网路。骨骼肌特异性miRNAs的发现,为运动诱导骨骼肌生理性适应机制研究提供了新的思路,有利于认识运动性骨骼肌适应分子机制。  相似文献   

9.
AMPK/PGC-1α通路与运动诱导的骨骼肌线粒体生物合成   总被引:1,自引:0,他引:1  
骨骼肌运动适应的重要表现之一是线粒体的含量增加和构成改变,即"线粒体生物合成"。过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子是调节线粒体生物合成的关键性信号分子,在缺血、缺氧、低温、收缩及运动等刺激下,其表达增加激活包括核呼吸因子1和2及线粒体转录因子A在内的一组转录因子,启动线粒体DNA复制和转录而诱导线粒体生物合成。5′-一磷酸腺苷激活的蛋白激酶能通过一氧化氮、肌细胞增强因子-2、P38MAPK等靶点刺激PGC-1αmRNA和蛋白表达增加,并直接或间接作用于核呼吸因子、线粒体转录因子A等转录因子,从而在运动诱导的骨骼肌线粒体生物合成中发挥重要作用。  相似文献   

10.
DNA分子的复制严格遵循碱基互补配对的原则;在蛋白质合成过程中,决定一个氨基酸的密码子是信使RNA上三个相邻的碱基.在这部分知识中,涉及到一些有关碱基计算的问题,在做这些题时,学生极易出错.本文把有关碱基计算的问题归纳成几种类型,目的是帮助学生掌握碱基计算的规律和方法.1.某DNA分子,已知任何一个碱基的含量,可求出其它殖基的含量.例:已知某DNA分子,其中 A二 a%,则 G、T、C分别等于多少?解:根据 T=A,得 T=a%则△十T=Za%∴ C+G=1-2a%∵C=G=1/2-a%2.求碱基比例.DNA双链的组成,严格遵循碱基互补配对原则:A=T,C=G,∴就有:A+G/T+C=A+C/T+G=1,而A+T/G+C不一定等于1,可得这样一条原则:在DNA双链中,等于1的碱基比C+T/G+A=1,在两互补链中互为倒数;在双链中不等于1的碱基比A+T/G+C≠1,在两互补链中比值相同.例:某生物的一条DNA分子中基因Y的一条链上C+T/G+A=0.4,基因R的一条链上A+T/G+C=0.8,那么它们互补链上相应的碱基比分别是:A、0.8 0.8B、2.5 1.25 C、0.4 1.25 D、2.5 0.8  相似文献   

11.
低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)作为低氧诱导的核转录因子,通过对低氧反应基因(hypoxia responsive genes,HRGs)的转录调控,在分子水平上介导了细胞乃至器官系统对低氧的反应.就HIF-1的结构、低氧时(在哺乳动物组织中)表达部位的广泛性和低氧反应应答中HIF-1的表达以及与低氧训练的可能的分子机制进行了综述:HIF-1可能在启动或逆转组织对各种低氧、训练的适应或适应不良反应中起重要作用.  相似文献   

12.
镉对镉超累积植物龙葵抗氧化酶活性及基因表达的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
6周大的龙葵幼苗在30~100μmol/L CdCl2溶液中胁迫0~72h,叶和根SOD、POD、CAT和APX活性均随Cd浓度的提高和胁迫时间的延长而上升.实时定量PCR分析表明,100μmol/L CdCl2胁迫上调幼苗叶FSD1、CSD2、POD2和CAT2与根FSD1、CSD2、POD1和APX3的转录,下调叶POD1和CAT1与根CSD1、MSD1和CAT1的转录,而对叶CSD1、MSD1、APX1和APX3与根POD2、CAT2和APX1的表达水平无明显影响.这些结果表明Cd可增强或稳定多种抗氧化酶基因的转录水平或转录后水平的调节,提高酶活性.  相似文献   

13.
探讨一次跳绳运动对男大学生外周血单个核细胞骨代谢因子mRNA表达的影响.方法:7名骨密度、体脂正常的男大学生进行5分钟跳绳运动,运动前、运动后即刻、运动后恢复60分钟分别抽取静脉血,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞,并提取外周血单个核细胞RNA,荧光定量PCR测定外周血单个核细胞IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ、OPG、RANKmRNA的表达.结果:与运动前相比,运动结束后即刻IL-1β、IFN-γ、OPG、RANK mRNA表达水平升高,IL-6、TNF-αmRNA表达水平无显著性差异;运动结束后60分钟OPG、RANKmRNA表达水平仍显著高于运动前.结论:一次无氧运动强度的跳绳运动暂时性提高了骨代谢水平,外周血单个核细胞IL-1β等因子从转录水平参与了运动调节骨代谢的过程,可作为反映骨代谢水平的分子标记.  相似文献   

14.
利用同源克隆的方法,从商陆中克隆得到扩展蛋白基因的全长cDNA序列,命名为PaEXP1(GenBank 登录号为GQ851947).PaEXP1长1128bp,含有759bp的完整开放阅读框,编码252个氨基酸,分子量27.1kD,等电点8.55.PaEXP1氨基酸序列N端含有8个半胱氨酸残基,1个组氨酸(His-Phe-Asp,HFD)域,C末端存在4个保守的色氨酸残基,具有扩展蛋白的典型结构.系统进化树分析表明,PaEXP1属于扩展蛋白的α-扩展蛋白家族.Real time-PCR结果表明,PaEXP1主要在根中表达,低温、盐、重金属和渗透胁迫均强烈地抑制其基因的表达.酵母转化实验表明,转PaEXP1可以提高酵母的平均直径,说明PaEXP1参与细胞壁的松弛扩展和细胞的增大过程.  相似文献   

15.
从中药虎杖中通过RACE等方法克隆到一个查尔酮合酶基因的全长cDNA,命名为PcCHS1.该cDNA全长1182 bp,编码一个含393个氨基酸的蛋白质.体外酶促活性研究表明,重组PcCHS1在pH 7~8时催化形成查尔酮为其单一产物,在pH 9时除催化形成查尔酮外,还产生一定量的苯亚甲基丙酮.对PcCHS1第216位和第333位氨基酸进行了定点突变研究,结果表明这些位点对PcCHS1的体外酶促活性影响较大.  相似文献   

16.
超嗜热菌Aquifex aeolicus 亮氨酰-tRNA 合成酶(αβ-LeuRS) 是已知的唯一的双肽链LeuRS。通过αβ-LeuRS和大肠杆菌LeuRS相应肽段的重组和重组酶性质的研究发现,αβ-LeuRS的α亚基C末端36个氨基酸对于αβ-LeuRS的氨基酰化活力至关重要。αβ-LeuRS的两个亚基人为融合得到的单亚基酶SLeuRS-αβ,具有完全的野生型双亚基酶活力,其热稳定性显著增强。同时,通过亚基重组揭示了LeuRS 对于不同种属的tRNALeu的识别元件位于α亚基内,而其中的CP1 结构域不仅是LeuRS 行使编校功能的结构基础,对于LeuRS识别不同种属来源的tRNALeu 也是十分重要的。通过不同来源的LeuRS一级结构比较,克隆了单独的CP1结构域组成的肽(CP1),发现唯有A. aeolicus αβ-LeuRS 的CP1对错误的氨基酰化产物具有体外编校功能。它与其它3种来源于细菌LeuRS的CP1都能够编校误氨基酰化的古老形式的亮氨酸小螺旋 (minihelixLeu)。通过同源序列比较发现,在αβ-LeuRS的CP1内存在一个由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它对CP1发挥体外编校功能必不可少,引入原本不具有体外编校功能的E. coli的CP1 后则可使其获得编校功能,但是该模体不影响全酶的编校功能。αβ-LeuRS中与tRNA结合有关的亚基-β亚基也可以赋予E. coli CP1编校功能。这些研究结果充分表明,来源于古老的超嗜热菌A. aeolicus 的αβ-LeuRS 保留了进化的遗迹-具有编校活力的CP1和与其编校功能密切相关的由20个氨基酸组成的特异的结构模体,它们在进化过程中随着其它结构域招募进合成酶中而逐渐失去了对全酶编校功能的作用。这一发现有力地支持了aaRS通过纳入新的结构域以加速进化过程的理论,并且也从不同角度为aaRS/tRNA共进化理论提供了可靠的依据。  相似文献   

17.
肿瘤多药耐药 (multidrugresistance,MDR)是临床化疗成功最为严重的障碍.首先阐明了新拓扑异构酶II抑制剂沙尔威辛对MDR肿瘤细胞直接的细胞毒性作用及下调mdr 1基因和P 糖蛋白的作用.沙尔威辛能有效杀伤MDR细胞株,如K562/ A02,KB/VCR和MCF-7/ADR细胞,其杀伤能力与对相应亲本细胞相当,而明显强于几种临床常用的抗癌药物.沙尔威辛下调mdr-1基因和P-糖蛋白的表达,但并不影响MRP和LRP基因.其次,揭示了转录因子c jun的激活,在沙尔威辛下调K5 62 A0 2细胞内mdr 1基因表达及诱导凋亡过程中起着关键作用.沙尔威辛增加K562/A02细胞的c-jun表达明显早于其减少mdr-1基因的表达;c-jun反义寡核苷酸消除沙尔威辛升高c-jun蛋白、下调mdr-1基因表达的作用.沙尔威辛还促进JNK和c-jun磷酸化并增强转录因子AP1的DNA结合活性.此外,c-jun反义寡核苷酸还抑制沙尔威辛的凋亡诱导和细胞毒性作用.最后,进一步研究发现沙尔威辛本身不引起MDR表型.成功建立了对沙尔威辛具有8.91倍耐药的A549/SAL细胞株.该细胞株对抗代谢药产生6.70倍的耐药,但对多种其他天然来源的抗肿瘤药物、烷化剂以及铂类化合物则缺乏交叉耐药性.  相似文献   

18.
二硫键(-S-S)又称二硫桥或硫硫桥,是指两个硫原子之间的化学健,其键能较大(30—100千卡/摩尔),因而是一种很强的化学键.蛋白质分子中的两个半胱氨酸残基的巯基氧化可形成二硫键,它可以将不同的肽链或同一条肽链的不同部分连接起来.一般来说,由一条多肽链组成的小分子蛋白质(如:核糖核酸酶、溶菌酶)二硫键的比例较大,尤其是存在于组织的胞外蛋白质,如:牛血清清蛋白,二硫键含量特别高(66500的分子量,含7对二硫键),在r-球蛋白中也是如此(160000分子量含有16对二硫键).当然,并非所有的蛋白质都具有二硫键,特别是那些带有许多亚基的大分子蛋白质,则根本不含二硫键(如血红蛋白,胶原以及许多大分子酶).但就含有二硫键的蛋白质而言,它的存在对于蛋白质结构的稳定有着重要的意义.  相似文献   

19.
5'-磷酸腺苷激活的蛋白激酶(5'-AMP activated protein kinase,AMPK)为真核细胞的能量感受器,广泛表达于各种组织,由α、β和γ 3个亚基组成三聚体结构,α为催化亚基,β和γ为调节亚基.AMPK活性受细胞内能量状态变化的调控.AMPK的上游激酶包括LKB1和CaMKK两种.下游激酶已发现达数十种,主要包括:调节葡萄糖转运的GLUT4、NO、AS160和PGC-1α;调节脂肪酸代谢的ACCβ、MCD和HSL;调节糖原代谢的GS、TORC2和PFK;调节蛋白质合成的mTOR信号级联、eEF2和HuR;调节线粒体生成的PGC-1α和NRF1/2.运动时AMPK被激活,通过相应的作用靶调节能量代谢,以适应运动的需要.  相似文献   

20.
在高考备考复习中,由于知识内容多,复习难度加大,且从认知的观点来看,复习是对先前学习知识的回顾、整理和再认识的过程。从信息加工理论的角度分析,复习是对已有的信息的重新组合,使信息的排列更有序的一个过程。因此,复习不仅是一个回忆和熟练的过程,更重要的是一个再认识和再提高的过程。下面是我对高三生物学科的复习的几点建议:一、重视基础的落实(一)知识的理解要到位1、注意知其然,知其所以然例1:基因突变:DNA分子中碱基对的增添、缺失或改变而引起的基因结构的改变,就叫做基因突变。(2004年全国卷一)自然界中,一种生物某一基因及其三种突变基因决定的蛋白质的部分氨基酸序列如下:正常基因精氨酸苯丙氨酸亮氨酸苏氨酸脯氨酸突变基因1精氨酸苯丙氨酸亮氨酸苏氨酸脯氨酸突变基因2精氨酸亮氨酸亮氨酸苏氨酸脯氨酸突变基因3精氨酸苯丙氨酸苏氨酸酪氨酸丙氨酸根据上述氨基酸序列确定这三种突变基因DNA分子的改变是()A.突变基因1和2为一个碱基的替换,突变基因3为一个碱基的增添B.突变基因2和3为一个碱基的替换,突变基因1为一个碱基的增添C.突变基因1为一个碱基的替换,突变基因2和3为一个碱基的增添D.突变基因2为一个碱基的替换,突变基因1和...  相似文献   

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