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相似文献
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1.
采用单因子梯度试验法对影响雷公藤RAPD—PCIK反应的Mg^2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶的用量及DNA模板浓度进行了筛选。结果表明获得清晰、重复性高的雷公藤RAPD-PCR扩增条件为:20μL PCR反应体积中,2.0mmol·L^-1 MgCl2,0.2mmol·L^-1 dNTPs,0.2μmol·L^-1引物,50ng模板DNA,1UTaq DNA聚合酶。  相似文献   

2.
以渐危植物海菜花基因组DNA为研究对象,筛选引物UBC-818【序列为(CA)8G】研究并确定了该引物适宜的退火温度,对影响ISSR扩增效果的主要参数进行筛选和优化,确定了海菜花的ISSR分析的最佳反应体系:15μL反应体系中含25ng模板DNA,0.2mmol·L^-1引物,0.2μmol·L^-1dNTPs,2.0mmol·L^-1Mg^2+,0.5UTaq酶,1.5μL10×PCRBufferMg2+(-)[100mmol·L^-1Tris—HCl(pH8.3),500mmol·L^-1KCl].  相似文献   

3.
采用改进的CTAB法,成功地提取了北野豌豆及其近缘种的基因组DNA,电泳结果显示DNA质量和产量均较高,并以此DNA为模板,对ISSR的反应条件进行了优化,最终确定ISSR的反应体系为:总体积10μl,包括10ng的DNA,1倍的反应缓冲液,1.5mmol·L^-1MgCl2,2×10^-4mmol·L^-1(引物6和引物8)或2×10^-3mmol·L^-1(引物5,10和12)引物,0.2mmol·L^-1dNTP混合物和1.0U的Taq DNA聚合酶.ISSR扩增程序为:先在94℃下变性3min,然后在92℃下变性30s,50℃(引物5,6,10,12)或55.2℃(引物8)下复性30s,72℃下延伸1min,反应30个循环,最后72℃延伸5min.并基于此反应条件,最终筛选出5条ISSR引物用于进一步的研究.  相似文献   

4.
枇杷属植物RAPD反应体系的优化与应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
采用CTAB—蛋白酶K法提取了48份枇杷种质的DNA,以西班牙枇杷品种Ullera为模板DNA,对枇杷属植物RAPD反应体系进行优化研究,结果表明:25μL反应体系中,Taq DNA聚合酶、Mg2+、引物、模板DNA和dNTPs等5种主要成分的适宜浓度或用量分别是:Mg2+为2.0 mmol/L,Taq DNA聚合酶为1.0 U,引物为0.25"mol/L,dNTPs为0.100—0.125 mmol/L,模板DNA为25—30 ng。利用该优化体系对48份枇杷种质进行RAPD随机扩增,经琼脂糖电泳获得了清晰的扩增图谱。  相似文献   

5.
目的:建立以高效液相色谱法测定多维铁口服溶液中维生素B1含量的方法。方法:色谱柱为C18柱,流动相为离子对溶液(含1.5 mmol·L^-12戊烷磺酸钠和3.4 mmol·L^-12庚烷磺酸钠的0.24%三乙胺溶液,用冰醋酸调节pH值至3.0)-甲醇(80∶20),检测波长为254nm,流速为1.0 mL·min^-1,进样量为10μL。结果:维生素B1检测浓度的线性范围分别为4.87~24.9(r=0.999 3);平均回收率分别为103.3%(RSD=0.5%)。结论:本方法简便准确、灵敏度高、结果可靠,可用于该制剂中维生素B1的含量测定。  相似文献   

6.
水杨酸(SA)在切花保鲜中的作用研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
用不同浓度的水杨酸(20mg·L^-1、40mg·L^-1、60mg·L^-1、80mg·L^-1、100mg·L^-1)作保鲜液来处理康乃馨切花,测定SA对康乃馨切花鲜重变化率的影响及水分平衡值的影响;结果如下:(1)不同浓度SA处理的康乃馨切花,鲜重都呈现先上升后下降的趋势。在达到最大鲜重天数、鲜重增加量、推迟鲜重降低三方面,浓度为80mg·L^-1SA的效果最明显。(2)五种不同浓度的SA保鲜液都能够改善康乃馨切花体内的水分状况,增加切花的保水能力,与对照相比五种不同浓度的SA都推迟了水分平衡值的降低,其中80mg·L^-1SA的保鲜液效果最好。  相似文献   

7.
采用改进的CTAB法提取中国特有濒危裸子植物白豆杉(Pseudotaxus chienii)嫩叶总DNA,进行RAPD分析.分别研究了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2 和TaqDNA聚合酶用量对RAPDPCR扩增反应结果的影响.筛选并建立了适合于白豆杉RAPD扩增的反应体系:总体积25μL,其中10×PCR缓冲液(500mmol/L KCl,100mmol/L Tris-HCl,1.0%Triton X-100,20mmol/L MgCl2)2.0μL,引物(1.5μmol/L)0.5μL,dNTPs(10mmol/L)0.4μL,模板1μL(35ng),Taq酶0.8μL(0.5U),水20.3μL.  相似文献   

8.
用SDS法提取了苜蓿基因组DNA的模板。从100个10bp的随机引物中筛选出了12条能在11个苜蓿品种中均能扩增出清晰的片段的引物。应用L16(45)正交表,研究了DNA、dNTPs、Mg2 、Taq酶和引物的浓度对扩增迁移率重现性的影响。用这种方法建立的苜蓿RAPD-PCR优化反应体系为:20μL体系中含DNA模板的浓度是5.0mg/L、dNTPs浓度是0.175mmol/L、Mg2 浓度是1.25mmol/L、Taq酶在20μL的体系中是1.00U、引物浓度是0.40μmol/L。  相似文献   

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采用改进的CTAB法提取中国特有濒危裸子植物白豆杉(Pseudotaxus chienii)嫩叶总DNA,进行RAPD分析.分别研究了模板DNA、引物、dNTPs、Mg2 和TaqDNA聚合酶用量对RAPD PCR扩增反应结果的影响.筛选并建立了适合于白豆杉RAPD扩增的反应体系:总体积25μL,其中10×PCR缓冲液(500 mmol/L KCl,100 mmol/L Tris-HCl,1.0%Triton X-100,20 mmol/L MgCl2)2.0μL,引物(1.5μmol/L)0.5μL,dNTPs(10 mmol/L)0.4μL,模板1μL(35 ng),Taq酶0.8μL(0.5 U),水20.3 μL.  相似文献   

10.
本研究以辣椒基因组DNA为模板,优化辣椒SRAP反应体系中的参数,建立了一套适用于辣椒的SRAP-PCR最佳反应体系。在25μL反应体系中,模板DNA 50 ng、上下游引物各0.1μmol/L、dNTPs 0.1mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U、Mg2+浓度为2.0 mmol/L。扩增程序为:94℃3 min;94℃30 s、35℃30 s、72℃1.5 min,5 cycles;94℃30 s、54℃30 s、72℃30 s,35 cycles;72℃10 min,用2%琼脂糖凝胶电泳和8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增结果。利用该优化体系筛选引物,筛选出条带清晰、重复性好的15对SRAP引物组合,验证了体系的实用性。  相似文献   

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This design experiment in prayer education for Jewish students was motivated by a current educational concern: educating for spirituality and religious practice. Educators are tasked with formally nurturing spirituality (Wright 2001). It is known that attitude to religious observance may change during adolescence (Hyde 1963), thus attitude to prayer needs attention. The effects/consequences of prayer understanding reach beyond religious practice itself, to encompass issues of faith, identity, spiritual development and well-being (Sigel 2009). Here quantitative and qualitative analysis is used to measure the effects of a tefillah (prayer and its understanding) course on student attitudes to prayer.  相似文献   

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高校学生思想政治工作是高校管理工作的重要组成部分 ,也是保证高校办学的社会主义方向和培养合格的社会主义建设事业接班人的根本条件。当前 ,我国社会正处于转型期 ,高校学生思想政治工作面临着一系列新的情况。如何适应新的形势 ,进一步提高高校学生思想政治工作的实效 ,是需要我们深入探讨的一个重要课题。有鉴于此 ,本刊特约请我校从事学生思想政治工作的几位同志 ,以“高校学生思想政治工作研究”为题进行探讨。这一组文章 ,从不同的角度出发 ,坚持理论与实践相结合 ,探讨了高校学生思想政治工作面临的新情况和新问题 ,对加强和改进高校学生思想政治工作有一定的启发  相似文献   

20.
高校学生思想政治工作是高校管理工作的重要组成部分 ,也是保证高校办学的社会主义方向和培养合格的社会主义建设事业接班人的根本条件。当前 ,我国社会正处于转型期 ,高校学生思想政治工作面临着一系列新的情况。如何适应新的形势 ,进一步提高高校学生思想政治工作的实效 ,是需要我们深入探讨的一个重要课题。有鉴于此 ,本刊特约请我校从事学生思想政治工作的几位同志 ,以“高校学生思想政治工作研究”为题进行探讨。这一组文章 ,从不同的角度出发 ,坚持理论与实践相结合 ,探讨了高校学生思想政治工作面临的新情况和新问题 ,对加强和改进高校学生思想政治工作有一定的启发  相似文献   

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